1、Survivin mRNA在肾透明细胞癌组织和外周血中表达的研究(1)这篇SurvivinmRNA 在肾透明细胞癌组织和外周血中表达的研究论文是程序自动抓取于互联网上，查看更多请点击：论文频道：lwxz/ 【摘要】 目的探讨SurvivinmRNA在肾透明细胞癌患者组织和外周血中的表达及其意义。方法采用逆转录聚合酶链反应（RTPCR ）法检测 46例 RCCC患者肿瘤组织和 15例健康志愿者外周血细胞中 SurvivinmRNA表达情况。结果 46例 RCCC患者中有 21例外周血细胞 SurvivinmRNA阳性表达，表达率为。对照组 15例中有 2例 SurvivinmRNA阳性表达，阳性
2、率为，RCCC 组 SurvivinmRNA阳性率明显高于对照组（P） 。46例 RCCC患者同时收集到肿瘤组织和外周血，SurvivinmRNA阳性表达分别为%和%，两者具有相关性（P） 。结论SurvivinmRNA在 RCCC肿瘤组织中有显著的阳性表达，应用RTPCR 法检测外周血细胞 SurvivinmRNA的表达，诊断RCCC敏感性、特异性高，且创伤性小，因此 SurvivinmRNA有可能成为 RCCC诊断的一个新的敏感指标，是目前进行肿瘤早诊的理想检测方法之一。 【关键词】 肾透明细胞癌 Survivin逆转录聚合酶链反应外周血【Abstract】 Objective Tostu
3、dytheexpressionandsignificanceofSurvivinmRNAintumoraltissuesandbloodcellsofpatientswithrenalclearcellcarcinoma（RCCC）.Methods SurvivinmRNAintumoraltissuesof46patientswithRCCC,15normalrenaltissues,bloodcellsof46patientswithRCCC,and15healthyvolunteersweredetected.SurvivinandactinwereamplifiedbyusingRT
4、21casesshowedpositiveSurvivinmRNAsignalsinbloodinpatientswithRCCC.Only2patiemtsincontrolgroupshowedpositiveSurvivinmRNAsignalsinblood.TheexpressionofSurvivinmRNAdifferencebetweenexperimentalgroupandcontrolgroupwassignificant.ThepositiveratesofSurvivinmRNAintumortissueandbloodwere%and%,respectively.C
5、onclusion CarcinomatissuesofthepatientswithRCCCshowedsignificantlypositiveexpressionofSurvivinmRNA.HighsensitivityandthespecificityofexpressionofbloodSurvivinmRNAtoprovideasimple,microinvasivediagnostictesttoidentifypatientswithRCCC.RTPCR wasaneffectivemethodfordetectionofSurvivinmRNAinthebloodofpat
6、ientswithRCCC.【Keywords】 renalclearcellcarcinoma,Survivin,RTPCR,peripheralblood肾细胞癌（renalcellcarcinoma，RCC）是泌尿生殖系统常见的恶性肿瘤，占泌尿外科肿瘤的第二位，其患病率占全身恶性肿瘤的 3%1 。根据病理分类，肾细胞癌又分为透明细胞癌、乳头状癌、颗粒细胞癌及未分化癌等几种类型，其中大多数为透明细胞癌，约占总数的%1 。目前对于肾癌尚无特殊有效的治疗方法，传统临床治疗中远期效果均不理想，因此早期诊断对 RCC的预后至关重要，发现敏感性和特异性均理想的肿瘤标记物对此有着极为重要的意义。目前关
7、于 Survivin在 RCC中表达的报道甚少，其与肾癌临床病理特征的关系尚无公认的结论，且Survivin在 RCC患者外周血中的表达情况能否成为一种潜在的瘤标，尚未见报道。本研究采用逆转录聚合酶链反应法分别检测 RCCC患者组织和外周血中 SurvivinmRNA的表达情况，评价其临床意义，以期找到更为有效的诊断、治疗和判断 RCCC预后的指标。1 资料与方法临床资料 实验组：收集 XX年 1月XX 年 12月我院诊治RCCC患者 46例，年龄 4278 岁，平均岁；男 27例，女19例；左侧 25例，右侧 21例；均经临床及病理证实。病理分级按 WHO标准，G111 例，G221 例，G
8、314 例。同时留取该 46例 RCCC患者的外周血，患者采血前未经任何治疗。对照组：15 例健康人外周血做为对照组。实验方法实验材料的处理和保存：所有 RCCC组织标本取下后立即以液氮速冻，并转移至80保存待用。所有外周血取3ml，EDAT 抗凝，3000r/min，离心 20min，弃血浆转入mlEP管，-80保存备用。RNA的提取：采取 Trizol法制备样品总 RNA。RNA的测定：用紫外分光光度计对 RNA在 260nm和 280nm下的吸光度 A260和 A280进行定量，计算OD260/OD280。RNA 完整性的测定：秤琼脂糖 1g，加入1TAE到总体积为 50ml，配成 2%
9、的凝胶，经微波炉加热100s左右，冷却到微烫手时加入 lEB 充分混匀后灌胶。取 RNA溶液 3l，加2l1TAE，1l6LoadingBuffer，混匀后上样。在1TAE的电泳液中，以 5V/cm的电压电泳 20min，在紫外灯下观察 RNA的电泳带，比较核糖体 RNA（rRNA）28s 和18s两条带，如果在 EB作用下显色强度为 21，说明本实验提取的 RNA比较完整。逆转录合成：10l 反应体系，按照设计盒说明配制。反应条件：3010min，4530min，995min，55min。产物20保存待用。PCR扩增：50l 反应体系配置：在上述 10l 逆转录产物中依次加入：反应条件：94
10、2min 灭活逆转录酶；94变性 45s,54退火 30s,72延伸 60s,35个循环；72延伸 10min。反应完成后将产物20保存待用。琼脂糖凝胶电泳：制备 2%琼脂糖凝胶，于 100V稳压条件下电泳 45min，在 VILBERLOURMAT凝胶成像仪上观察并拍照。电泳结果判断：出现 270bp电泳带为 HPSEmRNA阳性，标本均选 actin 为 PCR反应内参标准。ELlSA反应：按照 RTPCR 试剂盒操作说明书进行。统计学方法 应用统计软件进行分析，统计学分析方法采用非参数统计中 2 检验、Spearman 等级相关进行统计分析，P为有统计学意义。2 结果SurvivinmRNA在正常肾脏组织和肿瘤组织中的表达 46例 RCCC患者肿瘤组织和 15例正常肾脏组织中SurvivinmRNA表达见表 1。RCCC 组与对照组比较具有显著统计学意义（P） 。表 1 SurvivinmRNA在正常肾脏组织和肿瘤组织中的表达标本分组 nSurvivinmRNA表达阳性例数阳性率（作者：未知本文来源于爬虫自动抓取，如有侵犯权益请联系 service立即删除）
