1、收 稿 日 期 : 2004 - 12 - 09作 者 简 介 :边 清 泉 (1955 - ) ,男 ,山 东 泰 安 市 人 ,副 教 授 ,主 要 从 事 天 然 产 物 分 离 和 测 定 的 研 究 .3 通 讯 作 者 :刘 家 琴 ,手 机 : 13541744669, E - mail: liujq67 yahoo. com. cn第 22卷 第 2期 周 口 师 范 学 院 学 报 2005年 3月Vol. 22 No. 2 Journal of Zhoukou Teachers College March. 2005气 相 色 谱 法 测 定 青 蒿 提 取 物 中二 十
2、八 烷 醇 和 二 十 六 烷 醇 的 含 量边 清 泉 ,刘 家 琴 3 ,李 松(绵 阳 师 范 学 院 化 学 系 ,四 川 绵 阳 621000)摘 要 :建 立 青 蒿 素 提 取 物 中 二 十 八 烷 醇 、 二 十 六 烷 醇 含 量 检 测 的 气 相 色 谱 方 法 . 采 用 毛 细 管 色 谱 柱 BD - 17(30m 530 m 1. 0 m) ; F ID检 测 器 ;气 化 室 温 度 269 ;柱 温 为 一 级 程 序 升 温 (155 - 2m in - 10 m im - 1- 262 - 12m in) ;载 气 高 纯 氮 42. 0mL /m in
3、;空 气 410. 0mL /m in;氢 气 38. 0mL /m in. 平 均 回 收 率 :二 十 八 烷 醇为 100. 16% ( n = 5) , RSD为 0. 91% ;二 十 六 烷 醇 为 98. 5% ( n = 5) , RSD为 1. 23%.该 方 法 准 确 、 灵 敏 、 重 现性 好 ,可 适 用 于 提 取 分 离 二 十 八 烷 醇 、 二 十 六 烷 醇 时 质 量 控 制 和 含 量 检 测 .关 键 词 :青 蒿 ;二 十 八 烷 醇 ;二 十 六 烷 醇 ;气 相 色 谱 法中 图 分 类 号 : Q657. 7+ 1 文 献 标 识 码 : A
4、 文 章 编 号 : 1671 - 9476 (2005) 02 - 0039 - 03青 蒿 素 是 一 种 重 要 的 抗 疟 药 物 ,是 从 菊 科 植 物 黄 花 蒿 (A rtem isia annua l. ) 中 提 取 分 离 的 1 . 青 蒿 素 的提 取 与 分 离 国 内 外 已 有 大 量 文 献 报 道 ,但 是 与 青 蒿 素 伴 生 的 二 十 八 烷 醇 和 二 十 六 烷 醇 确 在 青 蒿 素 的 纯 化过 程 中 被 弃 去 ,这 是 一 种 资 源 的 浪 费 . 目 前 尚 无 从 提 取 青 蒿 素 过 程 中 分 离 二 十 八 烷 醇 或 二
5、 十 六 烷 醇 的 报道 .二 十 八 烷 醇 和 二 十 六 烷 醇 类 高 级 烷 醇 是 一 种 生 物 活 性 物 质 ,雷 炳 福 等 2 - 4 报 道 ,二 十 八 烷 醇 类 和 二 十六 烷 醇 具 有 增 进 耐 力 、 精 力 和 体 力 ;缩 短 肌 神 经 反 应 时 间 ,提 高 反 应 敏 锐 性 ;促 进 激 素 功 能 ,改 善 心 肌 功 能 ,提 高 机 体 基 础 代 谢 率 等 生 理 作 用 . 在 发 达 国 家 ,二 十 八 烷 醇 和 二 十 六 烷 醇 等 高 级 烷 醇 已 广 泛 应 用 于 功 能 性食 品 、 营 养 补 助 品 、
6、 医 药 、 化 妆 品 等 行 业 . 在 提 取 分 离 青 蒿 素 的 同 时 ,将 副 产 物 用 于 分 离 二 十 八 烷 醇 、 二 十 六烷 醇 ,必 将 使 相 关 企 业 效 益 大 增 . 而 建 立 合 理 、 可 行 的 分 离 工 艺 路 线 ,首 先 要 建 立 各 生 产 环 节 检 测 二 十 八 烷醇 和 二 十 六 烷 醇 的 方 法 . 目 前 尚 无 青 蒿 提 取 物 中 二 十 八 烷 醇 和 二 十 六 烷 醇 含 量 检 测 方 法 的 报 道 ,本 文 旨 在建 立 提 取 青 蒿 素 不 同 阶 段 产 品 中 二 十 八 烷 醇 和 二
7、十 六 烷 醇 含 量 的 测 定 方 法 ,以 供 相 关 企 业 回 收 、 分 离 二 十八 烷 醇 和 二 十 六 烷 醇 类 产 品 检 测 与 质 量 控 制 时 参 考 .1 仪 器 与 试 剂日 本 岛 津 公 司 GC - 14B型 气 相 色 谱 仪 ,氢 火 焰 离 子 化 检 测 器 ( F ID) ;二 十 八 烷 醇 、 二 十 六 烷 醇 对 照 品( SIGMA ,纯 度 为 99. 0% , 98. 2% , GC用 ) ; CHCl3 等 化 学 试 剂 均 为 AR级 ,青 蒿 提 取 物 (样 品 B: 2. 8% 青 蒿素 粗 提 物 ;样 品 C:
8、98. 8% 青 蒿 素 精 提 物 ) 均 为 本 实 验 室 制 备 .2 方 法 与 结 果2. 1 色 谱 条 件毛 细 管 色 谱 柱 : BD - 17 (30m 530 m 1. 0 m) ; 检 测 器 : F ID; 气 化 室 温 度 : 269 ; 检 测 器 温 度270 ;柱 温 为 程 序 升 温 ,初 始 温 度 为 155 ,维 持 2m in后 , 10 /m in升 温 至 262 ,保 持 12m in;载 气 :高 纯氮 气 ,流 速 为 42. 0mL /m in;氢 气 (H2 ) 流 速 : 38. 0mL /m in;助 燃 气 (A ir) 流
9、 速 : 410mL /m in;进 样 量 : 2 L.2. 2 混 合 对 照 品 溶 液 的 配 制精 密 称 取 经 P2 O5干 燥 至 恒 重 的 二 十 八 烷 醇 15. 2mg,二 十 六 烷 醇 4. 5mg置 于 25mL量 瓶 , CHCl3定 容 至刻 度 ,摇 匀 ,备 用 . 对 照 品 溶 液 的 质 量 浓 度 分 别 为 608 g/mL, 180 g/mL.2. 3 样 品 溶 液 的 制 备分 别 精 密 称 取 样 品 B, C适 量 ,置 25mL容 量 中 ,加 CHCl3 溶 解 ,定 容 ,超 声 振 荡 20m in, 0. 45 m滤 膜
10、过滤 ,取 续 滤 液 待 测 . 样 品 的 质 量 浓 度 分 别 为 972. 2 g/mL, 760. 7 g/mL.2. 4 样 品 的 测 定分 别 精 密 吸 取 混 合 对 照 品 和 供 试 品 溶 液 各 2 L,按 2. 1项 下 行 色 谱 (色 谱 图 见 图 1) ,外 标 两 点 法 测 定 .测 定 结 果 :样 品 B中 二 十 八 烷 醇 、 二 十 六 烷 醇 的 质 量 比 分 别 为 31. 8mg/g, 40. 9mg/g,样 品 C两 种 烷 醇 含 量均 约 为 0.A:对 照 品 ; B: 2. 8% 青 蒿 素 样 品 ; C: 98. 8%
11、 青 蒿 素 样 品 ; 1:二 十 八 烷 醇 ; 2:二 十 六 烷 醇图 1 对 照 品 与 样 品 的 GC - F ID色 谱3 方 法 学 考 察3. 1 线 性 关 系 考 察分 别 精 密 吸 取 混 合 标 准 溶 液 1 L, 2 L, 3 L, 4 L, 5 L, 6 L,按 2. 1项 下 测 定 色 谱 峰 面 积 ,以 进 样 量 为横 坐 标 ,峰 面 积 为 纵 坐 标 作 图 ,二 十 八 烷 醇 回 归 方 程 : Y = 9457. 4X + 14609. 26, r = 0. 9999,线 性 范 围 为01304 11824 g;二 十 六 烷 醇 回
12、 归 方 程 : Y = 10472. 2X + 1504. 1, r = 0. 9997,线 性 范 围 为 0118 1108 g.3. 2 重 现 性 试 验对 同 一 批 样 品 B 按 2. 4项 下 进 行 测 定 , 二 十 八 烷 醇 的 质 量 比 为 32. 0mg/g, 30. 6mg/g, 3217mg/g,3115m g/g, 3212mg/g, RSD = 2. 51% ( n = 5) ,二 十 六 烷 醇 的 质 量 比 为 39. 6mg/g, 4019mg/g, 4118mg/g,4015m g/g, 4117mg/g, RSD = 2. 22% ( n =
13、 5).3. 3 精 密 度 试 验取 2. 3项 下 的 同 一 供 试 样 品 B溶 液 ,按 2. 1项 下 测 定 , RSD = 1. 16% ( n = 6).3. 4 回 收 率 试 验精 密 称 取 样 品 (B ) 6份 . 其 中 5份 分 别 精 密 加 入 对 照 品 适 量 ,另 一 份 作 为 测 本 底 值 样 品 用 . 各 份 均 按2. 4项 下 方 法 测 定 ,每 份 进 样 3次 ,求 均 值 计 算 平 均 回 收 率 . 结 果 见 表 1和 表 2.表 1 二 十 八 烷 醇 回 收 率 测 定 结 果 ( n = 3)样 品 量 (mg/g)
14、加 入 量 (mg/g) 测 定 量 (mg/g) 回 收 率 ( % ) 平 均 回 收 率 ( % ) RSD ( % )31. 80 22. 62 54. 66 100. 4431. 80 22. 62 53. 80 98. 8631. 80 22. 62 54. 49 100. 13 100. 16 0. 9131. 80 22. 62 54. 41 99. 9831. 80 22. 62 55. 17 101. 3804 周 口 师 范 学 院 学 报 2005年 3月表 2 二 十 六 烷 醇 回 收 率 测 定 结 果 ( n = 3)样 品 量 (mg/g) 加 入 量 ( m
15、g/g) 测 定 量 (mg/g) 回 收 率 ( % ) 平 均 回 收 率 ( % ) RSD ( % )40. 90 18. 07 58. 03 98. 4140. 90 18. 07 57. 26 97. 1040. 90 18. 07 58. 14 98. 59 98. 49 1. 2340. 90 18. 07 57. 77 97. 9740. 90 18. 07 59. 20 100. 393. 5 稳 定 性 试 验精 密 吸 取 样 品 B溶 液 2 L,分 别 放 置 1h, 4h, 8h, 12h后 进 样 ,测 定 二 十 八 烷 醇 组 分 峰 面 积 为 30257
16、13,3026916, 3023213, 30241. 1, 3028117, RSD = 01067% ( n = 5) , 二 十 六 烷 醇 组 分 峰 面 积 为 3872819,3850210, 3881214, 3886611, 3860117, RSD = 0. 39% ( n = 5). 表 明 样 品 在 12h内 基 本 稳 定 .4 讨 论 与 结 论(1) 二 种 不 同 样 品 (B, C) 中 二 十 八 烷 醇 、 二 十 六 烷 醇 含 量 的 变 化 表 明 :现 行 青 蒿 素 提 取 分 离 方 法 ,从原 料 中 提 取 青 蒿 素 的 过 程 ,同 时
17、 也 提 取 了 结 构 相 似 、 极 性 相 近 的 二 十 八 烷 醇 和 二 十 六 烷 醇 等 高 级 烷 醇 类 .青 蒿 素 的 含 量 由 2. 8% 到 98. 8% 的 纯 化 过 程 实 质 上 是 青 蒿 素 与 其 他 烷 醇 类 分 离 的 过 程 ,如 将 纯 化 青 蒿 素的 副 产 物 收 集 、 处 理 即 可 得 到 二 十 八 烷 醇 和 二 十 六 烷 醇 类 产 品 .(2) 二 十 八 烷 醇 和 二 十 六 烷 醇 在 CHC l3 中 的 溶 解 度 受 温 度 的 影 响 较 大 ,配 制 样 品 溶 液 不 易 过 浓 ,否 则浓 度 降
18、低 析 出 结 晶 ,导 致 定 量 误 差 5, 6 .(3) 二 种 样 品 的 来 源 均 为 本 实 验 室 提 取 青 蒿 素 不 同 阶 段 的 产 品 . 其 中 2. 8% 青 蒿 素 为 甲 醇 冷 提 后 石油 醚 萃 取 粗 提 物 的 浸 膏 , 98. 8% 青 蒿 素 为 精 制 后 的 产 品 .(4) 通 过 对 二 种 不 同 含 量 青 蒿 提 取 物 样 品 的 分 析 ,为 青 蒿 素 生 产 企 业 合 理 利 用 资 源 探 索 了 一 条 新 的途 径 ,并 建 立 了 在 该 体 系 中 二 十 八 烷 醇 和 二 十 六 烷 醇 的 定 量 方
19、 法 .参 考 文 献 : 1 屠 哟 哟 ,倪 慕 云 ,钟 裕 亮 ,等 . 中 药 青 蒿 化 学 成 分 研 究 I J . 药 学 学 报 , 1981, 16 (5) : 366 - 370. 2 雷 炳 福 . 二 十 八 烷 醇 的 应 用 与 制 备 J . 西 部 粮 油 科 技 , 2003, 28 (3) : 41 - 44. 3 矫 彩 山 ,王 兴 强 .从 米 糠 蜡 中 提 取 二 十 八 烷 醇 和 三 十 烷 醇 及 产 品 分 析 J . 化 学 工 程 师 , 2002, 4: 14 - 15. 4 王 兴 国 . 二 十 八 烷 醇 的 分 布 与 功
20、 能 J . 中 国 油 脂 , 1992, 27 (1) : 54 - 56. 5 陈 芳 ,闫 红 ,蔡 同 一 ,等 . 气 相 色 谱 法 测 定 糠 蜡 提 取 物 中 的 二 十 八 烷 醇 和 三 十 烷 醇 J . 食 品 科 学 , 2003, 24 (4) : 119 -121. 6 卢 洁 ,赵 文 报 ,藏 宁 ,等 . 天 然 高 级 烷 醇 混 合 物 的 气 相 色 谱 分 析 J . 分 析 检 测 , 2004, 20 (7) : 29 - 131.D eterm ina tion of octacosanol and hexacosanol in south
21、ernwoodextracts by ga s chroma tographyB IAN Q ingOquan, L IU J iaOqin, L I Song(Department of Chem istry, M ianyang Normal University, M ianyang 621000, China)Abstract: A gas chromatography method for the determ ination of octacosanal and hexacosanal in southernwood was developed,using cap illary c
22、olumn BD - 17 (30 m 530 m 1. 0 m) , F ID, vaporizer temperature 269 , p rogrammed temperature (155 - 2 m in - 10 /m in - 262 - 12 m in) , and carrier gas: N itrogen with high purity 42. 0 mL /m in, air 410. 0 mL /m in, hydro2gen 38. 0 mL /m in. Mean recoveries ( n = 5) were 100. 16% for octacosanol
23、and 98. 5% for hexacosanol. RSD s( n = 5) were 0.91% and 1. 23% , respectively. This method p roved to be suitable for the separation and determ ination of octacosanol and hexaco2sanol with good accuracy, sensitivity and rep roducibility.Key words: southernwood; octacosanol; hexacosanol; gas chromatography14第 22卷 第 2期 边 清 泉 ,等 :气 相 色 谱 法 测 定 青 蒿 提 取 物 中 二 十 八 烷 醇 和
