1、正畸牙齿移动时骨形成蛋白变化的实验研究现代口腔医学杂志 2001 年第 l5 卷第 4 期 JModernStomato,July2001,VoI15,No.4正畸牙齿移动时骨形成蛋白表达变化的实验研究陈远萍孙新华吴学礼孙淑萍【摘要 l 目的探讨正畸牙齿穆萄过程中骨彤成蛋白(boneraorpbxgeneticproteinBMP)的分布,表连的变化.方法采用 BMP 草克隆抗体克疫组化染色噩计算机图像分析的方法对实验性免正畸牙齿移动牙周组织中 BMP的袁连变化进行了定性,定量分析.结果正畸牙齿移动过程中,张力区牙周膜 BMP表达高峰出现早于牙槽骨表面;与张力区比较,压力医 BMP 表达高峰出
2、现较迟.结论 BMP 参与正畸牙齿移动时的骨吸收和骨增生的骨政建过程,并发挥着重要的作用.【关键词】牙齿移动骨彤成蛋白克疫组织化学染色骨政建Thechm,.ge0fBMPexpressioninexlrimentalm-thodontictoothm 帅 朗 IlCI-2Nn 以zng,SUNXinhua,UXudi,eta1.SchoolofStomodoloRy,hbrmanBetkuneUniversityofMedicalScieces,Changckun130041【Abstract】ONeetiveToinvtigateofBMPdistributionandexpressioni
3、ntheorthodontictoothrrcoverrmnt.MethodsBMP币reonwasdeterminedintheperiodontaltissueofexperlmentalorthodontictoothmovementofrabbitsrBIVIPmonodaalantilx)dywithinxmunohistochemiealstainingandimageanalysissystem.RerltsThefindingsshowedthatintheprocesofortbodomictoothmovenlent.thepeakofBMPexpressiontookpl
4、aceearlierOilthel:erlodonmmembraneoftensionareathanonthealvmliandc0n1 口withthetensionarea,thepeakofBMPexpressioninthem 岫 ai“e.ttookplacelatexCI 璐iIHIIt.aggeslsBMPpartidpatesbLleakorptionandrenxtelinginortnfictoothmovetltent.andplaysanimportantrole【Keywords】 ToothmovementBMPInmltmohitochemicalstainBo
5、gleremodeling中图分类号:R783.5 文献标识码:A骨形成蛋白(bonemorphogeneticproteinBMP)作为骨生长的促进因子具有诱导成骨的作用,与硬组织的形成和改建有密切的关系,通过实验动物兔的正畸移动牙齿牙周组织的组织学和免疫组织化学观察以及计算机图像分析的方法,对实验性正畸牙齿移动兔牙周组织中 BMP 的表达变化进行了定性,定量分析.材料和方法1.主要试剂及仪器:抗骨形成蛋白单克隆抗体(西安第四军医大学口腔医学院)为小鼠 IgG2a;通用型抗体,DAB 发色剂(宝泰克公司);图像分析仪(加拿大 NORTHERNECLIPSE 公司生产).2.实验动物及分组:选
6、用体重在 1.5kg-m 右的健康大耳白兔 21 只(由白求恩医科大学实验动物部提供),雌雄不限,随机分为正常对照组与实验(1,3,5,7,l4,2l 天) 组,每组 3 只.3.加力装置及加力方法:麻醉下,使用牙科高速作者单位:】30041 长春,吉林太学口腔慝院正畸科陈远萍,孙新华):吉林大学第一医院(吴学礼);空军沈阳 463 医院(孙淑萍)涡轮车针在实验组动物左侧上颌切牙和第一磨牙龈缘处作一浅的固位淘,用 0.25mm 正畸不锈钢结扎丝将螺旋弹簧结扎在上颌切牙与第一磨牙之间,使螺旋弹簧均产生 80g 的拉力,牵引上颁第一磨牙向近中移动.应用 ZL 一 1 型正畸测力计测量力值.4 标本
7、制作:正常对照组动物于 2l 天后,实验组动物分别于 1,3,5,7,14,21 天后处死.取含左侧上颌第一磨牙及其周围牙槽骨的组织块,常规固定,脱钙,包埋,制成蜡块,以平行于牙体长轴为标准作近远中向连续切片,厚度为 5 微米.5.染色:组织切片进行常规 HE 染色及按常规SP 法进行免疫组织化学染色 ,骨形成蛋白单克隆抗体(BMPMcA.h)工作浓度为 l50,阴性对照用PBS 代替一抗.6.BMP 定量分析:使用图像分析仪,对每张免疫组织化学染色后的切片作 BMP 定量分析.在组织切片上确定四个测量部位;第一磨牙根中 1/3 处近中(压力区 ),远中(张力区) 的牙周膜的近牙骨质侧(以下简
8、称牙周膜区) 和牙槽骨表面.每个部位随机选择三个视野,测量 BMP 阳性表达的面积.现代口腔医学杂志 2001 年第 15 卷第 4 期 jModemSlomatd,Jury2001,“4o115,No4结果1.对照组兔牙周组织中 BMP 的分布:正常免上颌第一磨牙的牙周膜近中侧略窄于远中侧,并以颈部明显+牙周膜纤维排列规则呈波浪状,牙槽骨表面未见明显骨吸收和新生.BMP McAb 免疫组织化学染色结果表明:在正常兔牙周组织中,BMP 主要分布于牙周膜及其周围组织细胞的胞浆中,尤其是靠近牙槽骨和牙骨质的区域阳性染色较强+而中问区域阳性染色较弱;成骨细胞,成牙骨质细胞,成纤维细胞染色均呈强阳性,
9、破骨细胞染色呈弱阳性;近中侧牙周膜 BMP 染色强度小于远中侧 .2 实验性正畸牙齿移动过程中组织变化及BMP 分析的变化:加力第 L3 天组:压力区牙周膜变薄,胶原纤维排列紧密,细胞密度增大,牙槽骨表面可见破骨细胞,骨吸收方式的直接骨吸收;张力区牙周膜增宽,胶原纤维被拉长,纤维结构疏松+毛细血管扩张,牙槽骨表面可见新生的成骨细胞(图l,2).加力第 57 天组:骨质吸收与新生均很明显压力区近颈部牙周膜明显变薄,细胞结构不清,有些细胞核固缩,有些消失,骨吸收明显,牙槽骨表面可见较多骨吸收陷窝+陷窝内可见胞大核多,染色阳性的破骨细胞;张力区骨质新生活跃,新生的类骨质表面可见较多的,染色阳性的新生
10、成骨细胞.牙骨质表面成牙骨质细胞核,胞浆丰富,阳性染色较强.加力第 14-21 天组:压力区牙槽骨继续吸收 ,其表面仍可见破骨细胞,破骨细胞染色强度低于 57天时;张力区成骨现象仍很明显,新生的类骨质开始钙化(图 3,4).3BMP 定量分析:不同加力时间张力区,压力区牙周膜及牙槽骨表面 BMP 表达变化见表 1,2.表 1 不同加力时间张力区,压力区牙周膜 BlvlP 的表达变化注:XS,*P005.*P005 与 lE 常对照组比较,n=3表 2 不同加力时间张力区,压力区牙槽骨表面 BMP 的表达变化注:X=S,*P005 与正常时媚组比较 .n=3作为骨生长的促进因子骨形成蛋白(BMP
11、)存在于人与动物的许多骨组织,牙齿及牙周组织中,它主要由未分化的,有活性的间充质细胞分泌,在局部释放,诱导未分化的问充质细胞向成骨方向转化.间充质细胞具有多项分化的特性+或成肌组织,或成纤维组织,或成脂肪组织,或成骨组织.这些形态发生的特性是间充质细胞所固有的在 BMP 的作用下,激活了它们从组织胚胎遗传下来的软骨一骨的形态发生潜能,一旦具有潜能的细胞获得某种信息后,即向该信息所“指定“ 的方向发展 ,而 BMP 所给的信息向软骨和骨细胞分化 MP 诱导的靶胞除间充质细胞外,还有成纤维细胞等结缔组织细胞.BMP 通过作用于这些细胞的胞膜受体 .使这些细胞的 DNA 序列发生改变,向着骨系细胞方
12、向分化 J.作为骨生长促进因子的 BMP 诱导成骨的作用已被大量的实验所证实.J.本研究结果表明:正畸牙齿移动过程中.张力区牙周膜 BMP 的表达在加力第 5 天时达到高峰,牙槽骨表面 BMP 的表达在第 7 天时达到高峰.提示在矫治力的作用下 BMP 大量生产 ,首先诱导牙周膜内细胞产生变化,使成纤维细胞,成骨细胞增殖活跃+牙周膜 BMP 的表达明显增强.之后随着细胞的增殖,成骨的活跃.牙槽骨表面 BMP 的表达也明显增强.进一步证实了骨的形成是牙周膜受到张力后开始的.在压力区,牙周膜中 BMP 的表达在加力后第L4 天显着上升,并持续到 2L 天+ 而牙槽骨表面 BMP表达在第 L4 天明
13、显上升,与张力区比较压力区BMP 表达的高峰出现的较迟 ,这可能与破骨细胞对矫治力的反应不象成骨细胞那样快速而敏感,以及破骨细胞的形成,活化,骨吸收作用是由成骨细胞所介导的有关.另外,本研究观察到免牙周组织中破骨细胞 IjMP 的表达较成骨细胞弱 +这也许是导致正畸牙移动过程中压力侧 BMP 表达的高峰出现较?27O 现代口腔医学杂志 2001 年第 l5 卷第 4 期JMEidernStomato1.July2001,Vdl5,No.4迟的原因之一.(车文匿见插页)参考文献】杨美样.盎岩,丁寅.等.正常脬鼠牙齿和牙周组织中 BMP 的分布及意义牙体牙髓牙周病杂志.1997,7(3):17I1
14、732 畅连甲.盘岩,樊代明,等用抗 P.IP 单克隆抗体分析骨形成蛋白在骨和牙胚巾的分布第阱医大学 1990,】I(1):53553 呈租尧诱导成骨与骨形卷发生蛋 I=中华骨科杂志,1988.8(3):2312344 金岩.牙齿与骨形成蛋白的关系国外压学 1脏学分册.】992.19(6):3423465 金岩.扬连甲骨形成蛋白在领骨骨折愈台中的作用.实用口腔医学杂志.1989,5(4):2486AndrewjW,HoylandJ.S】 埘 P1bT 嘣 nofBMP2ndNAexpreioninhunafracturecallusJ5oneJintsL 吨(Br),1993.75(3):28
15、l7K0nataniM.Sgirr,otoT.KajiH.e1.StimuLaoryeffectofbonerrrphogeneticprotein 一 2onoteoclastllkeoellfomxatlonandboneresorbingactivity.JBoneMinerRes,1995,10(1】 ):168190c 车文编辑王好公 )(收稿 FI 期 20000822)(修回日期 20(01204)链霉素治疗三叉神经痛的临床观察周昌龙郑瑛杨红我科从 1997 年至今用链霉素治疗三叉神经痛.现将随访 1 年,有完整病史资料的 136 例患者总结如下.一,材料和方法L 临床资料:病例
16、选择标准:所有病例都曾服用卡马西平或苯妥英钠 1 年以上,最长者达 20 年,用药后镇痛效果差,副反应重.患者有明显的前驱症状,典型的三叉神经痛表现;排除颅内占位性病变.136 侧患者中有 46 侧曾行甘油注射.12 例无水己醇注射,8 例射频治疗,拔牙 40 侧.半月神经节微血管剥离术 3 例.136 例患者中,男 58 例.女78 例,年龄:35 岁 J 例,40-49 岁 16 例,5059 岁 46 侧,6069 岁 64 例,70-79 岁 4 例,80 岁以上 1 例,平均年龄 575岁.分支与部位:左侧 72 例,右侧 64 例,1 支 2 例,支鹋例,支 46 例.,支 8 例
17、,I,支 2 例.2 治疗方法:采用华北制药厂生产硫酸链霉素 10g/支,术前皮试(一),将 1.0g 链霉素与 2%的利多卡困配制戚 2ml溶液.依据患支的多少,每个注射点为 2ml 溶液,每日 1 次,7 天为 I 疗程,每疗程间隔 2 周,每次注射均作板机点与神经孔部位同时用药,神经孔部位为下颁孔,额孔,眶下孔.对复发者再次局部注射.所有患者在应用链霉素后,均作电测听及踏步运动,未发现听力受损及运动失调,也未发现超过极量问题.:二,结果1.疗效标准:显效:经 1-3 疗程治疗后.1 年内无复发.有效:经 J3 疗程治疗后,疼痛缓解,1 年内再次复发,再次注射后,重获缓解.无效:经 1-3
18、 疗程治疗后,疼痛无缓解,停药后疼痛再次发作.2 结果:显效 85 例(625%), 有效 49 例(36%),无效 2倒(14%),总缓解率 98.5%,无效 2 例,均为第 1 支=忭_荇位:6460(10 四川省泸州学院附 J 副兜腔外科三,讨论既往应用链霉素治疗三叉神经痛.多注重对周围支的封闭,而对扳机点部位的注射相对较少,通过我们的临床观察.发现在注射初期,注射次数少的情况下,链霉紊注射于扳机点的镇痛效果明显优于神经孔部位的周围支注射.但是链霉素作用于扳机点后,局部反应重于周围支,出现肿胀疼痛,但这种疼痛并非是三叉神经性质的疼痛,这可能是游离甲醛的局部刺激作用所致.对局部反应较重的患
19、者,可延长注射间隔时间.局部热敷理疗,停药后可自行缓解.我们强调扳机点与周围支同时用药.应用链霉紊加利多卡田治疗三叉神经痛,最大优点,是注射后神经分布区无感觉异常,疼痛消失时间长,操作简便,可反复连续注射.本疗法疗效虽明显,但复发率高,我们研究该组患者 1 年复发率达 36%,而刘书魁报道,1 年内复发率 425%.链霉紊的治疗剂量每次 l-2g,可每日 1 次 ,隔日 1 次,也可 35 天一次,57 天为 l 疗程,不必担心超过扳量的问题.对诊断无误的患者经 l-3 次注射后即有明显疗效,本组发病 20 年上的患者仅做 1 次注射,迄今两年来见复发.对疗效差的病员,应注意注射点准确性较差与扳机点范围较多或较大有关因此应在疼痛发作时准确捕捉痛点必要时可让病员于痛区做标记,发作一次记一次.标记点最多处作为下次注射封闭点.本组第 1 支 2 例病员无效.对于复发和无效的病例,应改作其它治疗.参考文献】掷骥硫酸链霉索封闭治疗 37 例三 x 神经痛的体会现代日腔医学杂志】988,2(2):692 书魁.张平链霉素周闱神经阻滞猜疗_卫神经痛现代口腔医学杂志.I994.8( 】):.53.(本文编辑王好公】( 收稿日期 2000 一 o8 一 I4)(修回日期 2000 一】008)
