1、废血浆制备血凝质控物的探讨实用医技杂志 2004 年 9 月第 11 卷塑 9 塑旦里:!:!:!:!里?l833?2831 名应征青年乙型肝炎病毒携带情况调查任红莉,刘成(城固县医院,陕西城固 723200)中图分类号R512.62文献标识码B文章编号16715098(2004)09B 一 183301乙肝是我国当前流行最广泛,危害最严重的一种传染病,演变成慢性者较多,预后往往不良.根据报道乙型肝炎病毒(HBV)高发年龄 2O 岁39 岁,男多于女.为了进一步了解我县男性青年 HBV 的感染状况,我们将 1999 年到 2003 年 2831名男性应征青年 HBV 检测情况进行汇总,分析,其
2、结果报告如下.l 对象与方法1.1 对象 18 周岁22 周岁的男性青年.1.2 方法抽空腹静脉血 3m1 分离血清,HBV 检测采用酶联免疫法(ELlsA),检测乙型肝炎病毒表面抗原 (HBsAg),乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb),乙型肝炎病毒 e 抗原(HBeAg),乙型肝炎病毒 e 抗体(HBeAb),乙型肝炎病毒核心抗体(HBeAb).采用上海科华生物技术有限公司生产的酶联免疫试剂盒,每份标本采用双试剂做双份,严格按说明书要求操作并判定结果.2 结果1999 年至 2003 年应征青年 HBsAg 阳性率比较我们对 141 例 HBsAg 阳性者,又做了 HBsAb,HBeAg,H
3、BeAb,HBcAb 检测,发现 HBV 感染中 HBsAg 检出率最高 .其次为 HBcAb,HBeAg,HBeAb,而 HBsAb 仅 1 例.141 例HBsAg 阳性中,HBsAg,HBeAg,HBcAb 均为阳性者(大三阳)75 例 ,占总检人数 2.65;HBsAg,HBeAb,HBcAb 均为阳性者(小三阳)44 例,占总检人数 1.55;HBsAg,HBcAb均为阳性者 21 例,占总检人数 0.74;HBsAg,HBsAb 均为阳性者仅 1 例.3 讨论我们对 2831 名应征青年全部进行了 HBsAg 检测,查出HBsAg 阳性者 141 例,携带率 4.98%,与 199
4、2 年全国调查HBsAg 携带率 9.8%相比低了 4.92.由表可以看出,尽管我们查出的总携带率较低,但逐年有上升趋势,这 5 个年度的HBsAg 阳性率经统计学处理,各年度差异无显着性 (P0.05).HBsAg 阳性是感染 HBV 后首先出现的重要标志物 ;HBeAg 阳性提示 HBV 在血液中大量复制,是强传染性标志;HBeAb 阳性表示曾经感染过 HBV,现在传染性较小;HBcAb阳性是 HBV 感染后最早出现的标志性抗体,消失最晚,它阳性提示急性窗口期或既往感染过.我们查的 141 例 HBsAg 阳性者均无明显的临床症状和体征,大三阳者传染性最强,1 例伴 HBsAb 阳性者可能
5、是受不同亚型 HBV 感染所致 .我县 18 周岁22 周岁男性青年 HBsAg 携带率较低 ,原因可能是这些青年刚走出校门,在校养成的生活方式和卫生习惯较好,加之社会接触少,HBV 感染机会就少.另外乙肝疫苗的预防注射(乙肝疫苗在我国广泛推广应用仅 10a,可见我们调查的对象在低年龄期接受预防注射的相对较多)和一次性注射器的使用,所以携带率较低.参考文献:1郑怀宽.免疫学检验 ,1996,6:7089.E2许海魁,中华流行病学杂志,2002,2:23,33 何玉林 .中华流行病学杂志,2003.8:669.(收稿日期:20040613)废血浆制备血凝质控物的探讨王冬娥,邓坤仪,李栓文(中山市
6、博爱医院,广东中山 528403)关键词 血浆 ;血凝质控物 ;室内质控中图分类号R446.119文献标识码B文章编号16715098(2004)09B.183302凝血酶原时间(PT),活化部分凝血活酶时间(APTT)和纤维蛋白原(Fib)试验的质控物多依赖进口,价格昂贵.我们收取实验后剩余的健康孕妇混合血浆制备血凝质控物,经过应用观察,认为是实验室自制室内质控的一种简单,实用的方法1 材料和方法作者简介:任红莉(1958 一),女,陕西城固人,19“80 年毕业于宝鸡卫生学校,主管检验师.?1834?实用医技杂志 2004 年 9 月第鲞笙!塑工圭旦!:曼竺!竺:!:!:!1.1 标本 0
7、.2ml 抗凝剂(109mmol/I 枸橼酸钠)1.8ml静脉血 RCF2500g/10min 分离血浆.1.2 仪器法国 StagoCompact 全自动血凝仪.1.3 试剂配套试剂.1.4 收集当日上午实验后剩余的混合血浆样品,立即进行分装,测试,制成正常参考范围质控物(N)及异常参考范围质控物(P)贮存于一 29C 低温冰箱内.1.5 使用前置于 37C 水浴中快速熔化.S,1.6 每日分别对 N,P 质控物重复测试 2 次.按 V 一 一.1c100.V 一100,V.:1OO%,X2X3(X 为第 l 天测定均值,X.为第 1 天测定值加第 2 天测定值之均值,X.为第 l 天测定值
8、加第 2 天测定值加第 3 天测定值之均值,依此类推)2 结果和讨论2.13 项指标变异百分率我们进行二批质控物的比较,变异百分率见表 1.N 为正常参考范围质控物.P 为异常参考范围质控物,s为时间单位:秒.2.2 二批变异百分率均5,符合质控标准 RCV62.3Stago 配套质控物参考范围 PT(N/P),APTT(N/P),Fib(N/P)分别为 l1.5l5.5s,18 26s;28s 38s,47s63s;2.75g/L3.85g/L,0.9g/l1.4g/I;我们制备的质控物基本上落在这一范围内,符合配套试剂参考范围要求.2.4 鉴于凝血因子是具有生物活性的物质,血浆样品在 4(
9、保存时,1/I 因子会被激肽释放酶激活,样品必须在一 25C 或更低的温度下保存.我们实验亦证明,普通冰箱冰格不宜贮存自制的血浆质控物.2.5 应用浮动均值变异百分率进行室内质控.简单实用,只需收集 1d 的废弃标本血浆 2Om1 分别制成质控物 N 和 P.就足以供 20d 的质控用.我们在应用新一批自制的质控物前,均用配套的正常范围和异常范围的定值质控物进行校正.衰 1 二批质控物变异百分率(Jl=20)参考文献:1郑家齐.医学检验质量控制M.北京:人民卫生出版社,1998:8591.(收稿日期:201140526)流行性乙型脑炎特异性 IgM(ELISA)诊断试剂盒的改进和应用谢红生,赵
10、晓玲,穆群样,党麦雅,于智君(西安市第八医院,陕西西安 710061)摘要流行性乙型脑炎夏秋季发病,与中毒性痢疾等其他脑部疾惠易相混,仅靠临床症状诊断,可靠性差,易延误治疗,造成后患.因此,我们改进了乙型脑炎特异性 IgM 诊断试卉】盒,缩短时间,当天抽血 100rain 内即可出报告,在短时间内,为临床提供可靠依据.关键词 流行性乙型脑炎 ;酶联免疫吸附试验;特异性 IgM 诊断试刺盒中图分类号R512,32文献标识码B文章编号16715098(2004)09B 一 1834021 材料和方法1.1 血清来源 l994 年至 1995 年(用常规法已测得阳性标本)34 份 .1.2 抗原用乙
11、脑病毒(北京生研所提供)感染乳鼠,发病后取脑组织研磨制 1o%脑悬液,取上清液冻存,即为抗原.1.3 抗乙脑病毒 IgM 酶标结合物,由四医大微生物教研室自己标记制备.1.4 马抗人 IgM(四医大微生物教研室提供).1.5 其他试剂:邻苯二胺,北京化工厂制.稀释液 PBS 采用常规用试剂配制,改良后用高盐稀释液(1.5NaCI).1.6 方法用马抗人 IgM 包被(2pg/m1)4OC.3Omin,用生理盐水洗涤 3 次,然后加血清 1:lOO 倍稀释每孔 o.1ml,4O(,3omin,洗板( 同上),加酶标抗体抗原各 o.1mllL.轻震荡.放 40C3omin.洗板 4 次,/Juo,
12、lmlOPD 显色(40C10min) 同时设空白,阴,阳对照各一孔,490nm 滤光比色,得出 0D 值,(南京分析仪厂生产酶标比色仪).2 结果2.1 检测 lgM 的敏感性取 lO 份常规法已证实阳性的标本.同时作快速法,测得 9 份阳性,符合率达 9o.2.2 特异性 lO 份 IgM 阳性血清,加等量 2 一硫基乙醇 37C30min,再放冰箱 4(,30min,然后再用快速法检测 IgM 则全部阴性,同时 1O 份标本经 2ME 处理,作快速检测则全部阳性,证明我们用快速法所测得阳性结果 IgM 是可靠的 .另取 5 份出血热 IgM 阳性患者血清,5 份发热病人血清 ,5份正常人(献血员) 血清,4 份类风湿因子阳性病人血清,同时作快速法,无 1 例阳性.见表 1.与乙脑 IgM 无交叉反应 .
