1、植物生长调节剂对甜叶菊增殖和生根的影响第 2 期(总第 93)2008 年 4 月中国林副特产ForestBy-ProductandSpecialityinChinaNo.2(GSNO.93)Apr.2008植物生长调节剂对甜叶菊增殖和生根的影响张子学,杨久峰,檀赞芳(安徽科技学院,安微风阳 233100)摘要:以甜叶菊为材料,研究不同种类,不同浓度的植物生长调节剂对甜叶菊继代苗的增殖及生根的影响.试验结果表明:适宜的增殖培养基为 MS+BA0.4mg/L+NAA0.1mg/L,最高增殖倍数达l4.4 倍;适宜的生根培养基为 MS+IBA0.25mg/L,生根率达 85.7%关键词:甜叶菊;组
2、织培养;增殖;生根;植物生长调节剂ImpactofplantgrowthregulatorsongrowthandroottakingofSteviarebaudianaZhangZixue,YangJiufeng,TanZanfang(AnhuiScienceandTechnologyUniversity,AnhuiFengyang,233100)Abstract:Steviaexplantswasusedasmateria1.Theeffectofmultiplicationandrootagewithtreatmentsofdifferentplantgrowthregulatorsan
3、dtheirconcentrationswasstudiedinsubcultureofStevia.Theresultsshowedthattheap-propriatemultiplicationmediumwasMS+BA0.4mg/L+NAA0.1mg/L,themaximummultiplicationcoefficientreachesto14.4timesandrootagemediumwasMS+IBA0.25mg/L,rootagerateof85.7%.Keyword:Stevia;tissueculture;multiplication;rootage;plantgrow
4、thregulator甜叶菊是一种多年生草本菊科植物,为短日照植物.原产于南美洲的巴拉圭和巴西交界处的阿曼拜山脉,其叶片中含有的甜叶菊糖苷,其甜度相当于蔗糖的 250300 倍,但所含热量仅为蔗糖的 1/300 左右,已作为天然的甜味添加剂替代糖精广泛应用于食品工业,例如在很多清凉饮料,果实罐头和淹渍食品乃至牙膏和香烟等生产上的应用.南美洲各地还将其应用于医学临床实践,不仅无副作用,而且作为强壮剂,醒酒剂,健胃剂.并对肥胖症,低血糖,糖尿病,d,JD龋齿,高血压,心脏病等具有一定的防治效果和辅助疗效.甜叶菊的繁殖有种子,扦插和压条分根等方法,一般以种子育苗法简便宜行,但仅限于常规种的繁殖,而目
5、前推广的甜叶菊品种多为杂交种,人工制种产量低,自交后代分离范围大,会造成产量品质大幅度下降5,不能适应甜叶菊产业化的要求.采用组织培养快速繁殖技术,既可保持优良品种的特征特性,又可加速优良品种的繁殖3“.本试验利用植物激素 BA,TDZ,NAA 和 IBA 对甜叶菊的增殖和生根进行研究,为甜叶菊快速繁殖技术体系建立提供参考依据.l 材料与方法1.1 材料试验为安徽科技学院生物技术中心提供的无菌甜叶菊试管苗.实验于 2006 年 34 月在安徽科技学院生物技术中心组培室进行的.1.2 试验方法本试验用培养基为 MS,均添加琼脂 4.1g/L 作凝固剂,食用蔗糖增殖 30g/L,生根 20g/L,
6、pH 为 6.00.2.培养温度为 232,光照 13/h,光照强度 2000Ix.表 l 甜叶菊增殖和生根处理组合1.2.1 增殖培养.增殖培养基设置 l2 个处理(见表 1),每处理 0.5L,每处理 l5 瓶,每瓶接种 1.52.0cm 高的芽 3 个,处理 20d 后统计芽的增殖情况.1.2.2 生根培养.生根培养基共 11 个处理(见表 1),每个处理各 lL,每处理 3O 瓶,每瓶接种 1.52.0cm 高的芽 3 个,处理 20d 后观察结果.1.3 统计方法.增殖处理随机抽取 2O 丛统计增殖倍数 ,生收稿日期:2007 一 O9 一 l81)基金项目 :安徽省科技厅项目(04
7、023069),安徽科技学院青年基金 (2006YzOl2)132008 点中国林副特产第 2 期根处理抽取 15 瓶统计生根率和生根数量,并进行方差分析及显着性检验.2 结果与分析2.1BA 和 TDZ 分别与 NAA 组合对甜叶菊增殖的影响处理 20d 后,不同浓度的 BA 与 NAA 和 TDZ 与 NAA的组合对甜叶菊的增殖效果不同.其增殖情况及差异显着性见表 2.表 2 不同处理对甜叶菊增殖的差异显着性由表 2 可知:甜叶菊无菌苗在添加不同浓度的 BA 和NAA 与 TZ 和 NAA 培养基上,均可大量增殖,增殖倍数在6.7514.4 之间变化.在不同处理的增殖培养基上均能分化出丛芽
8、,但各处理间的增殖量和增殖倍数存在一定的差异.方差分析表明,TT 处理间,B,B4 处理间和 B2,B5处理间差异不显着,其它处理间均存在显着差异.由表 2 还可以知道:NAA 和 BA 组合,在 NAA 浓度一定的条件下,随着 BA 浓度的升高.甜叶菊的增殖效果逐渐增强,这说明试验区间范围内随着 BA 浓度的升高对甜叶菊的增殖起主导作用.当 BA 在浓度为 0.1mg/L 时.随着NAA 浓度的升高,甜叶菊的增殖效果有增强的趋势,但处理间差异性不显着;当 BA 在浓度为 0.2mg/L 和 0.4mg/L 时,随着 NAA 浓度的升高,甜叶菊的增殖效果减弱,但增殖效果比 BA 浓度为 0.1
9、mg/L 时增殖量高,其中以 BA 浓度为0.4mg/L 与 NAA 浓度为 0.1mg/L 处理组合增殖率最高 ,达14.4 倍.图 1 甜叶菊的增殖NAA 和 TDZ 组合,在 NAA 浓度较低的条件下,随着TDZ 浓度的升高 ,甜叶菊的增殖有逐渐上升的趋势;在 NAA浓度较高的条件下,随着 TDZ 浓度的升高,甜叶菊的增殖呈现低一高一低的抛物线状分布.其中以 NAA0.2mg/L 与14TDZ1.5mg/L 处理组合增殖率最高,达 1O.65 倍.总之 T 组合和 B 组合的 12 种培养基均可促进甜叶菊不定芽的增殖(见图 1a,b).其中 B3 增殖芽数达到了显着水平,增殖效果最好.其
10、生长状况也很好,抽生的新芽高平均 34 锄,叶色浓绿,所以甜叶菊增殖的最适培养基为 MS 十BA0.4rag/L+NAA0.1mg/L.2.2NAA 与 IBA 对甜叶菊生根的影响表 3 不同处理对甜叶菊生根的影响由表 3 可知;在 MS 培养基中 .NAA 与 IBA 对甜叶菊生根均具有诱导作用,NAA 对愈伤组织的形成和生根有促进作用.对甜叶菊的根数进行方差分析可知,Is 处理与对照达到极显着差异.但其生根率较低,而且愈伤组织多且大,紧密,不利于其移栽.从生根率看,NAA 处理明显比 IBA 处理效果好,且两种处理都比 CK 处理的效果好,其中 NAA 处理中 Ns 的效果最好,达到了 9
11、O,根长 1.04cm,但愈伤组织比较多且大.且质地比较紧密,而 IBA 处理中 I 也达到了85.7.根长 1.86cm,愈伤组织少而且很小.质地比较疏松(图 2A).随着 NAA 和 IBA 浓度的升高,愈伤组织越来越多,而且也越来越大,质地也越来越紧密(图 2B).在试验过程中,NAA 和 IBA 培养了 10d 左右时,均有少数根生成,且 IBA 处理中浓度较高的处理中有淡黄色的愈伤组织生成,生根较慢.而在 N 从处理中愈伤组织出现的时间较晚且比例低.这可能与各种生长素的适宜使用浓度及其生理活性不同有关.在生根处理中 I1 处理植株叶色深绿.根系粗壮且生长较快,根系分布均匀,白色,每株
12、生根 1214 根,高矮,叶宽均较一致(见图 2),幼苗生长状况最好,因此从生根率,平均每株根数和根长,愈伤组织的多少以及幼苗素质综合考虑,甜叶菊生根较适宜的培养基为 MS 十 IBA0.25mg/L.图 2 甜叶菊的生根处理第 2 期(总第 93)2008 年 4 月中国林副特产ForestBy-ProductandSpecialityinChinaNo.2(GSNO.93)Apr.2008翡翠珠组织培养技术的研究李京,白卉,曹焱(黑龙江省林业科学研究所,哈尔滨 150081)摘要:以翡翠珠腋芽为实验材料,研究了翡翠珠组织培养的适宜条件 .试验表明,翡翠珠的最佳继代培养基为MS+6-BA0.
13、5mg/L+KT1.0mg/L+NAA0.02mg/L,增殖系数达 5.37 倍;最适生根培养基为 WPM+IBA0.1mg/L,生根率达 54.6.关键词:翡翠珠;组织培养AStudy0ntheTissueCultureTechniqueinSeneciorowleyanusJacobsenLiJlng,BaiHui,CaoYah(HeilingjiangForestryResearchInstitrte,Harbin150081)Abstract.ByusingaxillarybudofSeneciorowleyanusJacobsenasmaterial,theexperimentwas
14、madetofindoutthebestcultureprocessandtheproperculturemedium.Thetechnicalsystemoftissuecultureforpropagationwasestablished.TheresultsshowthattheoptimalsubculturemediumisMS+6 一BA0.5mg/L+KT1.0mg/L+NAA0.02mg/L,themultiplicationrateclumpsis5.37.ThebestrootingmediumisWPM+IBA0.1mg/L,andthetooringrateisupto
15、54.6.Keyword;SeneciorowleyanusJacobsen;tissueculture翡翠珠(neciorowleyanusJacobsen)又名珠峰千里光,为多年生常绿匍匐肉质草本植物,原产南非南部1.茎纤细,全株被白色皮粉,叶互生,较疏,圆心形,深绿色,肥厚多汁,极似珠子,故有佛串珠,绿葡萄,绿之铃之美称.目前,翡翠珠采用常规繁殖极其困难,因此本文中利用组织培养技术对其进行繁殖,以解决这一问题.1 试验材料与方法1.1 试验材料选取生长健壮无病株的带腋芽茎条切段作为外殖体.1.2 研究方法1.2.1 外殖体的表面消毒.采回的茎条,先整段用适量洗涤剂认真清洗后,自来水冲洗干
16、净,剪成几大段,备用.在超净工作台上将实验材料用 7O 酒精浸 20s,0.1 升汞灭菌35min,无菌水冲洗干净,最后分切为 1.Ocm 切段,用无菌滤纸吸干表面水分进行接种.1.2.2 培养基及培养条件.以 MS,1/2MS,WPM 为基本培3 讨论利用组织培养快繁技术,通过外源激素(植物生长调节剂)处理使甜叶菊增殖和生根,这样不仅可以提高种苗繁殖速度和倍数,提高种苗质量,也是保持品种典型性的最佳方式.在快速繁殖过程中,外源激素的种类及其浓度不同,对外植体的脱分化或再分化方向有较大的影响,这与前人在白头翁和红景天等所报道的结果是一致7.在甜叶菊增殖培养中,筛选出最适的增殖培养基为 MS+B
17、A0.4mg/L+NAA0.1mg/L,说明甜叶菊的增殖受 BA 和 NAA 协同作用,只有当 BA 和 NAA 浓度适当时,才能达到甜叶菊的增殖与芽的素质相统一,否则对甜叶菊的快速繁殖有不利的影响.虽然 NAA 和 IBA 都可使甜叶菊生根,但是最适宜的生根培养基为 MS+IBA0.25mg/L.总之,在甜叶菊组培中植物激素对器官分化起着非常重要的作用,尤其是细胞分裂素与生长素的比值,对组织分化的方向起决定性作用,本试验仅对甜叶菊对各种激素适宜浓度范围及其比例进行了初步探索,其最佳的快速繁殖技术体系有待进一步完善.参考文献1何毓娟,李元彬 .发展甜叶菊生产大有可为J.中国糖料,1997,(1
18、)54-60.2李晓瑜.甜菊糖苷的安全性研究进展.中国食品添加剂J,2003,(2):5-11.3陈德昌.高科技发展甜菊产业J.中国糖料,2005,(01)t60-61.4胡献丽,董文宾 ,郑丹,等.甜菊及甜菊糖研究进展刀食品研究与开发,2005,26(1);36 38.5韩玉林,黄苏珍 ,汪鸿江,等.甜菊扦插繁殖快速成苗的研究刀.特产研究,2001,23(2);36 37.6吴广文,王其斌 ,简善亮,等.甜菊杂种优势利用和制种技术研究刀.安徽农学通报,2005,11(1)t73-74.7张子学,丁为群 ,唐勇,等.白头翁组织培养研究J.中国中药杂志,2004,29(3)l215218.8盛长忠,胡铁强 ,毕浩,等.植物生长物质对红景天愈伤组织诱导和培养的影响刀.中国中药杂志,2005,30(16):1237-1240.9崔广荣,刘云兵 ,张俊长,等.文心兰组织培养的研究J.园艺,2004,31(2)l253-255.作者简介:张子学(1956 一),男,安截省砀山县人,副院长,教授.农学专业,获省科技进步三等奖 1 项,市科技进步一等奖 1 项,长期从事药用植物的组织培养工作,发表论文 2o 余篇.E-15
