1、LSR操作手册1. 仪器的面板：在仪器前方面板的右下方有3个流速控制键（LO/MED/HI）及3个功能控制 键（RUN/STANDBY/PRIME） a:流速控制： LO: 样品流速12ul/min MED: 样品流速35ul/min HI: 样品流速60ul/min b:功能控制： RUN：绿色时表示样品开始输入，黄色表示仪器不正常STANDBY：无样品或者预热时的位置，此时激光管的功率会下降，可延长其寿命PRIME：自动冲洗进样针，一个反冲的过程，通常在进样针有堵塞现象的时候启用 c: 鞘液桶与废液桶：位于仪器正面下方d: 样品的输入区在仪器的中部 :上样针、样品支架2. 开电脑，打开软件
2、 BD FACS Diva Software等待机器联机3. 在Browser窗口下的Administrator下依次建立 New Folder ( 改名为某老板) New Folder （改为用户名） New Experiment（改为实验时间） New Specime New Tube （样品名称）4. 若检测的内容与以前的一样，则可以复制以前模板，然后更改日期5. 在工具栏中选择散点图工具，其横坐标FSC-A，纵坐标为SSC-A6. 在工具栏中点击所选的图形类型，拉动鼠标成图，根据荧光染料所需要的接收通道，更改坐标轴的名称。7. 根据你的实验对照样品设定gate，在工具栏中选择gate的
3、不同形状，将在图形中集中得成团细胞选中。同时设定Marker线，点击工具栏中的横线或者正方形椭圆等，在直方图中我们使用横线作标记，散点图中选择十字或者其他正方形椭圆以及不规则图形作为标记。8. 测定实验样品。一、单色标记的样品1. 根据对照样品情况调整FSC，SSC的Voltage大小，把细胞调整到适当的位置 调整接收通道（FL1/FL2/FL3）的Voltage大小，调整阴性细胞群主要集中于10的一次方以内。2. 然后测定实验样品，10.待收集到相应的细胞数，仪器会自动停止记录。如果细胞数不够预设的量，或是需要中途停止收集，点击Pause 点击Save直接记录数据。二、双色及多色标记的样品1. 阴性对照，单阳性对照（用于仪器校正）2. 首先测定阴性对照，将它每个通道的图形调节在10的一次方以内3. 然后检测单阳性对照，在compensation工具栏内，寻找相光通道进行补偿调节4. 检测多色标记的样品
