1、第五章 黄酮类化合物,Flavonoids,分布及存在形式：黄酮类化合物是一类重要的天然色素，也是中药中一类重要的有效成分。广泛存在于高等植物及蕨类植物中。大多与糖结合成苷，称为黄酮苷类；有的未与糖结合，称为游离黄酮或黄酮苷元。截止到2003年，黄酮化合物总数已超过9000个。,第一节 概述,色原酮,2-苯基色原酮,黄酮的含义:以前是以二苯基色原酮(2-phenyl-chromone) 为基本母核衍生的一类化合物的总称，由于该类化合物大多呈淡黄色或黄色，且分子中多具酮基，因此称为黄酮。,定义：黄酮类化合物是泛指两个具有酚羟基的苯环（A-与B-环） 通过中央三碳原子相互连接而成的一系列化合物。,
2、基本结构,大多具有C6-C3-C6的基本骨架，且常有羟基、甲氧基、 甲基、异戊烯基等取代基。,二、黄酮类化合物的结构分类,1 黄酮和黄酮醇2 二氢黄酮和二氢黄酮醇 3 异黄酮和二氢异黄酮 4 高异黄酮5 查耳酮和二氢查耳酮类 6 橙酮类 7 花色素类8 黄烷醇类9 双苯吡酮类10 其他黄酮类,根据B环连接位置（2位或3位）、C环氧化程度、C环是否成环等 将黄酮类化合物分为以下几大类。,R=H 黄酮R=OH 黄酮醇,1 黄酮（flavones）黄酮醇（flavonols）,狭义的黄酮，即2苯基色原酮（2-苯基苯并吡喃酮）,木犀草素 （luteolin）,芹菜素（Apigenin ）,山奈素（ K
3、aempferide ）,槲皮素 R=H （ Quercetin ） 芦丁 R=芸香糖 （ Rutin ）,R= H 二氢黄酮R= OH 二氢黄酮醇,2 二氢黄酮（flavanones）二氢黄酮醇（flavanonols）,与黄酮和黄酮醇相比，其结构中C环的C2-C3位双键被饱和,甘草素,橙皮苷,二氢槲皮素,二氢桑色素,如橙皮中的橙皮素和橙皮苷；甘草中的甘草素和甘草苷。,如满山红叶中的二氢槲皮素和槲皮素共存，桑枝中的二氢桑色素和桑色素共存。,黄柏叶中具有抗癌活性的黄柏素-7-O-葡 萄糖苷也属于二氢黄酮醇类。,黄柏素-7-O-葡萄糖苷,3 异黄酮（isoflavones）和二氢异黄酮,母核为3
4、-苯基色原酮的结构，即B环连接在C环的3位上。,大豆素 R1=R2=R3=H 大豆苷 R1=R3=H R2=glc 葛根素 R2=R3=H R1=glc 大豆素-7，4-二葡萄糖苷 R1=H R2=R3=glc 葛根素木糖苷 R1=glc R2=xyl R3=H,豆科植物葛根中所含有的大豆素、大豆苷、大豆素-7，4-二葡萄糖苷、 葛根素和葛根素木糖苷均属于异黄酮类化合物。,紫檀素,鱼藤酮,二氢异黄酮类可看作是异黄酮类C2和C3双键被还原成单键的一类化合物。 如中药广豆根中的紫檀素就属于二氢异黄酮的衍生物。毛鱼藤中所含有的鱼藤酮也属于二氢异黄酮的衍生物，具有较强的杀虫和毒鱼作用。,麦冬高异黄酮A
5、 (ophiopogonone A),4 高异黄酮（homoisoflavones）,和异黄酮相比，其B环和C环之间多了一个CH2,5 查耳酮（chalcones）二氢查耳酮类（dihydrochalcones）,结构特点为二氢黄酮C环的1、2位键断裂生成的开环衍生物， 即三碳链不构成环。,2-羟基查耳酮,二氢黄酮,红花苷,新红花苷(Neocarthamin),红花苷(Carthamin),红花醌苷(Carthaone),梨根苷（phloridzin）,二氢查耳酮为查耳酮双键氢化而成,二氢查耳酮在植物界分布极少，如蔷薇科梨属植物根皮和苹果种仁中含有的梨根苷。,6 橙酮类（aurones）,黄酮
6、的C环分出一个碳原子变成五元环，其余部位不变， 是黄酮的同分异构体，属于苯骈呋喃的衍生物，又名噢哢。,硫磺菊素（Sulphuretin）,黄花波斯菊,矢车菊素 (cyanidin)、 R1=OH R2=H飞燕草素 （Delphindin）、 R1=R2=OH天竺葵素 (pelargonidin)、 R1=R2=H,7 花色素类 (anthocyanidins),矢车菊,可看成是脱去C4位羰基氧原子后的二氢黄酮醇类化合物。,8 黄烷醇类,根据C环上的3，4位存在羟基的情况分为黄烷-3-醇 和黄烷-3，4-二醇。,黄烷三醇类（Flavan-3-ols）,黄烷3，4二醇类（Flavan-3,4-di
7、ols),（-）表儿茶素,（+）儿茶素,主要存在于含鞣质的木本植物中。儿茶素和表儿茶素。,无色矢车菊素,9 双苯吡酮类,xanthones,又称为苯骈色原酮，母核由苯环和色原酮的2，3位 骈合而成，是一种特殊类型的黄酮类化合物。,异芒果素,常分布在龙胆科、藤黄科、百合科植物当中，如：存在于 石苇、芒果叶和知母叶中具有止咳去痰作用的异芒果素。,9 其他黄酮类,银杏素,包括双黄酮类，黄酮木脂体类，生物碱型黄酮等。,榕碱,水飞蓟素,类别 特点与区别 组内区别 黄酮和黄酮醇 2-苯基色原酮 3-OH（C2-C3双键） 二氢黄酮和 2-苯基色原酮 3-OH 二氢黄酮醇 （C2-C3单键） 异黄酮和二氢异
8、黄酮 3-苯基色原酮 C2-C3双键和单键 查耳酮和二氢查耳酮 C环开环 3碳链为双键和单键 橙酮 C环为五元环 花色素和黄烷醇 无4位羰基 离子和分子 其他类 均有色原酮结构,小结：各类黄酮类化合物的特点和区别,天然黄酮类化合物多和糖形成苷而存在，并且由于糖的种类、数量、连接位置及连接方式不同，组成了各种各样的黄酮苷类。,组成黄酮苷的糖类主要有单糖、双糖类、三糖类和酰化糖类。.单糖类：D-葡萄糖、D-半乳糖、D-木糖、L-鼠李糖、L-阿拉伯糖及D-葡萄糖醛酸等。,.双糖类：槐糖（glc 12 glc）、龙胆二糖(glc 16 glc)、芸香糖(rh 16 glc)、新橙皮糖（rh 12 gl
9、c）、刺槐二糖（rh 16 gal）等。,.三糖类：龙胆三糖(glc 16 glc 12 fru)、槐三糖(glc 12 glc 12 glc)等。 .酰化糖类：2-乙酰葡萄糖、咖啡酰基葡萄糖(caffeoylglucose)等。,（二）连接位置,黄酮苷中糖的连接位置与苷元的结构类型有关，黄酮醇类: 常形成3-、 7-、3-、4-单糖苷， 或3、7-，3、4-及7、4-双糖苷等.花色苷类:多在3OH连糖或形成3、5二糖苷,除O苷外还有C苷,牡荆素（Vitexin）,R=H 葛根素 R=Xylose葛根黄素木糖苷,生物活性： 1. 对心血管系统的作用 2. 抗菌及抗病毒作用 3. 雌性激素样作用
10、 4. 镇疼作用 5. 镇咳祛痰作用总之，黄酮类化合物具有多方面的生物活性，在天然药物化学中具有很重要的地位。, A环来自三个丙二酰辅酶A B环来自桂皮酰辅酶A 黄酮类的基本骨架是由桂皮酸途径（B环）与AAMA途径（莽草酸途径和乙酸-丙二酸途径） （A环）生物合成的。,黄酮类化合物生物合成的基本途径,第二节 黄酮类的理化性质及显色反应,一、性 状,多为结晶性固体，少数苷为无定形粉末。,2旋光性,游离的苷元中二氢黄酮（醇）、 黄烷 ( 醇 )（），其余则无光学活性。 苷类（），且多为左旋。,1晶形,3颜色,黄酮、黄酮醇及其苷类灰黄黄色,查耳酮黄橙黄色，,二氢黄酮、二氢黄酮醇不显色,异黄酮显微黄色
11、,色原酮：无色,黄酮（醇）：灰黄-黄色,异黄酮：微黄色,二氢黄酮（醇）：无色,呈色因素：结构中有无交叉共轭体系，助色团（- OH， -OCH3）数目及位置。,黄酮（醇）分子中，尤其在 7-位及 4-位引入-OH及-OCH3等助色团后，而使化合物的颜色加深。,花色素及其苷元的颜色随pH不同而改变,一般显红（pH 7）,紫（ pH8.5）,蓝（pH8.5）等颜色,二、溶 解 性,1苷元,游离苷元：,游离黄酮：有极性（含氧基团）； 难溶或不溶于水， 易溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙醚 等有机溶剂以及稀碱液（具有酸性） 不溶于石油醚。,2苷元, 黄酮、黄酮醇、查耳酮等更难溶于水,平面性强的分子，因分子与
12、分子间排列紧密，分子间引力较大。, 二氢黄酮及二氢黄酮醇等溶解度稍大,因系非平面性分子，故分子与分子间排列不紧密，分子间引力降低，有利于水分子进入，溶解度稍大。,R=H，二氢黄酮 R=OH，二氢黄酮醇, 花色苷元（花青素）类水溶度较大,虽也为平面性结构，但因以离子形式存在，具有盐的通性，故亲水性较强。,花青素,3苷类,苷元相同时，羟基糖越多，糖分子越多，水溶度越大。,同一苷元，3-O-葡萄糖苷的水溶度7-O-葡萄糖苷,三、 酸性与碱性 （一）酸性,酸性的来源：影响酸性强弱的因素：羟基的数目、位置综合起作用7,4-二OH 7-OH或4-OH 一般Ar-OH 5-OH5% NaHCO3 5% Na
13、2CO3 0.2% NaOH 4% NaOH, , PH梯度萃取 ,（二）碱性强酸下形成钅羊盐,-吡喃环上的1-氧原子，因有未共用 的电子对，故表现微弱的碱性，可与强无 机酸生成盐，但生成的盐极不稳定，加水 后即可分解。,四、呈色反应,（一）还原试验鉴别,1盐酸-镁粉（或锌粉）反应,黄酮（醇） 橙红紫红色 二氢黄酮（醇）,查耳酮、橙酮、儿茶素（-）,异黄酮类除少数例外，也不显色,操作：样品/乙醇中加入少许镁粉振摇，滴加 几滴浓HCl，即可显色。,少紫色蓝色,排除干扰 ：先作空白对照实验,Mg粉,2四氢硼钠反应,区别二氢黄酮类,上述四种黄酮,HCl,无色,红色,NaBH4是对二氢黄酮类化合物专属
14、性较高的一种还原剂,（二）金属盐类试剂的络合反应,C3-OH，C5-OH，邻二OH（+）,络合应具备的条件,1. 铝盐,1AlCl3溶液，络合物多为黄色，为显色剂和比色测定。,2 铅盐反应 醋酸铅反应与1%醋酸铅或碱式醋酸铅，可生成 黄红色沉淀 醋酸铅： 邻二酚羟基，或兼有3-OH，4-C=O5-OH，4-C=O 碱式醋酸铅：一般酚羟基类,此方法也可应用于提取分离,3ZrOCl2（锆盐）,5-OH黄酮类 3-OH,2%枸橼酸,黄（3-OH黄酮） 褪色（5-OH黄酮）,2% ZrOCl2,黄,甲醇,3-OH，4-酮基络合物稳定性 5OH，4-酮基络合物,原因：,4镁盐,鉴别两类二氢黄酮,黄酮、黄
15、酮醇及异黄酮显黄色橙黄色褐色,5. 氯化锶（SrCl2）,鉴别邻二OH,具邻二酚OH黄酮类/氨性甲醇,绿色棕色乃至黑色,6. FeCl3反应： Ar-OH显色剂,硼酸络合反应,三）硼酸显色反应,H+,H3BO4,5-羟基黄酮,2-羟基查耳酮,草酸存在下，显黄色并带绿色荧光 枸橼酸丙酮存在下则显黄色而无荧光,四）碱性试剂显色反应,1、日光及UV下，通过纸斑反应，样品用碱性试剂处理后颜色变化来鉴定黄酮类化合物。 常用碱性试剂：氨蒸汽，Na2CO3水溶液,氨蒸汽处理后的色变，置空气中随即褪去， Na2CO3水溶液则不褪色,2、利用碱性试剂反应鉴别分子中某些结构特征,2）黄酮醇类在碱液中呈黄色，通人空
16、气变为棕色,可与其他黄酮类区别,1）二氢黄酮在碱性中开环转为异构体-查耳酮，显橙黄色,橙皮素 橙皮查耳酮,第三节 黄酮类化合物的提取与分离,一、提 取,存在形式：,花、叶、果等组织中苷 木部坚硬组织中游离苷元,选择溶剂：,黄酮苷，极性稍大的苷元 ,丙酮、 乙酸乙酯、乙醇、水、 甲醇-水（1：1）、甲醇,花青素类可加少量酸（如 0.1盐酸）,黄酮苷元宜用极性较小的溶剂（氯仿、乙醚、乙酸乙酯）等提取,多糖苷类沸水提取,溶剂法 溶剂的选择 提取方法（煎煮法、渗漉法、回流法等）的选择,（一）溶剂萃取法,1醇浸液、去脂杂加p.e,水提取去水杂加多倍量高度醇,（二）碱提取酸沉淀法,适合酸性成分 具有Ar-
17、OH的黄酮,药材,碱水液,H+,OH-,沉淀 （黄酮苷，苷元）,水 （水杂，M+）,（三）炭粉吸附法适于苷类的精制,甲醇粗提液,活性炭,黄酮活性炭,沸水,沸甲醇,7酚/水,15%酚/醇,二、分 离,分离黄酮的常用方法：,（1）柱色谱,（2）pH梯度萃取法,常用分离工艺： 原料的提取浓缩液（水溶液）依次以石油醚、乙醚、乙酸乙酯、水饱和正丁醇萃取石油醚液 乙醚液 乙酸乙酯 水饱和正丁醇 母液 （脂溶性杂质） （水溶性杂质)回收 回收 减压回收苷元 单糖苷 多糖苷,（一）柱色谱法,1硅胶柱色谱,适于分离异黄酮、二氢黄酮（醇）及 高度甲基化（或乙醚化）的黄酮（醇）类,常用的分离方法有柱层析法、萃取法、
18、 铅盐法、HPLC法、薄层层析法等。,常用的吸附剂或载体有硅胶、聚酰胺及纤维 素粉等。也有用氧化铝、氧化镁及硅藻土等。,（1）分离对象：酚、醌、硝基化合物,2聚酰胺柱色谱,（2）原 理：氢键吸附,（3）影响因素：,黄酮类分子中羟基的数目与位置,溶剂与黄酮类 溶剂与聚酰胺,之间形成氢键缔合 能力的大小,（4）洗脱规律（先后顺序）,叁糖苷双糖苷单糖苷苷元, 苷元相同：, -OH位置：,邻位-OH黄酮对位（或间位）-OH黄酮, -OH多少：酚羟基少羟基多, 黄酮类型：,异黄酮二氢黄酮醇黄酮黄酮醇, 芳香程度：,芳香程度高，共轭双键多吸附力芳香程度高，共轭双键少,二氢黄酮查耳酮, 溶剂影响：,聚酰胺的
19、双重色谱性,以含水移动相（如甲醇一水）作洗脱剂，苷比苷元先洗下来。,以有机溶剂作洗脱剂 （如氯仿一甲醇）苷元比 苷先洗脱下来。,聚酰胺柱色谱 洗脱顺序：,E B A C D,3葡聚糖凝胶柱色谱,分离黄酮类化合物的机理：双重性,分离黄酮苷元靠吸附作用羟基少，极性小，吸附力弱，先被洗脱。,分离黄酮苷时分子筛性质起主导作用糖数量多，分子量大，分子筛时，先洗脱下来。,类型： Sephadex G型 （亲水性凝胶）Sephadex LH-20型 (羟丙基葡聚糖凝胶，水及极性有机溶剂均可),原理： “双重色谱”原理分子筛作用 吸附原理 （按分子大小分离） （按极性大小分离）应用：黄酮苷及苷元的分离 苷元的
20、分离洗脱顺序：分子由大到小被洗脱 极性由小到大被洗脱 叁糖苷 双糖苷 单糖苷 苷元 1-OH 2-OH 3-OH 4-OH 5- OH黄酮,葡聚糖凝胶（Sephadex gel）柱层析,Ve为洗脱样品时需要溶剂总量或洗脱体积， Vo为柱子空体积， Ve/Vo越小，化合物越容易洗脱。 从表中可以看出，首先洗脱下来的是苷类成分，按照分子筛原理分离，然后是游离黄酮类成分，按照吸附原理分离。,高效液相色谱法（HPLC）适用于各种黄酮类化合物的分离 原理：反相柱色谱（黄酮类化合物极性大）固定相：ODS流动相：水-乙晴不同比例,（二）梯度pH萃取法,酸性不同的黄酮苷元的分离,酸性：7,4- OH7-或 4
21、-OH 一般Ar-OH 5-OH,5%NaHCO3 5%Na2CO2 0.2%NaOH 4%NaOH,第四节 黄酮类化合物的检识与结构测定,测定一般步骤：,（1）化学反应,（2）PC、TLC,（3）UV光谱,（4）1H-NMR,（5）MS,（6）13C-NMR,一 化学反应确定化合物的类别,二、色谱法在黄酮类鉴定中的应用确定黄酮的种类与数量,（一）纸色谱（PC）,分离黄酮类化合物及其苷的混合物,1原理,分配色谱,2溶剂选择：,黄酮苷元酸性醇溶剂 花色苷元酸性水溶剂 HCl或HOAc 苷类双向展开,第一向展开剂：采用醇性溶剂,第二向展开剂：采用水或水溶液,如：n-BuOH-HOAc-H2O(4:
22、1:5 上层）,如：2%6%HOAc 等,3在不同展开剂中，苷、苷元的Rf值不同,醇性溶剂：Rf 苷元 单糖苷 双糖苷,水溶剂：Rf 三糖苷 双糖苷苷元,(二) 硅胶薄层色谱：(不用Al2O3）,分离与鉴定弱极性黄酮类,（三）聚酰胺薄层色谱,分离含游离酚羟基的黄酮及其苷类,三、紫外及可见光谱在黄酮类鉴定中的应用,紫外及可见光谱一般程序：,1测定样品在甲醇中的UV光谱 2测定甲醇+诊断试剂后的UV光谱 3苷类水解，或甲基化后水解测苷元或衍生物的UV光谱,（一）黄酮类化合物在甲醇溶液中的UV光谱特征,1两个谱带、与结构的关系,2各种类型黄酮的UV光谱特点,（1）黄酮及黄酮醇类,木犀草素(黄酮类)
23、槲皮素(黄酮醇类) ,（A）黄酮及黄酮醇类UV光谱（甲醇）,(二)加入诊断试剂后引起的位移及其在结构测定中的意义,诊断试剂：,因黄酮中具有酚羟基、羰基，加入某些试剂，使其化学结构变化，吸收峰位改变，这些试剂称为诊断试剂。,测定顺序,1样品/CH3OH,测定黄酮类型,2加诊断试剂,CH3OH+ NaOCH3,确定4-OH，3 - OH,CH3OH+ NaOAC,确定7- OH,t,对碱敏感的结构,CH3OH+ NaOAC +H3BO3,邻二OH,AlCl3/HCl与CH3OH, C3-OH、C5 - OH,AlCl3-AlCl3/HCl,邻二OH,3苷类水解后测定苷元的UV光谱，与苷比较,一般鉴
24、定程序： 先测定在甲醇中的光谱 再测定在加入各种诊断试剂后的紫外光谱 如为苷类，则可水解或甲基化后再水解，并测定苷元或其衍生物的紫外光谱,取代基：OH等，为助色团 依红移规律推断取代基团,黄酮（醇）： 带 II、带I均强 母核光谱特征 二氢黄酮类、异黄酮类：带 II强、带I弱 母核的推断（甲醇） 查耳酮、橙酮：带 II弱、带I强,将以上各种光谱数据（或光谱图）进行对比分析，即可获得有关结构信息。,加入诊断试剂: 甲醇钠： 强碱，所有酚羟基解离 醋酸钠： 碱性弱，酸性强的酚羟基解离 醋酸钠/硼酸：邻二酚羟基络合 三氯化铝： 3-OH，4-羰基 ，5-OH， 4-羰基络合邻二酚羟基上述相应吸收峰红
25、移,（1）母核光谱特征：母核结构（交叉共轭系统）是产生紫外吸收的基础，其中:由苯甲酰系统的电子跃迁产生的吸收峰为带II 220280nm由桂皮酰系统电子跃迁产生的吸收峰为带I 300400nm。不同母核的黄酮类化合物由于共轭系统（交叉共轭系统）的不同，由交叉共轭系统产生的带I或带II的峰位、峰形、吸收峰的强度也不相同，因此，据此可用于黄酮母核类型的判断。,黄酮类化合物母核UV吸收特征,母核类型 带II （nm） 带I （nm） 备注黄酮 250280（强） 304350（强） 典型的交叉共轭系统 黄酮醇（3-OH取代） 328357（强） 3-OH供电减弱 黄酮醇（3-OH游离） 358385
26、（强）3-OH供电共轭，带1红移,异黄酮 245270（强）( sh ) 桂皮酰系统破坏 二氢黄酮（醇） 270295（强）( sh ) 查耳酮 220270（弱） 340390（强）橙酮 220270（弱） 370430（强）,异黄酮 245278（强）( sh ) 桂皮酰系统破坏 二氢黄酮（醇） 270295（强） ( sh ) 查耳酮 220270（弱） 340390（强）橙酮 220270（弱） 370430（强）,二氢黄酮（醇） 异黄酮（二氢）由B环产生的桂皮酰系统不存在，带I弱，带II强,（2）取代基团对共轭吸收的影响,黄酮类核中引入-OH（酚羟基）等供电基团，使共轭程度增强，相应
27、的吸收峰红移。一般，A环引入OH，带II红移，B环引入OH带I红移。,羟基甲基化或苷化后，原酚羟基的供电能力 下降，引起相应的吸收峰紫移。 3-OH甲基化或苷化，带I紫移， 5-OH（与羰基形成分子内氢键）甲基化， 带I、带II均紫移515nm，4-OH甲基化，带I紫移310nm。,羟基乙酰化后，乙酰基的吸电作用，使原来酚羟基对共轭系统的供电能力消失，对光谱的影响亦将完全消失,黄酮 、黄酮醇加入诊断试剂后吸收峰（带I、带II）的位移规律诊断试剂 位移规律 归 属 NaOMe 带I红移40-60nm，强度不降 示有4-OH 带I红移50-60nm，强度下降 示有3-OH、但无4-OH NaOAc
28、 带II红移5-20nm 示有7-OH,2.加入诊断试剂后引起的位移及其在结构测定中的意义（见下表）,诊断试剂 位移规律 归 属NaOAc/H3BO3 带I红移12-30nm 示B环有邻二酚羟基带II红移5-10nm 示A环有邻二酚羟基（不包括5，6-邻二酚羟基） AlCl3及 AlCl3/HCl谱图=AlCl3谱图 示无邻二酚羟基 AlCl3/HCl AlCl3/HCl谱图AlCl3谱图 示有邻二酚羟基带I紫移30-40 nm 示B环有邻二酚羟基,诊断试剂 位移规律 归 属,带I紫移50-65 nm 示A、B环均可能有邻二酚羟基AlCl3/HCl谱图=MeOH谱图 示无3-及/或5-OHAl
29、Cl3/HCl谱图MeOH谱图 示可能有3-及/或5-OH带I红移35-55 nm 示只有5-OH红移60nm 示只有5-OH红移50-60nm 示可能有3-OH及5-OH 仅红移17-20 nm 示除5-OH外，尚有6-含氧取代,异黄酮、二氢黄酮（醇）的吸收峰（带II）位移规律,NaOAc 异黄酮 带II红移620nm 示有7-OH二氢黄酮（醇）带II红移3437nm 示有5，7-二OH带II红移5158nm 示有7-二OH,AlCl3/HCl AlCl3/HCl谱图与甲醇中的谱图比较异黄酮 带II红移1014nm 示有5-OH二氢黄酮（醇）带II红移2026nm 示有5-OH,诊断试剂 位
30、移规律 归 属,查耳酮、橙酮的吸收峰（带I）位移规律,NaOMe 查耳酮 带I红移60-100nm，强度增加 示有4-OH带I红移60-100nm，强度不增加 示有2-或4-OH橙酮 带I红移70-95nm， 示有或6-OH,AlCl3 及AlCl3/HCl 查耳酮、橙酮 （AlCl3较 AlCl3/HCl谱图）带I 红移4070nm 示有B-环邻二酚羟基查耳酮（AlCl3/HCl谱图较MeOH谱图）带I 红移4060nm 示有2- OH,诊断试剂 位移规律 归 属,四、氢核磁共振在黄酮类结构分析中的应用,（一）测试溶剂的选择及样品处理,1.氘代氯仿 适合苷元、苷OCH3,2.氘代二甲基亚砜（
31、DMSO-d6） 苷,3. 四氯化碳三甲基硅醚化的苷，苷元,（三）黄酮类化合物H的和J值规律,1A环质子,（1）5，7-二羟基取代,H-8 6.306.50（1H d J=2.5Hz）,H-6 6.006.20 （1H d J=2.5Hz）,（2）7-羟基取代,H-5 7.908.20 （1H d J=9.0Hz）,H-6 6.707.10（1H dd J=2.5Hz J=9.0Hz）,H-8 6.707.00 （1H d J=2.5Hz）,B环质子,（1）4-O-R取代,H-2，H-6 7.708.10（2H d J=8.5Hz）, H-3，H-5 6.507.10（2H d J=8.5Hz
32、）,（2）3，4-O-R取代,H-5 6.707.10 （1H d J=8.5Hz）,H-2 7.207.90 （1H d J=2.5Hz）,H-6 7.207.90 （1H dd J=2.5Hz J=8.5Hz）,C环质子,黄酮类,H-3 6.30（s）,（四）糖上的质子,H-1 4.006. 00（d）,-D-glc H1H2 60o J H1H2 = 23Hz,-D-glc H1H2 180o J H1H2 = 8Hz,5-OCH3上的质子, 3.504. 10,6-COCH3上的质子,脂肪族 l.652.10 芳香族 2.302.50,H-2”H-6” 4.006. 00（m）,四、质谱在黄酮类结构分析中的应用,多数苷元：,峰较强，为基峰，无须作成衍生物,EI-MS中,多数苷：,极性强，难气化，多作成甲基化或三甲基硅醚化衍生物，而获得,或不作成衍生物，也可用FD-MS，FAB-MS 等质谱技术，获得非常强的,黄酮类化合物苷元的EI-MS,2个裂解途径：,途径-,+,222,120,102,途径-,222,偶数质量， 偶数电子78,1.黄酮类基本裂解途径,黄 酮 类 基 本 裂 解 途 径,
