1、硕 士 学 位 论 文题 目 沼泽红假单胞菌对藏鸡生产性能和免疫功能影响的研究作 者 欧 小 兵 完成日期 2013 年 3 月 24 日 学 科 门 类 农 学 专 业 基础兽医 研 究 方 向 微生物与畜禽生产、免疫机理指 导 教 师 郝葆青 教授 学 院 ( 系 、 部 ) 生命科学与技术学院 授予学位日期 年 月 日 沼泽红假单胞菌对藏鸡生产性能和免疫功能影响的研究 Study on the effect of Rhodopseudomonas palustris on production performance and immune function of Tibetan Chic
2、kensByXiaobing OuA ThesisSubmittedToSouthwest University for NationalitiesIn Fulfillment of the Requirements for Master DegreeSuPervisor: Baoqing Hao(Professor)College of Life Science and Technology Southwest University for NationalitiesChengdu,610041,Sichuan,P.R.CMarch 2013沼泽红假单胞菌对藏鸡生产性能和免疫功能影响的研究
3、摘 要抗生素作为饲料添加剂使用以来,在畜禽生产、疾病预防与治疗等方面都给人们带来了诸多的实效和便利。但抗生素滥用会给人们的身体、健康生活带来伤害。光合菌(PSB)菌体富含氨基酸、 VB3、叶酸、维生素 H 等多种维生素,促生长和抗病毒活性因子、类胡萝卜素、辅酶 Q 及多种生理活性物质。本文旨在考查沼泽红假单胞菌对藏鸡的生产性能、肠道形态及免疫功能的影响,探究沼泽红假单胞菌能否具有抗生素相类似的作用。本论文试验研究内容主要从几个方面实施的:首先,富集并分离出疑似沼泽红假单胞菌的 S1 菌株,经过显微镜观察、碳源利用试验、生理生化试验、活细胞吸收光谱扫描及分子生物学方面等鉴定试验以确定 S1 菌株
4、为沼泽红假单胞菌;其次,采用单因子随机试验设计,共 5 个组,在基础饲粮的基础上分别添加土霉素(100mg/kg) 、0.05%、1%、5%的沼泽红假单胞菌,在为期 42d 饲养中,记录采食量、死亡率,体重等生产指标,采取直肠粪便后做大肠杆菌与乳酸杆菌菌数的检测以及小肠组织切片法观察肠道结构等分析对藏鸡生产性能的影响;在采取试验鸡器官后称重以及 ELISA 法检测血清中免疫球蛋白 A 和免疫球蛋白 G 的含量等分析方法以研究沼泽红假单胞菌对藏鸡免疫性能的影响。本论文试验研究的结果与结论简述如下:(1)沼泽红假单胞菌在厌氧培养 8d 颜色转变为红褐色,平板呈凸起、湿润有光泽的菌落,染色后镜检呈红
5、色短杆状,能利用乙酸钠、乙酸、酵母膏、谷氨酸、丙酸钠等物质来促进细菌的生长,可产生过氧化氢酶,H 2S,具有叶绿素 a 与类胡萝卜素特征吸收峰,最后通过 16S rRNA 基因序列分析,判定 S1 菌株的归属。 (2)21d、42d 藏鸡的体重以对照组最低,抗生素组与沼泽红假单胞菌各组的体重显著提高(P0.05) 。1 21d 藏鸡的采食量试验中,对照组低于其他各组,添加抗生素和沼泽红假单胞菌能提高鸡的采食量,添加沼泽红假单胞菌与抗生素组间差异不显著(P0.05) 。从日增重来看, 121d 添加沼泽红假单胞菌的三个组的平均日增重均低于抗生素组,差异不显著(P0.05) ,其低中剂量与之差异相
6、对较小,2242d 与抗生素相比,低剂量藏鸡日增重明显低与抗生素组,差异显著(P0.05) 。藏鸡 121d 与 2242d 的料肉比以对照组最高,组间差异不显著(P0.05) ,142d 添加有降低了料肉比的趋势。沼泽红假单胞菌能提高 20d 藏鸡直肠粪便中的乳酸杆菌数量,差异不显著(P0.05) ,降低大肠杆菌数量组间差异极显著(P0.05) 。20 日龄的各沼泽红假单胞菌组能显著增加十二指肠、空肠、回肠的绒毛高度(p0.05) ,而且随着剂量的增加而呈递呈的趋势,沼泽红假单胞菌组无显著影响十二指肠、空肠、隐窝的深度(P 0.05) ,但却有降低隐窝深度的趋势。抗生素组无显著增加十二指肠、
7、空肠、回肠的绒毛、隐窝、绒毛与隐窝的比值。41d 时沼泽红假单胞菌组能显著增加十二指肠、空肠、回肠绒毛的长度,差异极显著(P0.05) ; 1%、5%剂量回肠的绒毛与隐窝比值与对照组及抗生素比较显著增加(p0.05) 。(3)与对照组与抗生素组比较,21d,42d 的藏鸡胸腺指数、脾脏指数、法氏囊指差异不显著(P 0.05) ,但是优于抗生素组。 21d 时,1%剂量组 IgA 含量与抗生素组差异显著(p0.05) ,而其他组差异不显著(P0.05) ,1%、5%剂量的 IgG 含量与其差异(P0.05) 。结论:参照伯杰氏鉴定细菌学手册 (第 8 版) ,通过生理生化特征及 16S rRNA
8、基因序列分析,判定为紫色非硫菌红螺菌目的沼泽红假单胞菌,沼泽红假单胞菌能促进藏鸡的生长,增加乳酸杆菌,降低大肠杆菌,增加小肠的长度,促进肠道的发育,改善肠道结构,促进生长,也能促进免疫器官的发育,而且明显提高了免疫球蛋白的含量,提升了机体的免疫能力及抗病力。关键词:沼泽红假单胞菌;分离与鉴定;生产指标;肠道菌群;肠道形态;免疫器官;IgA;IgGStudy on the effect of Rhodopseudomonas palustris on production performance and immune function of Tibetan ChickensAbstractAnt
9、ibiotics as feed additives has been brought a lot of effective and convenient for the livestock poultry production, disease prevention and treatment. However, it was too much residual in livestock and poultry body with the long-term feeding or unreasonable use of antibiotics, so it was produced the
10、problem such as drug resistance, and thats why to prompt us for exploring a kind of being growth, non-toxic, no side effect and no residue of green feed additives. Photosynthetic bacterium is a kind of universal existence in nature, a prokaryote of anoxygenicbacteria under photosynthesis. Among them
11、, Rhodopseudomonas palustris has been identified as a probiotics for feed additive. Aiming at the effects of photosynthetic bacteria in chicken production performance, and in the aspect of improve the immune function of research, there are still many issues worth exploring, and we proposed and imple
12、mented in this paper. In this experiment, after feeding the Rhodopseudomonas palustris, it was detected that the performance of Tibetan chicken, intestinal tract anatomy and morphology and immunology related indicators of change, to explore the possibility of the Rhodopseudomonas palustris in altern
13、ative the antibiotics in the production performance of Tibetan chicken, and the function of the immune system. The experiment has results and the conclusion was briefly as follows:Rhodopseudomonas palustris in anaerobic culture turn to red-brown, flat was raised, shiny colonies in moist After 8 days
14、.It is red short rod After staining. It can use sodium acetate, acetic acid, yeast extract, glutamic acid, sodium propionate and other substances to promote the growth of bacteria,and can produce catalase and H2S.It has a carotenoid chlorophyll absorption peak. Finally, through analysis for the 16S
15、rRNA gene sequence to determine attribution of S1 strains.Tibetan chickens weight(21d, 42d) is the lowest in the control group,the antibiotic group and palustris significantly increased body weight in each group (P 0.05).Tibetan chicken(1 21d) feed intake test, the control group is lower than in the
16、 other groups, antibiotics and palustris can increase intake of chicken.Between palustris group has no difference with the antibiotic group significantly (P 0.05). From daily gain perspective, adding palustris( 1 21d )average daily gain of the three groups were lower than the antibiotic group, and t
17、he difference was not significant (P 0.05). Compared with antibiotics at 22 42d, low-dose daily gain was significantly lower with Study on the effect of Rhodopseudomonas palustris on production performance and immune function of Tibetan ChickensIthe Tibetan chicken antibiotic group,and the differenc
18、e was significant (P 0.05). Tibetan chicken (1 21d and 22 42d )of the highest feed conversion in the control group,is no significant difference between groups (P 0.05), adding strains (1 42d) have reduced feed conversion trend. Palustris can increase the number of lactobacilli in rectal feces of Tib
19、etan chicken (20d). the difference was not significant (P 0.05),and reduce the number of group differences of E. coli was significant (P 0.05). Each palustris group can significantly increase the villus height of the duodenum, jejunum, ileum at 20d (p 0.05), but tended to decrease crypt depth. No si
20、gnificant increase in the antibiotic group duodenum, jejunum, ileum villi, crypts, villi and crypts ratio. Palustris group can significantly increase the duodenum, the jejunum, ileum villus length at 41d, the difference was significant (P 0.05); 1%, 5% dose ratio of ileal villi and crypts and antibi
21、otics comparison with the control group increased significantly (p 0.05),Compared with the control group, but better than antibiotic. Group of 1% Dose ( 21d) IgA concentration compared with antibiotic group,the difference was significant (p 0.05), 1% and 5% group of IgG have differences with the oth
22、ers(P 0.05).Conclusion:Through physiological and biochemical characteristics ,Refer to “Bergeys Manual of Bacteriology Identification“ (8th Edition),thus determin the S1 belongs to Rhodopseudomonas palustris of Rhodospirillum of non-sulfurthe purple bacterium. Study on the effect of Rhodopseudomonas
23、 palustris on production performance and immune function of Tibetan ChickensIIRhodopseudomonas palustris can promote the growth of Tibetan chicken,increase the number of lactic acid bacteria,and reduce the number of E. coli.It can increase the length of the small intestine, and promote the developme
24、nt of the gut and improve structure of intestinal.It also can promote the growth of immune organs,and significantly improves the immune globulin content and enhance immunity and ability of resisting disease.Keywords: Rp.palustris; isolation and identification; production index; intestinal flora; int
25、estinal morphology; immune organ; IgA; IgG;Study on the effect of Rhodopseudomonas palustris on production performance and immune function of Tibetan ChickensIII目 录摘 要 IAbstractI第一章 文献综述 .2引 言 21.1 光合细菌的研究进展 31.1.1 光合细菌的概述 .3第二章 沼泽红假单胞菌的分离培养和鉴定 152.1 实验材料 .152.1.1 细菌的来源 152.1.2 实验试剂及耗材 152.1.3 实验设备与
26、仪器 152.1.4 试剂配制 162.2 实验方法 .172.2.1 富集培养 172.2.2 菌株的分离与纯化 172.2.3 菌落及菌体形态的观察 172.2.4 碳源利用试验及生化鉴定 182.2.5 活细胞吸收光谱的测定 182.2.6 菌株分子生物学鉴定 182.3 实验结果与分析 192.3.1 富集培养特征 192.3.2 菌株镜检结果 192.3.3 碳源利用试验及生化鉴定结果 202.3.4 活细胞吸收光谱的测定结果 212.3.5 16S rRNA 基因序列分析 .212.4 讨论 232.5 本章小结 24第三章 沼泽红假单胞菌对藏鸡生产性能、肠道菌群及小肠道形态结构的
27、影响 .253.1 实验材料 25Study on the effect of Rhodopseudomonas palustris on production performance and immune function of Tibetan ChickensIV3.1.1 试验菌种 253.1.2 试验动物及饲粮 253.1.3 试剂及耗材 263.1.4 设备与仪器 263.1.5 试剂的配制 263.2 实验方法 273.2.1 试验设计 273.2.2 饲养管理 273.2.3 待测指标与方法 273.2.4 数据统计与分析 283.3 结果与分析 283.3.1 添加不同剂量的沼
28、泽红假单胞菌对藏鸡生长性能的影响 283.3.2 添加不同剂量的沼泽红假单胞菌对藏鸡肠道菌群的的影响 303.3.3 添加不同剂量的沼泽红假单胞菌对藏鸡小肠形态的影响 313.4 讨论 353.4.1 沼泽红假单胞菌对藏鸡生长性能的影响 353.4.2 沼泽红假单胞菌对藏鸡肠道菌群的的影响 363.4.3 沼泽红假单胞菌对藏鸡小肠形态的影响 363.5 本章小结 37第四章 沼泽红假单胞菌对藏鸡免疫功能的影响 384.1 实验材料 384.1.1 设备与仪器 384.1.2 试剂配制 384.2 待测指标与方法 384.2.1 免疫器官指数的测定 384.2.2 血清免疫球蛋白 A(IgA)与
29、含量的测定 394.2.3 免疫球蛋白 G(IgG)含量的测定 394.2.4 数据的统计与分析 394.3 结果与分析 .394.3.1 沼泽红假单胞菌对藏鸡免疫器官指数的影响 394.3.2 沼泽红假单胞菌对藏鸡血清 IgA、IgG 含量的影响 .424.4 讨论 434.4.1 沼泽红假单胞菌对藏鸡免疫器官指数的影响 43Study on the effect of Rhodopseudomonas palustris on production performance and immune function of Tibetan ChickensV4.4.2 沼泽红假单胞菌对藏鸡血清
30、IgA、IgG 含量的影响 .444.5 本章小结 45第五章 全文试验总结 465.1 总结 465.2 有待进一步解决的问题 46参考文献 .47攻读学位期间发表的学术论文 .53致 谢 .54作者声明 .55Study on the effect of Rhodopseudomonas palustris on production performance and immune function of Tibetan Chickens0沼泽红假单胞菌对藏鸡生产性能和免疫功能影响的研究报告人:欧小兵(西南民族大学,生命科学与技术学院,成都 610041)第一章 文献综述引 言自 20 世纪
31、二十年代年抗生素发现以来,抗生素在疫病防治方面发挥了至关重要的作用。人类的生活、生产也因抗生素发现而发生了巨大的变化 1。随着现代畜牧业的不断发展,抗生素得到了广泛应用。抗生素既可作为饲料添加剂可促进畜禽生长,又可作为抗菌药用于疾病治疗及预防。不过,抗生素给人们带来益处的同时也产生了一些负面作用。抗生素的滥用不仅损害动物机体免疫机能,造成免疫失败,而且使致病菌的耐药性增加从而引起动物和人类的感染治疗失败 23。如果长期食用残留过多抗生素的畜产品,抗生素会逐渐在人体内蓄积,从而可能导致突变、致畸、致癌等不利作用的发生。此外,动物粪便排泄到环境中,还会对人类生活和生态环境中的菌丛平衡构成极大威胁。
32、随着社会进步,食品安全越来越受到广泛地重视,人们对畜产品的质量要求越来越高 45。另一方面,抗生素的滥用导致我国畜产品出口受到了严格限制,大大地妨碍了我国产品的出口,必然会制约我国畜禽业的健康发展。因此,为了能解决这些问题,一种能促生长、无毒、无副作用、无残留的绿色饲料添加剂或益生菌逐渐成为研究的热点或焦点。Fuller 定义益生菌为可以促进肠道内菌群的平衡,并且对宿主有益的活性微生态制剂 6。按其名称可以分为酵母菌类、乳酸菌类、芽孢杆菌类。我国农业部于 08 年发布的 1126 号公告饲料添加剂品种目录中规定 16 种可以直接饲喂动物的饲料级微生添加剂菌种:沼泽红假单胞菌(Rhodopseu
33、domonas palustris)、地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis) 、两歧双歧杆菌 ( Bifidobacterium bifidum) 、保加利亚乳杆菌(Lactobacillus bulgaricus)乳酸片球菌 (Peds. acidilacticii)等。益生菌能在动物肠道内大量繁殖,通过产生一些抗菌物质,与有害物质进行占位竞争和营养竞争,平衡动物肠道菌群,提高饲料的转化率,促进畜禽生长,改善畜产品的品质。 Study on the effect of Rhodopseudomonas palustris on production performanc
34、e and immune function of Tibetan Chickens1光合细菌的菌体富含多种氨基酸及多种维生素(包括烟酸、叶酸、生物素等) ,抗病毒活性因子、促生长因子、辅酶 Q 及多种生理活性物质及类胡萝卜素、叶绿素等天然色素。研究表明,在营养价值方面光合菌高于植物蛋白饲料,甚至高于鱼粉的价值 7。目前,我国光合菌的应用主要集中在水产养殖、污水处理、色素生产等方面。王育锋等将 PSB 菌液连续 3 个月饲养投入养殖池,鱼体成活率较对照池提高了 27. 8%, 增产 183. 85 kg / hm2, 饲料系数降低 0. 13, 每 1 kg 鱼种生产成本降低 6. 96%1。曾
35、有日本研究者将 20 尾发生穿孔病的鲤鱼、鲫鱼放入浓度为109/ml 的光合菌 5 倍稀释液后中药浴 5 min, 再放入含 20% 光合菌液的水槽内, 经 57 d, 病鱼皮肤上的溃烂大多基本被治愈 8。然而在畜禽养殖上仅仅提到能促生长,提高蛋鸡淡季的产蛋率以及增强抗病能力。而对于光合菌的作用机制国内外很少见报道。因此,基于抗生素的副作用与光合菌的特点,有必要对光合菌的作用机理进一步的研究,能为光合菌在实际生产中提供一些可靠的理论指导。1.1 光合细菌的研究进展1.1.1 光合细菌的概述 光合细菌(Photosynthetic Bacteria, PSB),是一类普遍存在于自然界,能厌氧下进
36、行不放氧光合作用原核生物,其主要分布于湖泊、硫磺泉、水田、沼泽及海岸等。它能在厌氧的条件下进行光合作用,利用利用硫代硫酸盐、硫化氢及其他还原剂,能将 CO2 还原成有机物,并能固定大气中的氮。 1863 年,Ehrenberg 首次观察能使湖泊或沼泽水体变红的微生物的生长与光、硫化氢的存在有关。1883 年,Engelmann 根据这一事实:红色细菌能生成与细胞内色素吸收波长相同的光线,从而认为该菌能进行光合作用。Van Nie 用光合作用的共同反应式后用统一性的观点解释了光合成的现象,这为现代 PSB 的研究奠定了良好的基础。日本微生物学家小林正泰等研究发现 PSB 在废水处理方面效果显著,
37、一定程度上推动了 PSB 的研究进展 8。我国于 1987 年在上海召开了中日 PSB 的学术会议后,此领域的研究逐渐发展起来。1.1.2 光合细菌的分类根据光合作用的时候是否产氧,将 PSB 分为不产氧光合菌(non-oxygenic photosynthetic bacteria)与产氧光合菌两类,其中产氧光合菌以蓝细菌为代表;不产氧光合细菌则形成形态、生理及系统多样化的一类菌群 910。按照伯杰细菌鉴定手册第八版,将光合菌列为细菌门,真细菌纲,红螺菌目(Rodospirillales),Study on the effect of Rhodopseudomonas palustris o
38、n production performance and immune function of Tibetan Chickens2下分为绿菌亚目(Chlorobiineae)和红螺菌亚目( Rodospirillineae),红螺菌科(Rhodospirillaceae) 、着色菌科( Chromatiaceae) 、绿硫菌科(Chlorobiaceae)和绿色丝状菌科(Chloroflexaceae)四科。总的来说,现已知的光合细菌分为 1 目、2 亚目、4 科、19 属,49 种,见表 1-1。 1.1.3 光合菌的形态特征和性质光合菌属于革兰氏阴性菌,形态呈球形、卵圆形、半圆形、杆状及螺
39、旋状等。其中某些细菌细胞形态会随着生长阶段与培养条件的不同而发生一些变化。它们主要通过滑行运动、鞭毛运动或者不运动的 8。球状细胞的直径为0. 30.6m,繁殖以二分裂的方式进行,少数为极性神长分裂或者出芽生殖(沼泽红假单胞菌),一般不会形成芽孢。PSB菌体没有内囊体和叶绿体,却有类似叶绿体的结构。PSB菌体含有的叶绿素其实植物叶绿素a的光合色素类似。表 1-1 红螺菌目分类情况Table 1-1 Classification of Rhodospirillales科 属 Study on the effect of Rhodopseudomonas palustris on producti
40、on performance and immune function of Tibetan Chickens3绿色丝状菌科(Chloroflexaceae) 绿色丝状菌属(Chloroflexum)绿硫菌科(Chlorobiaceae) 绿菌属(Chlorobium)突柄绿菌属(Prosthecochloris)绿假单胞菌属(Chloropseudomonas)暗网菌属(Pelodictyon)格状绿菌属(Clathrochloris )红螺菌科(Rhodospirillaceae) 红螺菌属(Rhodospirillum )红假单胞菌属(Rhodopseudomonas) 红微菌属(Rhod
41、omicrobium)着色菌科(Chromatiaceae) 着色菌属(Chromatium)囊硫菌属(Thiocystis )八球硫菌属(Thiosarcina)硫螺旋菌属(Thiospirillum)荚硫菌属(Thiocapsa)闪囊菌属(Lamprocystis)网硫菌属(Thiodictyon)板硫菌属(Thiopedia )可变杆菌属(Amoebobacter)外硫红螺菌属(Ectothiorhodospira) 此外,还有些菌体含有有大量的类胡萝卜素,根据产生的色素不同,菌悬液呈粉红色、蓝绿色、绿色、棕红色及红色等 11。细菌类胡萝卜素与也叶绿素的吸光谱分别为450550nm、71
42、51050nm。PSB能在 1040的范围下生长繁殖,而最佳的温度应该控制在2835。适宜的光照强度范围是1100Lx 2000Lx, 光合菌能利用波长为700nm900nm近红外区的光,所以选用钨丝灯泡作为光源。最适宜的PH:78.5。镁、铁、钙、钾、钻、和钠等元素在光合菌生理代谢中起着非常重要的作用。PSB与绿色植物的光合作用机制不尽相同,藻类和绿色植物一般情况是将CO 2转化为葡萄糖并且释放O 2,而PSB无O 2产生,有时会产生H 2。绝大多数的光合菌能以厌气硫的还原菌所产生的硫化氢、CO 2作为营养源进行光合生长。PSB 在自然水域里的厌气层和好氧层都会发生碳素循环,在厌气层的光合菌
43、参加碳循环的同时也参加硫循环。Study on the effect of Rhodopseudomonas palustris on production performance and immune function of Tibetan Chickens41.1.4 光合菌的形态特征和性质光合菌属于革兰氏阴性菌,形态呈球形、卵圆形、半圆形、杆状及螺旋状等。其中某些细菌细胞形态会随着生长阶段与培养条件的不同而发生一些变化。它们主要通过滑行运动、鞭毛运动或者不运动的 8。球状细胞的直径为0. 30.6m,繁殖以二分裂的方式进行,少数为极性神长分裂或者出芽生殖(沼泽红假单胞菌),一般不会形成芽
44、孢。PSB菌体没有内囊体和叶绿体,却有类似叶绿体的结构。PSB菌体含有的叶绿素其实植物叶绿素a的光合色素类似。此外,还有些菌体含有有大量的类胡萝卜素,根据产生的色素不同,菌悬液呈粉红色、蓝绿色、绿色、棕红色及红色等 11。细菌类胡萝卜素与也叶绿素的吸光谱分别为450550nm、7151050nm。PSB能在1040的范围下生长繁殖,而最佳的温度应该控制在2835。适宜的光照强度范围是1100Lx 2000Lx ,光合菌能利用波长为700nm900nm近红外区的光,所以选用钨丝灯泡作为光源。最适宜的PH:78.5。镁、铁、钙、钾、钻、和钠等元素在光合菌生理代谢中起着非常重要的作用。PSB与绿色植
45、物的光合作用机制不尽相同,藻类和绿色植物一般情况是将CO2转化为葡萄糖并且释放O 2,而PSB无O 2产生,有时会产生 H2。绝大多数的光合菌能以厌气硫的还原菌所产生的硫化氢、CO 2作为营养源进行光合生长。 PSB在自然水域里的厌气层和好氧层都会发生碳素循环,在厌气层的光合菌参加碳循环的同时也参加硫循环。1.1.5 菌体营养成分PSB营养成分非常的丰富。从图1得知PSB菌体含有65.15%的粗蛋白,可溶性糖类20.31%,粗脂肪7.18%,粗纤维2.78%,灰分21.28%。PSB在蛋白水解后,其氨基图 1-1 PSB 菌体营养物质成分Figure 1-1 bacterial nutrien
46、t Ingredients of PSB 酸的含量也十分丰富,其中Thr、Asp、Ser、Glu、 Gly等含量位于2.5% -12. 5%之间。根据图2可知,PSB菌体也富含B族维生素,其中VB12的含量为酵母的200倍。除此之外,PSB菌体还含有辅酶Q10,类胡萝卜素及多种其他未知的生理活性物质,其中辅酶Q10的含量远高于酵母、菠菜叶和玉米幼芽的含量。 Study on the effect of Rhodopseudomonas palustris on production performance and immune function of Tibetan Chickens5PSB的
47、色素基本上由类胡萝卜素和菌绿素(Bch1)构成,已知的菌绿素有a,b,c,d,e,d等5种,每一种都有对应的吸收波长;已知类胡萝卜素主要包括螺菌黄素、玫红品、番茄红素、叶黄素等80多种。不同的PSB菌株所含的类胡萝卜素也不同,言世贤等研究发现从浑球红假单胞菌中所提取的类胡萝素为-胡萝卜素而从夹膜红假单胞菌中提取却是番茄红素 12。1.1.6 沼泽红假单胞菌沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris)属于光合菌红螺菌科红假单胞菌属,光照厌氧或黑暗好氧的光能异养型细菌,能利用环境中的有机物来合成自身所需的营养物质,酵母膏具有显著刺激生长的作用 13。最适生长温度:2639
48、,pH:5.08.7。厌氧的液体培养物在最初呈淡粉红色,后来变成红色直至棕红色。好氧培养物则无色或粉红色。沼泽红假单胞菌形态为杆状到卵状,大小约为0.50.8m1.02.0m ,以极生或亚极生鞭毛方式运动,繁殖方式为芽生。具有光合膜系统,是细胞质膜下的一些平行片层,并与细胞质膜相连。细胞内含细菌叶绿素a以及大量类胡萝卜素。1.2 光合菌的应用1.2.1 处理有机废水 20实际70年,日本学者研究出用PSB处理有机废水的工艺。近年来,我国在应用PSB处理废水取得一些成果,如酒糟废水、牛粪鸟废水、豆制品废水和高浓度脂肪酸废水的处理 14。用光合菌处理高浓度有机废水相对于传统方法(活性污泥法等)相比
49、具有以下的优势:(1)光合菌能在光照厌氧生长,也能黑暗有氧的条件下存活,处理高浓度有机废水时,废水不需要稀释,氧气的需求也不高,动力的消耗显著降低。 (2)处理时可获得许多光合成污泥,由于该污泥富含有菌体蛋白,并且该蛋白前景广阔。 (3)醋酸、苹果酸、丙酸、丁酸等挥发酸能被PSB利用。(4)某几类PSB菌属具有积磷和反硝化活性的特性。 (5)除氨效果很好,耐盐的能力也很强,而且受季节性影响较小,方便管理及推广。PSB也能显著的降低废水中的BOD和COD。黄宝兴等PSB(利用海藻酸钠)对生活污水中的氨氮、总氮和总磷的处理率去除率分别为87.68%,70.95%和71.90%,而添加纳米蒙脱石的固定化的PSB在处理去除率分别为91.30%,73.51%和84.88%。这说明PSB在处理高浓度有机废水有明显的优势 15。郭养浩等采用固定化光合菌的转盘式生物反应器以处理味精废水,结果表明在好氧的条件下的CO