1、临床感染性疾病实验室诊断技术现状与未来临床检验医学发展的五化 自动化（流水线、全封闭系统）床边化（POCT技术、快检技术）信息化（依赖各种数据库、LIS）分子化（各种PCR技术、质谱技术等）个体化（临床用药、疾病预测等）检验概念的更新医学检验 检验医学检验结果确认检验结果解释提供实验数据 出具检验报告提出相关建议相关咨询服务临床检验医学专业发展检验医学血液体液 生物化学 免疫学 微生物学 分子生物学 输血全自动仪器+形态学全自动仪器小型仪器+手工全自动仪器+形态学RT-PCR各种芯片质谱检验医学的发展和管理中什么最重要？检验流程管理至关重要 检验质量流程管理 实验诊断流程管理检验质量流程管理
2、检验流程“三部曲”检验前阶段：是指从临床医生开出检验单、患者准备、原始标本的采集、储存、运输直至检验室验收的全过程。检验结果正确的重要保障检验中阶段：是指从接受标本开始到实验数据形成的过程。确保检验结果的准确性?（正确）检验后阶段：是指检验结果的确认、报告单的形成到临床对检验结果的认可及反馈的全过程。确保检验结果的真实性检验前（原材料）检验中（产品生产）检验后（售后服务）实验诊断流程管理 优化检验项目组合，为临床提供检验信息最大化。为临床提供实验数据鉴别、确认技术平台。建立疾病筛查、确认、疗效评估三级技术平台，给临床提供快捷、相对准确的实验数据，为临床诊疗服务。初筛试验定性试验：（Y；N）确认
3、试验（敏感性 与 特异性）（方 法适用范围）定量试验：（是多少）；真值？（受方法学限制 酶 染 料 药 物等影响）疾病筛查、确认、疗效评估三级技术平台疾病筛查平台（筛查实验）疾病确认平台（确认实验）疾病疗效评估平台（实验数据的变化）艾滋病筛查、确认、疗效评估三级技术平台酶标、金（硒）标法筛查平台免疫印迹、PCR、病毒载量确认平台疗效评估平台（病毒载量）病原微生物感染性疾病诊断方法：根据疾病诊断的需求和目的筛选法：凝集试验、酶联免疫、胶体金、发光等方法。确诊法：病原体分离、免疫印迹、PCR技术、生物芯片、质谱技术、核酸测序等方法。病原微生物感染性疾病诊断方法：病原体检测：病原体培养、抗原检测（酶
4、联免疫、荧光免疫、胶体金、蛋白芯片、质谱等）、核酸检测（各种PCR、基因芯片、核酸测序、质谱等）。抗体检测：IgM,IgG检测(酶联免疫、荧光免疫、胶体金、免疫印迹、生物芯片等）。目前临床感染性疾病实验室诊断手段 病原微生物培养 慢！抗体检测 滞后、通量不够！抗原检测、分子生物学检测 通量不够！第一时间病原学诊断困难！临床急需解决的问题 如何快速检测病原体?（筛查）如何准确检测病原体？（确认）感染性疾病疑似病人血常规降钙素原检测+标本采 集病毒培养分子生物 学检测病原抗原、抗体检测细菌、真 菌培养G试验降钙素原；G试验定量；病毒载量病原体的多重快速筛查技术的建立是关键！多重筛查技术感染性疾病病
5、原微生物抗体检测 欧蒙BIOCHIP系统：呼吸道系列 中枢神经系列 淋巴结炎系列 心肌炎系列 胃肠道系列 皮疹系列 妊娠感染系列 眼科感染系列 其它肝炎系列病原微生物特异性抗体谱检测HIV特异性抗体谱检测HIV病毒筛查实验（酶标、金标）病原微生物特异性抗体谱检测单纯疱疹病毒-1型、-2型特异性抗体谱检测单纯疱疹病毒筛查实验（酶标、金标）病原微生物特异性抗体谱检测幽门螺杆菌筛查实验（酶标、金标、呼气实验等）2015-7-31广东省皮 肤 病医院 黄澍杰 232002-2012年广东省各期梅毒发病情况2002年-2012年 广 东 省 各 期 梅 毒 发 病 趋 势0100002000030000
6、4000050000600002002 2003 2004 2005 2006 2007 2008 2009 2010 2011 2012年份病例数梅毒期梅毒期梅毒期梅毒胎传梅毒隐性梅毒检测对象ELISA或胶体金或免疫发光免疫荧光吸附或TPPA或免疫印迹实验确认快速血浆反应素试验（T RUST、RP R滴度测定，疗效判定）筛查平台确认平台疗效评估平台免疫印迹技术 抗原检测：依赖于好的抗体（单抗、多抗）抗体检测：依赖于好的抗原（天然、基因工程）N.I.I ME.coli expression systemsGeXP技术GenomeLabTMGeXP TechnologyCEQTMGenetic
7、Analysis SystemProcess of GeXPCells Grown OR SamplesExtract RNA and DNAGeXP AnalysisMultiplex PCR step 2Universal Primers take over after about the 3rdcycle(forward Primer is labeled)cDNA synthesis from mRNAReverse Transcriptase(Reverse chimeric gene specific primers only,Multiplexed Reverse transcription)Remove aliquot of cDNA and move to PCR amplification1Multiplex PCR step 1Forward chimeric gene specific primers(involved in cycle 1 to 3)2a2bMultiple gene transcripts(mRNA)in RNA sampleWUPyv鼻病毒副流感病 毒3 型腺病毒 流感病毒A 型RSV流感病毒B 型HMPV HCoV新技术展望伯乐数字PCR谢谢聆听
