1、动物生理学实验设计水产 0902 班第四组指导老师：（副教授）（教 授）执 笔 人：不同因素对鱼类体色的影响华中农业大学水产学院水产养殖专业 0902 班- 1 -不同因素对鱼类体色的影响【前言】鱼类和其他脊椎动物一样，体色的变化是由于色素细胞内色素颗粒的运动而造成阴暗和着色的不同而引起。色素细胞的胞质流动可将色素颗粒扩散至细胞外周或集中于细胞的中央。色素扩散就使体表皮肤颜色变深，集中就会使体表皮肤颜色变浅。【实验目的】了解鱼类体色变化的原理，观察各种因素（肾上腺素、乙酰胆碱、垂体悬液、光照）对体色的影响，掌握其研究方法。【实验原理】色素细胞内色素颗粒的移动受神经和激素的双重调节。交感神经末梢
2、分泌的去甲肾上腺素或肾上腺分泌的肾上腺素能使鱼体体表黑色素细胞的色素颗粒浓集，使鱼体体表颜色变浅；副交感神经末梢分泌的乙酰胆碱和垂体分泌的促黑激素、垂体后叶素使鱼体体表黑色素细胞的色素颗粒扩散，从而使鱼体体表颜色加深；而松果体分泌的褪黑激素亦可使黑色素积聚，使鱼体体表颜色变浅。眼和松果体是光感受器，能将外界环境的信息传到神经或内分泌系统，以调节控制鱼类体色的变化。华中农业大学水产学院水产养殖专业 0902 班- 2 -【实验对象】鲫鱼 7 尾（应选用一些较小型的鲫鱼，体长约 10cm 左右为宜）【实验药品】肾上腺素（1：200000）、乙酰胆碱（1：200000，未用，采用其他组数据）、垂体悬
3、液、鱼用生理盐水、蒸馏水【仪器与器材】剪刀、镊子、注射器及针头、显微镜、载玻片、离心管、离心机、匀浆器、玻璃缸、培养皿、纱布、毛巾、解剖盘、棉球【实验步骤】1、垂体悬液的制备用刀剖开鱼两眼上缘的颅顶骨，除去脂肪，露出鱼脑，在其前下方可见一小白点即为脑垂体，用镊子将垂体轻轻挑出，垂体应完好无损。 取垂体，放置于匀浆器中，导入适量生理盐水，充分研磨后，导入离心管中，将离心管放在离心机中 1500r/min 离心，取上层液备用。2、配置肾上腺素、乙酰胆碱3、试验项目：1、将 6 条鲫鱼分成 2 组，分别为背光组和对照组，分别放入华中农业大学水产学院水产养殖专业 0902 班- 3 -不同玻璃缸中置于
4、相同条件下饲养一段时间。分别编号为组、组。2、将 1 组的鲫鱼分别编号-1、-2、-3，2 组鱼编号-1、-2、-3 。-1， -1 组为给肾上腺素实验组，-2、-2 为给垂体悬液实验组，-3、-3 为给生理盐水实验组。3、给肾上腺素实验组的鲫鱼在腹腔中注入 1ml 肾上腺素，乙酰胆碱实验组、垂体后悬液实验组实验组和生理盐水实验组分别按相同的方法注入等量的乙酰胆碱、垂体后叶素和生理盐水。4、然后，将组鲫鱼玻璃缸置于背光（即黑暗）处，组鲫鱼放置于日光下（阴天情况下可以适当补光）放置约 2 小时左右后。5、观察每组组内注入肾上腺素、乙酰胆碱和垂体悬液的鲫鱼与注入生理盐水鲫鱼的体色不同，再比较 2
5、组中在注入相同试剂鲫鱼的体色变化。【注意事项】1实验用的鲫鱼应选用一些体型较小的鱼类。2激素及生理盐水应注射到腹腔中。华中农业大学水产学院水产养殖专业 0902 班- 4 -【参考文献】杨秀平 动物生理学实验（第二版）北京： 高等教育出版社， 2009解景田 赵静 生理学实验（第二版）北京：高等教育出版社， 2009华中农业大学水产学院水产养殖专业 0902 班- 5 -【实验结果与分析】组（正常光）： 肾上腺素垂体悬液鱼用生理盐水华中农业大学水产学院水产养殖专业 0902 班- 6 -组（黑暗）：垂体悬液鱼用生理盐水肾上腺素垂体悬液鱼用生理盐水华中农业大学水产学院水产养殖专业 0902 班-
6、 7 -结果分析与讨论：1、通过、组中三小组（1、2、3）的对比，可以在显微镜下观察到鳞片细胞中黑色素颗粒的变化。注射鱼用生理盐水的鳞片，黑色素颗粒保持正常状状态；注射垂体悬液的鳞片，黑色素颗粒扩散；注射肾上腺素的鳞片，黑色素颗粒收缩。其原理是肾上腺素能使鱼体体表黑色素细胞的色素颗粒浓集，使鱼体体表颜色变浅；垂体悬液中含有的促黑激素、垂体后叶素能使鱼体体表黑色素细胞的色素颗粒扩散，从而使鱼体体表颜色加深。2、过对、组的对比，可以观察到，在黑暗条件下，鱼体鳞片的黑色素颗粒较正常光条件下发生了聚集，鱼体颜色变浅。这是由松果体分泌的褪黑色素引起的。在光照条件下，鱼眼接受光的刺激，对松果体产生抑制，阻
7、碍了褪黑色素的合成与分泌，而在黑暗条件下，抑制消失，松果体分泌褪黑色素，使得黑色素颗粒聚集，鱼体颜色变浅。3、在组中，注射垂体悬液的鱼类鳞片黑色素颗粒扩散成雾状，黑色素颗粒密度小，扩散程度大。在组中，注射垂体悬液的鱼类鳞片黑色素颗粒扩散程度相对于组较小。原因可能是由于在黑暗条件下，松果体分泌的褪黑色素与垂体悬液发生了拮抗作用，阻碍了垂体悬液对于黑色素颗粒的凝聚作用。华中农业大学水产学院水产养殖专业 0902 班- 8 -4、在组中，发现注射肾上腺素的鱼类鳞片有部分黑色素颗粒仍未出现聚集，保持雪花状，可能是由于在黑暗条件下，鱼体分泌的其它激素含量发生变化，导致肾上腺素的作用效果发生变化。猜测可能
8、有以下两种理由：一种使得肾上腺素对于黑色素颗粒的聚集作用减弱；另一种可能加快了肾上腺素的作用时间，使得肾上腺素分解加快，鱼体黑色素颗粒恢复正常。5、在鱼体表面的观察时发现，鱼体颜色加深表现的不明显；反之，鱼体颜色变浅可以很清楚的观察到。这是由于鱼体本身就具有颜色，并不容易观察到鱼体颜色的加深。【后记】1、取垂体的时候应该连同垂体的附带腺体一同提取2、由于垂体悬液中含有各项激素，因此可能会导致实验结果与实验理论不符，属于正常。3、研磨垂体时滴加少量鱼用生理盐水，不可过多。4、给鱼类注射试剂时，可遮住鱼类眼睛，避免鱼类过于挣扎。在鳞片连接处注射，较为方便。5、注射肾上腺素时，应该注意肾上腺素具有增强鱼类代谢水平的作用，因此，因注意鱼类的给氧，避免鱼类因缺氧而死亡，导致实验结果发生变化。6、显微镜下观察时，应挑取鳞片不同部位观察，以使观察结华中农业大学水产学院水产养殖专业 0902 班- 9 -果更为精确。
