1、临床检验实验教学大纲卫生检验专业用四川大学华西公共卫生学院医学检验教研室编 20130818一、课程基本信息课程名称：临床检验实验（Clinical Laboratory Techniques (Experimental Course)）课程号（代码）：504077020课程类别：专业课程学时：48 学分：2二、实验的地位、作用和目的临床检验是卫生检验专业学生在学习医学微生物与医学免疫学的基础上学习的一门重要专业课，为该专业的必修课。临床检验实验是跟临床检验理论课配套的实验课程，开设了血红蛋白测定、血细胞计数和分类计数、尿糖和尿蛋白测定、血清总蛋白测定、肌酐测定、ALP 的米氏常数测定、血清
2、ALT 活性测定等实验。通过课程学习，使学生掌握实验原理，明确实验注意事项，熟悉相应实验操作，为学生更好地理解理论知识，联系理论与实践起到积极作用。三、基本原理及课程简介依据临床实验室诊断相关项目，开设涵盖血液学检测、体液检测、重要酶活性检测等实验项目，主要依据的实验原理包括手工计数法、显微镜观察法、化学反应法、分光光度法等。同时，安排学生到附四院检验科参观学习一次，使学生对医院检验科的布局有一定的感性认识，并了解各种现代化检验仪器的基本操作，熟悉医院检验科的日常工作流程，知悉学习临床医学检验的重要性，提高学习的兴趣。四、实验方式及基本要求实验方式为训练（具体操作）和参观。为必修实验课，要求熟
3、练掌握。由带习教师讲解后，学生（分组）自己动手完成全部实验内容。五、实验报告在报告中要求明确试验目的、原理、方法及操作步骤，试验结果、结论、讨论等。六、考核与考试本实验课程以考核方法对学生进行检查，考核内容包括实验报告、实验操作、实习态度。七、基本设备与器材配置（名称及数量）电子天平 2 台，生物显微镜 40 台，722 光栅分光光度计 3 台，S500P 半自动生化仪 1 台，电子天平/FA1604S 1 台，全自动血球计数仪 1 台，全自动生化仪 1 台，紫外可见分光光度计 2 台。八、实验项目及内容提要1. 血红蛋白的测定血红蛋白与高铁氰化钾反应形成高铁血红蛋白，在和氰结合生成红棕色的氰
4、化高铁血红蛋白，测定 540nm 的吸光度值，采用摩尔消光系数法定量。练习熟练掌握指尖采血，取血于血红蛋白转化液中混匀后比色，计算。2. 血细胞计数指尖采血，取血于相应的稀释液中稀释后，加样于血球计数板上，显微镜下计数各种相应血细胞（血小板）的数量，按照稀释倍数计算原血中的血细胞数量。本实验主要要求掌握血球计数板的应用。3. 白细胞分类计数指尖采血，取血制作血涂片，经染色、干燥后，显微镜下（油镜）观察计数各种白细胞，计算各种白细胞所占的百分比。本实验要求主要掌握血涂片的制作、染色方法及各种白细胞形态识别。4. 尿糖与尿蛋白测定含有醛基的葡萄糖，在高热及碱性溶液中，能将溶液中蓝色的硫酸铜还原为氧
5、化亚铜，出现黄色至砖红色沉淀物。加热可使蛋白质变性凝固，加酸可使尿液 pH接近蛋白质等电点，促使蛋白质沉淀和溶解碱性盐沉淀物。本实验操作包括采样，加热，滴加试剂，观察结果。5. 血清总蛋白的测定蛋白质与双缩脲试剂反应生成紫红色络合物，测定 530nm 的吸光度值，采用已知浓度的血清蛋白标准，进行系列稀释后同法反应，测定，制作标准曲线，查表，计算。6. 血清肌酐测定样品中的肌酐与苦味酸反应，生成桔红色的苦味酸肌酐复合物，其颜色深浅与样品中的肌酐含量成正比，经过与相同处理的肌酐标准液进行比较，即可得出样品中肌酐含量。7. ALP 的米氏常数测定酶促反应的速率与底物浓度有关，在温度、pH 稳定的条件下，反应速度与底物浓度的关系可用方程式 表示，曲线呈双曲线型。SKmV实验中，固定其他条件，采用不同浓度的底物，测定其反应速度，制作反应速度对底物浓度的曲线，找出最大反应速度，其 1/2 所对应的底物浓度即为 Km。8. 血清 ALT 活性测定ALT 催化丙氨酸和 -酮戊二酸反应生成丙酮酸和谷氨酸，中止反应后加 2,4-二硝基苯肼反应后显色，500nm 比色。单位时间内生成的颜色与 ALT 的活力成正比。采用标准曲线定量。
