1、附件3：河 北 省 重 点 实 验 室评估申请报告实验室名称：河北省法医学实验室实验室主任：丛斌通讯地址：石家庄市中山东路361号邮政编码：050017联系电话：0311-86265602传真86266406电子邮件地址：bincong联系人：李淑瑾电话86265602依托单位（盖章）：河北医科大学主管部门（盖章）：河北省教育厅2008年3月31日 填报简 表实验室名 称河北省法医学实验室验收日期2006年9月9日运行补助费(万元)省科技厅 主管部门 60 依托单位 400实验室主 任姓 名丛斌出生日期1957年7月民 族汉职 称教授、主任法医师、博导所学专业法医学病理生理学从事专业法医学病理
2、生理学职 务副校长最后学位博士学委会主 任姓 名刘耀出生日期1937年11月民 族汉职 称院士、教授、主任法医师、博导所学专业法医学从事专业法医学职 务最后学位学士工作单位公安部物证鉴定中心依托单位名 称河北医科大学主管部门省教育厅详细地址石家庄市中山东路361号邮政编码050017代表性研究成果序 号成 果 名 称成果类型第1项人类基因组五种DNA遗传标记多态性研究及其法医学应用应用基础第2项CCK-8抗内毒素致炎症反应的受体及信号转导机制研究应用基础第3项吗啡成瘾的分子机制及防治研究应用基础第4项创伤性多器官功能衰竭的分子机制研究应用基础第5项植物中天然药物单体化合物的提取及开发应用应用基
3、础研究水平与创新能力队伍建设与人才培养实验条件开放交流与运行管理三年实到研究经费国家和省部项目获奖科技成果发表论文/出版专著获得自主知识产权固定人员学术带头人研究人员占总数比例优秀中青年人才内设学科点站已毕业研究生实验用房面积办公用房面积仪器设备原值仪器设备数量设置开放课题数/经费承办大型学术会议科技合作国际和国家学术机构任职万元项项篇/部项人人人个人平方米平方米万元台套项万元次项人1393.723292/6028381.4835351300300185037224241一、研究水平与创新能力（一）研究方向与目标1、研究方向： 目前实验室有6个主要的研究方向： （1）法医分子遗传学（Foren
4、sic Molecular Genetics）：主要开展人类DNA遗传标记、陈旧骨骼DNA分析技术和中华民族基因多态性等方面的研究。着重解决生物证据中疑难检材的个体识别、复杂的亲权鉴定、重大灾难事故中的遗骸认定等疑难问题，并应用于人类遗传结构分析、组织器官配型、疾病相关基因定位研究和法医生物信息库构建等领域。该系列研究已开展近20年，获国家科技进步二等奖2项（1998年，2005年），河北省科技进步一等奖1项（2000年）和河北省科技进步二等奖1项（2003年），研究成果均得到了推广应用，为刑事案件证据链的建立，为民事案件亲缘关系的认定，提供了可靠的法庭科学证据，同时也取得了良好的经济效益。2
5、005年2007年发表论文15篇，培养了3名博士研究生及6名硕士生。疑难生物检材（包括高度降解检材、污染的检材、超微量检材、混合样本等）的身份认定是目前困扰全世界法医物证学家的难题，2006年，本实验室与公安部物证鉴定中心合作申请到了国家“十一五”科技支撑计划：疑难生物检材DNA检验关键技术研究（2006BK07B01），2007年，我们又申请到了河北省科技支撑计划：miniSTR基因座DNA分型技术体系的研制与开发（072461479D），目前均在按计划进行，并取得了一些阶段性成果，预期成果将研制出miniSTR基因座复合DNA分型体系，用于高度降解检材的DNA分型及个体识别，服务于法庭科学
6、。（2）法医病理学（Forensic pathology）：本实验室主要从事以下三方面的研究：一是创伤性多器官功能衰竭的分子机制研究。机体在严重创伤后，由于启动交感肾上腺髓质系统及某些炎症因子和快速反应蛋白的参与，经全身性炎症反应过程（SIRS），可发生多器官功能衰竭，甚至死亡。1993年以来，法医病理学专业人员一直从事这方面的研究，先后承担了“广泛软组织机械性损伤所致家兔多脏器功能障碍综合征的研究”等多项省级课题，为机械性损伤引起的非直接死亡案例的鉴定提供了有力的科学依据。二是死亡时间的推断。死亡时间的推断是指通过死后尸体的变化来推断死亡至案发的时间经过。由于死后尸体变化随不同环境而异，因此
7、，近百年来尚未研究出较为准确的死亡时间的推断方法，亟待进行深入的探索研究。死亡时间推断的本质是探寻死亡不同时期尸体化学变化的规律。近年来先后承担、完成了“死后不同时间组织细胞DNA含量分析”、“家兔肺冲洗的巨噬细胞吞噬作用与死亡时间的关系”、“应用FCM测定肺泡巨噬细胞存活率和吞噬功能推断死亡时间的实验研究”、“根据血清和红细胞内钾钠离子含量变化推断早期死亡时间的实验研究” “死后DNA降解与死亡时间变化的相关性研究”等课题。三是“弥漫性轴索损伤引发二次打击的分子机制研究”。外伤性弥漫性轴索损伤引起的并发症是法医学常见的累诉、缠诉案件，也是临床医学至今未解的难题。我们研究发现，弥漫性轴索损伤引
8、起的某些并发症是由胶质细胞激活引发二次打击所致，从而为临床治疗弥漫性轴索损伤并发症提供了理论依据，也为赔偿医学救济受害人提供了科学证据，该项目获得了1项省自然科学基金资助。已培养本研究方向的博士研究生3名，硕士研究生23名。完成公检法机关委托的法医病理学方面的检案400百余例。本专业在法医病理学方面的科研水平和技术能力在全省处于领先地位。由于法医病理学涉及面广，加之犯罪分子作案手段日趋复杂化，法医病理学工作者面临亟待解决的问题也日趋增多。随着法医学及其他相关学科中各种先进技术手段的发展，法医病理学在法医实践中的应用前景也将更为广阔。（3）法医毒理学（Forensic Toxicology）：目
9、前，毒品成瘾成为法医毒理学研究的重要内容。据联合国2006年度世界禁毒报告提供的数据，全球约有2亿人在使用毒品，每年因滥用毒品致死的人数高达20万，上千万人因吸毒丧失劳动能力。国际毒品年交易额在800010000亿美元以上，相当于世界贸易总额的13%。世界范围内的药物滥用和毒品犯罪已成为威胁人类健康、社会安定和经济发展的严重问题，禁毒和戒毒已成为全世界共同关注的问题。本实验室主要从事吗啡成瘾的分子机制与防治研究，为研究和开发治疗阿片类物质成瘾的药物提供理论和实验依据。已完成“褪黑素缓解吗啡戒断症状作用机理的实验研究”、“nNOS基因对慢性吗啡作用神经细胞CREB蛋白表达及DNA结合活性的影响”
10、、“外源CRE顺式元件对慢性吗啡作用神经细胞CREB蛋白表达及DNA结合活性的影响”、“三七总皂甙对吗啡依赖大鼠戒断症状的抑制作用及其分子机制研究”等多项省级课题，2007年“CCK-8对慢性吗啡依赖大鼠戒断症状的影响及其信号转导机制研究”获得国家自然科学基金和省自然科学基金的资助。已发表相关论文20篇，培养本研究方向博士生5名、硕士生14名。首次系统探讨了CCK对海马神经元cAMP-PKA-CREB及Ca2+-CaM-CaM-CREB通路的影响，在内源性抗阿片肽与吗啡成瘾及戒断信号转导机制关系的研究中提出了新的思路：即CCK可能是通过受体后机制缓解吗啡成瘾及戒断症状的较为理想的内源性脑肠肽，
11、为阿片类成瘾及戒毒研究提供了新的干预靶点及手段。（4）神经肽与免疫调节：近十年来，我们在3项国家自然科学基金和3项省自然科学基金的资助下，系统研究了神经肽胆囊收缩素（CCK）的抗炎作用、CCK受体分布及其免疫调节功能。首次发现巨噬细胞表达CCK受体，CCK通过CCK受体及受体后信号转导机制抑制NF-B及AP-1活性，减少炎症性细胞因子产生，从而发挥理想的抗炎作用。在CCK干预下，可明显缓解内毒素休克肺组织的炎性变，改善通气，降低肺动脉高压，改善微循环缺氧，使内毒素休克病死率降低至20%左右。该系列研究获得1项河北省科技进步一等奖（2007年）及2项河北省科技进步二等奖（2001年，2003年）
12、。目前，我们正在研究CCK对其它免疫细胞（包括树突状细胞、Th细胞平衡、B细胞）的调节作用，该系列研究又获得了2项国家自然科学基金项目（No. 30500193，30770839）的资助，现已取得一些阶段性进展，发表论文6篇。本研究方向2005年2007年共发表论文18篇，SCI收录2篇，其中1篇发表在国际休克领域的顶尖杂志Shock上；培养了3名博士研究生和6名硕士生。 （5）类风湿性关节炎发病机制：主要从炎症反应、表观遗传学等方面研究类风湿性关节炎的发病机制。重点研究Th1、Th2、Treg、Th17细胞分化的表观遗传学调节机制、PGE2和LTB4 对Treg/Th17细胞分化的调节及在类
13、风湿关节炎(RA)发病中的作用，以期找到更精确的作用靶点进而开发副作用更小的RA治疗新药，通过研究PGE2和LTB4的协同作用及其机制以期为双重抗炎药物的开发提供更多的理论基础。已完成1项国家自然科学基金项目（30470679），该项目研究发现大鼠成纤维样滑膜细胞株RSC-364表达高亲合力CCK-AR和CCK-BR，CCK-8通过CCK受体激活cAMP/PKA对rTNF-作用下RSC-364内p38 MAPKAP-1信号通路具有抑制性调节作用，从而有效抑制rTNF-促RSC-364细胞增殖，并通过下调MMPs表达、减少酶原分泌及降低MMPs/TIMP-1比值，发挥CCK-8对rTNF-诱导R
14、SC-364分泌MMPs活性的负性调节作用。以上结果证实CCK-8在RSC-364具有直接的抗炎作用，提示CCK-8对于类风湿性关节炎滑膜细胞引起的关节破坏可能具有积极的药理作用。发表论文8篇，培养了4名博士生及4名硕士生。 （6）植物中天然药物单体化合物的提取及开发应用：20世纪80年代，西方人对西医治疗疾病的局限性和西药治疗过程中造成的毒副作用有了充分认识，因此出现了回归自然，使用天然药物的潮流，天然药物的开发使用成为全球关注的热点。本实验室主要从事“东北红豆杉(Taxus cuspidata)中非紫杉醇类化合物分离纯化及其抗肿瘤细胞增殖活性和作用机制的研究”，我们从东北红豆杉中分离纯化了
15、8种新的单体化合物，用MS和NMR等波谱分析技术对其结构进行了鉴定，并且对这些单体化合物进行了抗肿瘤细胞增殖活性的筛选。另外，还对从东北红豆杉中分离纯化的已知的25种非紫杉醇类化合物进行了抗肿瘤细胞增殖活性的筛选，发现其中9种单体化合物具有较强的抑制多种肿瘤细胞增殖的活性，具有较好的开发应用价值。发表SCI论文4篇，培养1名博士后，3名硕士生。2、发展目标及总体定位 总体定位：社会主义的现代化必须同时法治化。在有合理的司法制度前提下实现法治，要求有高素质的法医和合理的法医学鉴定体制。河北，作为首都北京的护城河，对其公正公平和科学执法的要求更高，因此我们要充分发挥河北医科大学国家级法医学重点（培
16、育）学科、省法医学重点实验室及重点学科的优势，最终建成具国际竞争力、集人才培养、基础研究、法医鉴定为一体的国家级重点实验室，为维护京、津地区和河北省及周边地区的社会稳定、构建和谐社会做出贡献。 发展目标：目前，我国尚有1/3的市、县公检法部门未配备必需的法医技术人员，且现职法医技术人员中有25将在今后5年内退休，部分基层法医技术人员也缺乏从事法医实践所必需的专业知识。在政府指定的人身伤害重新鉴定医院、司法部门批准设立的司法医学鉴定中心、医疗机构的医疗服务质量监控部门和医学会医疗事故技术鉴定等部门也急需高层次法医学专门人才。我们将把法医学实验室建成培养法医学专业技术人才的基地，并为重大疑难案件的
17、解决提供技术支持。本实验室将紧密围绕我们的6大研究方向，尤其是利用法医分子遗传学在国内领先地位，研制开发用于高度降解检材及超微量检材的miniSTR基因座DNA分型试剂盒，通过系统测试与验证，申请专利并推向市场；建立河北汉族人群DNA数据库，包括罪犯DNA数据库，失踪人群DNA数据库，本地区普通人群DNA数据库，为侦察提供线索，为审判提供证据。同时，建立法医病理与损伤的量化诊断系统及各种特染技术，对病理变化进行定量分析，提高鉴定的准确性；建立神经、听觉功能和视觉功能损伤程度的定量检验系统。利用河北医科大学法医鉴定转岗培训基地的优势，对在职法医技术人员进行培训和再教育，提高省内法医鉴定的技术水平
18、。配合公、检、法、司部门，对疑难案件进行准确鉴定。与各级医院合作，对临床医师进行基本法医知识和医疗纠纷知识的讲授，使河北医科大学法医学专业成为高等院校服务于社会的典范。争取法医物证学实验室、法医病理学实验室、法医毒物分析实验室、法医临床学实验室均通过国家实验室认可，使河北医科大学法医鉴定中心成为省内首家通过实验室认证的非公安所属法医鉴定机构，最终成为国家级重点实验室和国家级司法鉴定机构。此外，本实验室在病理生理学领域也获得了丰硕的科研成果（1项河北省科技进步一等奖及2项河北省科技进步二等奖）。我们采用病理生理学的理论与技术研究法医学的一些客体（如解毒、多器官功能衰竭、挤压综合症等），取得了阶段
19、性的成果，为机械性损伤引起的非直接死亡案例的鉴定提供了有力的科学依据。我们将充分利用本实验室的人力资源（6名病理生理学博士），继续发挥学科交叉的优势，开拓病理生理学研究领域，探讨免疫调节与炎症系统的反馈关系在疾病发生发展中的作用，并在前期工作的基础上，准备研发神经肽类新药用于抗炎抗休克治疗。（二）承担的主要任务（限填25项）序号课题名称编号负责人起止时间经费(万元)类别1疑难生物检材DNA检验关键技术研究2006BAK07B01丛 斌2006200820十一五国家科技支撑计划2CCK-8调控滑膜细胞AP-1表达的受体及信号转导机制研究30470679丛 斌2005200730国家自然科学基金3
20、CCK-8对Th1/Th2细胞平衡的调节作用及其机制研究30500193李淑瑾2006200837.5国家自然科学基金4CCK-8对慢性吗啡依赖大鼠戒断症状的影响及其信号转导机制研究30672355马春玲2007200941.25国家自然科学基金5CCK-8对树突状细胞与Th细胞相互作用的调节30770839丛 斌2008201045国家自然科学基金6Fba蛋白在A族链球菌逃避补体攻击中的作用30771970魏 林2008-201022.5国家自然科学基金7CCK-8抗炎作用的受体及信号转导机制研究30270529丛 斌2003200530国家自然科学基金8利用基因敲除研究钾离子通道Kir2.
21、3基因的功能30600125刘砚星马春玲2007200937.5国家自然科学基金9mGluR 1型受体在FMR1基因敲除鼠轴棘突触定位的改变30700437王 磊石葛明2008201022.5国家自然科学基金10The role of AML1 in leukemia and hematopoiesis马春玲2004200660国际合作项目Deutsche JosCarreras Leukmie - Stiftung e.V.11白花蛇舌草抗炎及抗癌有效成分的提取及其机制研究董 玫2005200720国际合作项目（日本信州大学农学部应用生命科学科生理活性研究室）12CCK-8对树突状细胞与Th
22、细胞相互作用的调节20070089004丛 斌200820106教育部高校博士点基金13CCK抗内毒素休克的外周血管机制204016谷振勇200420062教育部科学技术重点项目14通过胚胎干细胞胞浆诱导小鼠骨髓细胞表达胚胎干细胞功能的研究马春玲200520073教育部回国留学人员基金15通过胚胎干细胞胞浆诱导小鼠骨髓细胞表达胚胎干细胞功能的研究马春玲200520073人事部回国留学人员科研基金16miniSTR基因座DNA分型技术体系的研制与开发072461479D丛 斌2007201050河北省科技支撑计划17CCK-8 抗内毒素致炎症反应的受体及信号转导机制研究303452丛 斌2003
23、20055河北省自然科学基金18CCK-8影响滑膜细胞增殖和金属蛋白酶表达的信号转导机制研究C2005000705丛 斌200520075河北省自然科学基金19FMR1基因敲除鼠轴-棘突触相关特性的改变C2006000818石葛明200720085河北省自然科学基金20CCK-8对胶原诱导性关节炎小鼠树突状细胞抗原递呈功能的影响C2007000833丛 斌200720105.5河北省自然科学基金21CCK-8受体拮抗剂抑制吗啡戒断症状的信号转导机制研究C2007000826马春玲200720094.5河北省自然科学基金22几种电活性生物分子在化学修饰电极上的电化学行为及应用研究C2007000
24、813康维钧200720095河北省自然科学基金23补体膜辅助蛋白FH、FHL-1在链球菌免疫逃逸中的作用C2006001025魏 林2007-20095河北省自然科学基金24CCK-8对LPS诱导促炎与抗炎性细胞因子表达的信号转导机制研究06547008D-5倪志宇2006-20083河北省科技厅博士基金25cAMP反应元件结合蛋白转录因子诱骗缓解吗啡耐受机制的研究062761389张国忠2006-20082河北省科技厅项目 注：实验室承担的主要任务指：国家重点基础研究项目计划（973计划）、973计划前期研究专项、国家自然科学基金；国家高技术研究与发展计划（863计划）；国家科技支撑计划；
25、国家科技基础条件平台建设计划；国家政策性引导计划；省应用基础研究计划；省（部）科技支撑计划；省科技基础条件平台建设计划；省政策性引导计划等，并在类别栏中注明。（三）代表性研究成果简介（不超过5项）（每项成果分开单独填写）代表性研究成果1类别完成单位署名排序本室固定人员参加数DNA遗传标记多态性研究及其法医学应用应用基础河北医科大学71、成果的主要内容、创新性贡献及国内外影响： （1）研究项目“人类基因组五种DNA遗传标记多态性研究及其法医学应用”与2005年获得国家科技进步二等奖 (20524008)。从1999年2005年，课题组对中国汉族人群5种遗传标记13个基因座（VNTR：D1S80、
26、D17S30；MVR：D1S8、D7S21、D2S44；STR：D2S1328、D3S1358、D11S2010、D16S310；Y-STR：DYS438、DYS439、GATA A7.1、GATA A7.2）和线粒体DNA（Mitochondrial DNA, mtDNA）的HV1、HV2两个高变区及84308673nt编码区序列进行了群体遗传学研究。采用PCR-RFLP和 PCR-STR的分型及DNA测序技术，通过银染和荧光标记毛细管电泳技术检测上述遗传标记的基因型。并对多种生物检材如血液（斑）、精液（斑）、毛发、人体组织等及陈旧性检材进行了研究，同时对多个家系也进行了遗传学调查。获得了中
27、国汉族人群5种遗传标记13个基因座和线粒体DNA（Mitochondrial DNA, mtDNA）的编码区及高变区序列的群体遗传学数据，依据所获的遗传学参数经生物数理统计，建立了四个适合中国汉族人群的遗传标记系统。在国内属创新性研究成果，部分位点在中国汉族人群的基因频率分布在国际上属首次报道。对于法庭科学的个人识别与亲子鉴定具有较大的实用意义，为法庭科学的个人识别及亲子鉴定增加了新的遗传标记和统计学数据，为基层的实际办案工作提供了简单、实用、可靠、有效的检验方法。发表论文15篇，培养博士研究生2名，硕士研究生6名。 （2）本研究方向目前的一些阶段性成果：对X染色体、Y染色体多个具有多态性的遗
28、传标记进行了大量的群体遗传学调查，获得了宝贵的群体基因频率数据，为法医学特殊案件的鉴定（如父女鉴定、父子鉴定、混合斑鉴定等）提供了实用、有效的方法。在河北省科技支撑计划：miniSTR基因座DNA分型技术体系的研制与开发（072461479D）的资助下，进行了全国6大地区汉族群体（1000份样本）26个miniSTR基因座的群体遗传学调查，获得了这些基因座的群体遗传学数据，为选择多态性好的基因座构建miniSTR分型体系奠定了基础。已发表相关论文15篇。(1) 裴黎，叶健，孔铭华，丛斌（通讯作者），李继周，将之连，王立铭. 北京地区汉族群体D1S1612和D18S535基因座的遗传多态性. 遗
29、传 2005, 27(1):021-024(2) 赵丽，高峰，丛斌（通讯作者），姚玉霞，李淑瑾，谷振勇，徐锦荣. 河北汉族人群GATA A10、GATA H4 基因座遗传多态性调查. 中国法医学杂志 2005,20(2):99-100(3) 裴黎，王俭，邓华，姜成涛，赵兴春，张树林，丛斌（通讯作者）. FXIIIA凝血因子蛋白与核酸水平遗传多态性研究. 法医学杂志 2005;21（40）：312-313 (4) 白雪，丛斌（通讯作者），付丽红，姚玉霞，赵艳梅，李淑瑾. 河北汉族人群5个X-STR基因座遗传多态性研究. 河北医科大学学报 2006, 27(3):204-205(5) 侯一平，王保
30、捷，丛斌，刘雅诚，杨庆恩，姜先华等 中国法医学会物证专业委员会法医DNA分析的若干建议. 中国法医学杂志 2006,21(5):257-259(6) 娄春光，李淑瑾，丛斌（通讯作者），李爱强，宋金平. 3个miniSTR 基因座在高度降解检材中的应用及其遗传多态性.中国法医学杂志 2006,21(5):281-283(7) 白雪，丛斌（通讯作者），付丽红，姚玉霞，赵艳梅，李淑瑾. 河北汉族人群3个X-STR基因座遗传多态性.中国法医学杂志 2006,21(5):301(8) 白雪，丛斌（通讯作者），付丽红，姚玉霞，赵艳梅，李淑瑾，甄艳凤，王毅，张磊. 河北汉族人群五个基因座遗传多态性研究.中华
31、医学遗传学杂志 2006,23(5):574-577 (9) 付丽红，姚玉霞，丛斌(通讯作者)，裴黎，李爱强，吴廷春，宋金平，赵艳梅，李淑瑾，马春玲. 四态MVR-PCR方法检测河北汉族人群D1S8基因座遗传多态性. 中国法医学杂志, 2006, 21(6): 356-357. (10) 赵艳梅，丛斌(通讯作者)，付丽红，姚玉霞，白雪. 三态MVR-PCR方法检测中国汉族人群D2S44（YNH24）基因座3端遗传多态性. 国际遗传学杂志，2006, 29(6): 404-406.(11) 赵艳梅，丛斌（通讯作者），付丽红，白雪，姚玉霞. 中国汉族人群2个高变MVR基因座遗传多态性. 中国法医学
32、杂志，2007，22（1）：50-51. (12) 付丽红，丛斌（通讯作者），姚玉霞，甄艳凤. . 河北汉族人群线粒体DNA HV3(CA)n重复子长度多态性. 中国法医学杂志，2007，22（2）：117-118.(13) 王毅，丛斌(通讯作者)，姚玉霞，白雪，赵艳梅，王晓丹. 河北汉族人群四个X-STR基因座遗传多态性研究. 河北医科大学学报，2007, 28(3):209-210 (14) 李淑瑾，丛斌，侯一平. 第22届国际法庭遗传学大会内容介绍. 中国法医学杂志，2007, 22(6) : 361363(15) 王毅，白雪，丛斌（通讯作者），李淑瑾，付丽红，马春玲，赵艳梅，张磊，甄艳
33、凤，姚玉霞. 河北汉族人群四个X染色体短串联重复序列基因座遗传多态性研究. 中华医学遗传学杂志，2007,24(6):713-7162、附件清单：(1) 国家科技进步二等奖证书(2) 2005年2007年发表论文首页复印件（15篇）代表性研究成果2类别完成单位署名排序本室固定人员参加数CCK-8对免疫细胞的调节功能应用基础河北医科大学111、成果的主要内容、创新性贡献及国内外影响：（1）研究项目“CCK-8抗内毒素致炎症反应的受体及信号转导机制研究”于2007年获得河北省科技进步一等奖。1999年2007年，课题组在两项国家自然科学基金和2项省自然科学基金项目资助下，系统研究了八肽胆囊收缩素（
34、CCK-8）抗内毒素休克及抗炎作用的受体及信号转导机制。内毒素休克（endotoxin shock, ES）是临床常见的危重病症，尽管目前重症监护、营养支持、强有效的广谱抗生素的使用，G-细菌败血症、感染性休克的死亡率仍然高达40 %70 %，严重影响人类健康。我们以往研究发现八肽胆囊收缩素（cholecystokinin octapeptide, CCK-8）具有确切的抗ES作用，其抗休克作用与其抗炎作用密切相关。本项目从CCK受体-cAMP-PKA-NF-B、CCK受体-DAG-PKC- NF-B两个途经及二者之间的crosstalk探讨了CCK-8抗炎作用的信号转导机制。主要原创性研究结
35、果包括：(1) 应用放射配基结合实验及RT-PCR实验证明了大鼠肺间质巨噬细胞（PIMs）表达CCK-AR和CCK-BR两种受体亚型，并得出其结合特性的相关参数；(2) CCK-8通过CCK-AR和CCK-BR激活静息状态和LPS诱导的大鼠PIMs cAMP-PKA信号通路，进而抑制NF-B 活性；(3) CCK-8通过CCK-AR和CCK-BR抑制静息状态和LPS诱导的大鼠PIMs DAG-PKC信号通路，进而抑制NF-B 活性；(4) 两条信号通路之间的cross-talk表现为 DAG-PKC信号通路的活化对cAMP-PKA信号通路有正性调节作用，CCK-8通过激活cAMP-PKA通路来
36、抑制LPS诱导的DAG-PKC通路。其主要的科技创新贡献：(1) 本研究成果提示CCK可作为救治炎症相关性危重疾病的有效生物药，为设计开发CCK相关抗炎药物并应用于内毒素休克、失血性休克等炎症相关性疾病的治疗提供了充分的实验依据。(2) 首次发现大鼠肺间质巨噬细胞（PIM）存在高亲和力CCK-AR及CCK-BR表达，为CCK对生理及病理条件下PIM发挥调节作用提供了直接的结构依据。(3) 首次较系统地研究了CCK-8抗炎作用的受体及信号转导机制，为探寻肽类物质抗炎信号通路中的共性及设计开发CCK相关抗炎药物并应用于治疗炎症相关性疾病提供了重要实验依据，为阐明CCK的免疫调节作用及其在体内作用的
37、多元性提供了重要数据，进一步丰富了神经-免疫调节网络的理论，具有重要的学术价值和理论意义。本项目共发表论文24篇，其中SCI收录6篇，CSCD收录13篇，参加1次国际性学术交流会议，发表会议论文3篇，参加1次全国性学术交流会议，发表会议论文2篇。其中1篇论文发表在休克领域顶尖杂志shock上，该杂志主编评价我们的研究工作为内毒素休克的治疗开辟了新的途径，是一篇非常优秀的研究论文。 （2）CCK-8对滑膜细胞的调节作用及在类风湿性关节炎中的作用：已完成1项国家自然科学基金项目（CCK-8调控滑膜细胞AP-1表达的受体及信号转导机制研究30470679，2004年2007年）和1项省自然科学基金项
38、目，主要原创性发现有：大鼠成纤维样滑膜细胞株RSC-364表达高亲合力CCK-AR和CCK-BR，CCK-8通过CCK受体激活cAMP/PKA对rTNF-作用下RSC-364内p38 MAPKAP-1信号通路具有抑制性调节作用，从而有效抑制rTNF-促RSC-364细胞增殖，并通过下调MMPs表达、减少酶原分泌及降低MMPs/TIMP-1比值，发挥CCK-8对rTNF-诱导RSC-364分泌MMPs活性的负性调节作用。以上结果证实CCK-8在RSC-364具有直接的抗炎作用，提示CCK-8对于类风湿性关节炎滑膜细胞引起的关节破坏可能具有积极的药理作用。（3）CCK-8对T细胞、树突状细胞的调节
39、功能研究：本研究方向于2005年、2007年分别申请到两项国家自然科学基金项目：CCK-8对Th1/Th2细胞平衡的调节作用及其机制研究（30500193），CCK-8对树突状细胞与Th细胞相互作用的调节（30770839），目前正在按计划进行研究。（4）2005年2007年本研究方向发表的相关论文：1) Li Shujin, Ni Zhiyu, Cong Bin（通讯作者）, Gao Weijuan, Xu Shunjiang, Wang ChunYan, Yao Yuxia, Ma Chunling, Ling Yiling CCK-8 inhibits LPS-induced IL-1
40、production in pulmonary interstitial macrophages by PKA, P38, NF-B pathway. Shock, 2007, 27(6):678-686. （SCI：3.12）2) Shun-jiang XU, Wei-juan GAO, Bin CONG（通讯作者）, Chun-ling MA, Shu-jin LI, Yi-ling LING, Zhen-yong GU, Yu-xia YAO Effect of cholecystokinin octapeptide on diacylglycerol-PKC signaling pat
41、hway in rat pulmonary interstitial macrophages stimulated by lipopolysaccharide Acta Pharmacol Sin 2005，26 (12): 1497-1504. （SCI：1.12）3) 倪志宇，李淑瑾，丛斌（通讯作者），姚玉霞，王春艳.CCK-8抑制LPS诱导的大鼠肺间质巨噬细胞TLR4及IL-1的表达 基础医学与临床 2005,25(2):137-140 4) 许顺江，丛斌（通讯作者）. CCK 受体多态性与受体相关性药物的开发. 中国药理学通报 2005,21(8):914-917. 5) 许顺江，丛斌
42、（通讯作者）. PKC激活机制及其功能. 生理科学进展 2005,36(4):309-313. 6) 高维娟，许顺江，丛斌(通讯作者），李淑瑾，马春玲，徐锦荣，姚玉霞，谷振勇. CCK-8抑制LPS作用下大鼠肺间质巨噬细胞NF-kappaB活性的cAMP-PKA通路研究. 中国病理生理杂志 2006,22(20):1891-1895 7) 八肽胆囊收缩素抑制脂多糖诱导急性肺损伤小鼠的炎症反应. 中国急救医学 2007, 27(4):329-3328) 倪志宇，丛斌（通讯作者），李淑瑾，马春玲，闫玉仙，徐锦荣，张国忠. CCK-8对LPS攻击小鼠IL-1、IL-6、IL-4、IL-10表达的影响
43、. 中国病理生理杂志 2007, 23(2):331-335 9) 倪志宇, 闫玉仙, 丛军, 徐锦荣, 高峰, 李淑瑾, 马春玲, 丛斌. CCK-8增强LPS攻击小鼠抗炎性细胞因子的表达。中国危重病急救医学, 2007, 10（19）: 580583 10) 高维娟，许顺江，丛斌，李淑瑾，马春玲. CCK-8对大鼠肺间质巨噬细胞cAMP-PKA信号通路的激活作用. 中国药理学通报 2007,23(3):321-326 11) Shujin Li, Bin Cong(通讯作者）, Chunling Ma, Yuxia Yao, Chunyan Wang, Zhiyu Ni, Zhenyong
44、 Gu, Yiling Ling.Down-regulation of CD14 in the lung of endotoxemia rats by cholecystokinin octapeptide involves PKC pathway. Chin J Pathophysiol, 2006,22(13): 345-346. 12) Zhiyu Ni, Bin Cong(通讯作者）, Shujin Li, Yu Xian Yan, Chunling Ma, YuXia Yao. Mechanisms of CCK-8 on regulating the expression of I
45、L-1, IL-6 and IL-10 in RAW264.7 cells activated with LPS. Chin J Pathophysiol, 2006,22(13): 345.13) Weijuan Gao, Shunjiang Xu, Bin Cong(通讯作者）, Shujin Li, Chunling Ma. Activation of CCK-8 on cAMP-pka signaling pathway in rat pulmonary interstitial macrophages. Chin J Pathophysiol, 2006,22(13): 310. 1
46、4) Fenghua Zhang, Shujin Li, Ning Song, Chunhua Wei, Bin Cong(通讯作者）, Chunling Ma, Zhengmao Zhang. Effect of cholecystokinin octapeptide on Th1/Th2 cytokine production in collagen-induced arthritis mice. Chin J Pathophysiol, 2006,22(13): 357. 15) Ning Song, Shujin Li, Fenghua Zhang, Bin Cong(通讯作者）, Chunhua Wei, Zhenyong Gu, Chunling Ma. Cholecystokinin modulates Th1/Th2 cytokines production in splenocytes in KLH-
