1、淋巴细 胞的功 能检测一、T 细 胞 功 能 检测（一）T 细胞增殖试验 原理：非特异性增殖、特异性 增殖（淋巴细 胞母细胞化）方法-形态学方法-3H-TdR掺入法-MTT比色法1、形 态 学 方法未转化细胞 转化的细胞1、形 态 学 方法母细胞 过渡型 未转化大小（um）12-20 12-16 6-8核、染色质 增大、疏松 增大、疏松 不增大、密集核仁 清晰、1-4 个 有或无 无有丝分裂 有或无 无 无胞质、着色 增多、嗜碱 增多、嗜碱 极少、天青色浆内空泡 有或无 有或无 无伪足 有或无 有或无 无2、3H-TdR 掺入法液体闪烁仪3、MTT 比色法比色法（最常用）线粒体琥珀 酸脱氢 酶
2、分解 底物MTT 显 色，转 化 率 越高 颜 色越 深。（二）抗 原 特异性T 细 胞增殖试验原理：体外分离培养T 细胞，加入 某 种抗 原 使 抗原特异性T 细 胞 活化 分 泌IFN-g,通过 检 测IFN-g,反映 某抗原特异性T 细胞 的 功 能。例 如诊 断 结核 的T-SPOT.TB 方法。评价：较为困难，主要原因是 抗原特 异性T 细 胞数量太少。（三）MHC-肽 四 聚 体 技术 制备 刺激或检测抗原特异性CTL FACS检测 直接、迅速、灵敏，结合膜分子和胞内分子检测，可对细胞进行多种分析。（四）T 细 胞 分 泌功能测定 T 细胞可分泌各类细胞因 子和生物 活性物 质，检
3、测血清中或测定体外培养的T 细 胞经 各 种丝 裂 原或抗原刺激后所分泌的各种细 胞因子，可反 映T细胞的功能。方法：细胞因子的各种检测方 法。（略）（五）T 细 胞 介 导的细胞毒试 验 原理：CTL 与 肿 瘤细 胞 按 一定 的 效靶 比 例混 合，共同温育一定时间，观察肿瘤细 胞杀伤 情况。检测方法：1、形态学方法2、51Cr 释放法（六）体内试验 原理：用特异性抗原或丝裂原 注射皮 内，常 出现迟发型超敏反应。其程度反映 受试者 对某种 抗原的特异性免疫应答能力或总体 细胞免 疫状态。检测方法：1、特异性抗原皮肤试验：如OT 试验 等。2、PHA 皮 肤 试验：二、B 细 胞 功 能检测B 细胞的主要功能是转化 为浆细胞 后分泌 抗体，因此测定B 细 胞 的 功 能 主要 是 检 测血 清Ig的含和体外B 细胞增殖和合成抗体 能力检测 等。三、NK细胞活性测定 原理：NK具 有 杀 伤 活性，将 其与 相 应靶 细 胞 共育，检测靶细胞死亡程度反映NK活性。检测方法：1、形态学方法。2、酶释放法：LDH 释放 法3、同位素释放法：51Cr 释 放 法。
