1、 东南大学博士学位论文伊马替尼对白血病相关抗原RHAMM特异性CD8+ T细胞和CD4+CD25+调节性T细胞抑制的研究姓名：陈锦飞申请学位级别：博士专业：遗传学指导教师：陈宝安20070801荷境癑阿 瓼猚猚 籝札籧 。纩铆丞东南大学学位论文使用授权声明东南大学、中国科学技术信息研究所、国家图书馆有权保留本人所送交学位论文的复印件和电子文档，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。本人电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。除在保密期内的保密论文外，允许论文被查阅和借阅，可以公布论文的全部或部分内容。论文的公布授权东南大究生院办理期：樱蟆啊薄返目挂籖特异性的馨拖赴娜芙夤芎透咂德适茿札患者猘特
2、异性的酪氨酸激酶抑制剂“。它还作用于血小板来源的生长因子受体治疗。本研究的目的。为了阐述以上解释，我们须回答如下问题：续感染的控制力下降。没有赴且銫赴募谭苑从1扔蠧 细胞辅助下的弱“。早期起效期后而不是在起效期起作用”虼耍锌赡芤谅硖婺岫远约且湫訡馨拖赴募詈驮鲋常种艭 赴置谙赴蜃樱鹘谙騎反应的细胞有不同的功能分化结果。的平衡，提示伊马替尼抑制体内纳伞醚芯拷峁蚑等的研究结果相吻合。小时，这个可能可以解释上三、伊马替尼对正常造血干细胞和祖细胞的影响狵代表人干细胞因子芴澹虵春脱P“迳伤一起更高剂量譬如每天薄级或兑陨系亩拘苑直鹗。伊马替尼预小板减少贫血飧鱿窒罂梢灾稚鲜龉鄄臁 薄硗猓詂札患者超过一年的高剂
3、量伊马替尼前瞻性研究揭示血清虸水平的显著性变化“ 。基于上述研究结果，伊马替尼对胃肠道基质肿瘤的治疗特殊的意义，因为等“” 冷冻盒疭，。；光学显微镜猌，珿 ：琁，琋，保存；双蒸水 ，保存；琋 ，。健康献血员和后安吮瓯纠丛春脱舯萻分离第二章伊马替尼对白血病相关抗原砌拍特异性赴虲鹘谛訲细胞抑制的研究姐臼【荒模琱分离缓冲液：含搜0椎鞍的 甽；充分混匀后在路胖分钟；掷牖撼逡； 琇。收集所有的流出液，这是未标记的细胞部分；从分离架上移去磁柱，并置于合适的收集管上；， ，；，保存在：，；。不冷冻。分离缓冲液洗涤细胞，充分去除细胞上清液；掷牖撼逡；的 抗一生物素磁珠；磁珠；分离缓冲液洗涤细胞，充分去除细胞上
4、清液；掷牖撼逡。褂肔恰细胞使用分离缓冲液洗涤柱；用掷牖撼逡合吹覮次，收集所有未标记的细胞，其为未标记的富含掷牖撼逡。将细胞悬液放入柱中；细胞株来源于原始细胞危象的 槐泶颒分子但是可以表达校痗。用于在“释放试验中作为阴性对照。培养基；计算和籘细胞；匀；口卜腅试验。任琾滴嬗；，： 在板中孵育细胞在每孔中加入经相应刺激物刺激的细胞悬液；养箱中薄谂嘌诩洳灰R贫疎板。斑点的检测使用洗涤缓冲液图觳饪固 籅一生物素任孜锶芤褐敝撩飨缘陌叩愕牟避光状态下室温放置种；，；微球蛋白，。：包被缓冲液：保存；抗生蛋白链菌素一按照每孔甽准各有丝分裂源以及相关抗原刺激的靶细胞；抗体的检测去除细胞悬液，每孔用蒸馏水洗涤危诩涿
5、靠酌看斡盟分钟；吹次；渲煤玫腁底物溶液，监测斑点的形成以防形成过分高的背景颜琋展馄椎奈装逶亩疗，。生物素结合的抗一人单克隆抗体；醯目股鞍琢淳匾煌萈； 稀释液：试剂的准备，将标准品充分混匀；、和皿患颖曜计返难鞠鸵荷栉工作检测剂；彻一步底物试剂，在使用前分钟之内配置。每孔加 渲煤玫南吹踊撼逡合吹樱次，最后一次用滤纸将孔中的骷觳饧粒肊板封口膜将夂茫谑椅孪路胖小渲煤玫南吹踊撼逡合吹樱次，最后一次用滤纸将孔中的时：能检测笪展馄椎奈装逶亩疗琄，。标准品：基因重组的人猵洗涤浓缩液 加入上述细胞标准品的准备蒸馏水后在震荡器上至少震荡分钟；用聚丙烯小管将稀释的标准品分装，每小管 。工作检测品的准备猓荷锼兀股鞍琢
6、淳厥贼匆徊椒跤吹踊撼逡合吹次。最后一次洗涤时用滤纸吸干：骷觳饧检测抗体股鞍琢淳，用封口膜封好后琋荧光色素结合的抗一抗体痗撼逡海嬗；邮洗涤缓冲液褂檬庇盟 徒衛：稀释嬗：的邢统嘣，再在每毫升的 细胞培养液中加染色缓冲液：叠氮化钠。 所有的试剂都包含在“琒体外培养细胞的标记为了标记细胞，仔细将指鱿赴缓蠼赴跤分钟。的细胞培养液中去。细胞的旧撼逡褐泻蚕赴置入流式细胞仪检测管中；溶液中；橹嘌叻琋。；甆的圆锥形管中。再将畲蟆癱头靶细胞一匾煨匀芙獾募扑惴椒检测孔的释放一自发“释放最大“释放一自 魇较赴叻琋，；碘化丙啶；5鞍譜结合缓冲液。 中； 聚丙烯圆底管管中；的并轻轻混匀； 岷匣撼逡海时之内进行流式细胞仪进行分析。肋罅魇较赴肋琋 琈，；狝疘，琈，； 琈，
