1、 地址:北京市昌平区沙河高教园北街家园 C4区2701 邮编:102206 传真:010-62617928-802 电话:400-650-7020 010-62617928 网址:http:/ 邮箱: 环氧活化偶联介质(Epoxy-activated QZT 6FF)产品说明书 1. 产品简介 Epoxy活化偶联介质可用于各种含有氨基、巯基或羟基的亲和配基(蛋白质、多 肽、糖等)的偶联,广泛十分广泛。Epoxy-activated QZT 6FF活化偶联介质以自制的 琼脂糖凝胶为基质,采用环氧活化的方法活化琼脂糖上的羟基,活化后即可直接用于 各种配基的偶联。Epoxy-activated QZ
2、T 6FF 活化偶联介质具有使用方便、偶联条件温 和、偶联效率高和应用范围广(偶联氨基、巯基和羟基)的特点。 2. 产品特性 环氧活化偶联介质的理化性质和产品特性如表 1所示。 表 1 环氧活化偶联介质的理化性质和产品特性 参数 指标 基质* 6%交联琼脂糖凝胶 活化基团 环氧基 形状 球形 介质平均粒径 90 m (50160) 活化基团密度 20-40 mol /ml wet gel 偶联条件 pH 9-13, 温度 20-40 o C, 时间5-24h, 可以在水相或者有机相中偶联 最高流速(25) 300 cm/h 推荐流速 150 cm/h 最高耐压 0.3 MPa (3 bar)
3、保存 长期(-20o C) ,短期(室温)*:除 6FF基质外,也可以提供 4B、4FF和 6B基质的环氧活化介质。 3. 应用 Epoxy 活化偶联介质广泛用于各种含有氨基、巯基或羟基的亲和配基(蛋白质、 多肽、糖等)的偶联。具体的操作步骤如下(以 10 ml 活化胶偶联 BSA为例) : 清洗:用 10-20倍胶体积的去离子水冲洗(大于 5次)保存于异丙醇中的环氧活 化胶,除去异丙醇,抽干,将 10ml(约 7.5 g)加入到 30 ml 的反应器(磨口三角瓶) 地址:北京市昌平区沙河高教园北街家园 C4区2701 邮编:102206 传真:010-62617928-802 电话:400-
4、650-7020 010-62617928 网址:http:/ 邮箱: 中,备用。 偶联:称取 100 mg BSA,溶解于 15 ml 0.1M 碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液(pH 10.5) , 加入到抽干的活化胶中,在摇床上振荡,37偶联 12-24h;反应完毕后将料液转移到 砂芯漏斗中抽干,收集料液用于未偶联 BSA 的分析和偶联配基密度的计算,活化胶 水洗后抽干。其他配基的偶联方法与 BSA 类似,但反应条件(pH、温度、时间、配 基加入量)需要根据配基的特性和应用的需求进行适当调整。若配基含有游离巯基, 可选用 0.1M 硼砂-硼酸缓冲液,pH8.6,通过巯基进行偶联。 (偶联注意事项:
5、偶联氨基可选用 pH 9-13的缓冲液,偶联巯基可选用 pH 8.6 的 缓冲液;避免使用可以和环氧基反应的含氨基的缓冲液,可选用磷酸盐、碳酸盐、硼 酸盐和氢氧化钠溶液;pH 越高、温度越高,偶联速度越高,时间越长,偶联反应越 彻底,但偶联条件的选择还要兼顾配基的稳定性) 封闭: 将 10ml 抽干的偶联 BSA 的胶加入到 100 ml 三角瓶中, 加入 30 ml 1 mol/L 乙醇胺溶液。反应温度恒定在 37 ,搅拌速度 120 rpm,反应时间 4h。反应停止后 将料液转移到砂芯漏斗中抽干,用去离子水清洗。 清洗:偶联 BSA 的介质依次用 5 倍的去离子水、0.1 M 含 0.5 M NaCl 的乙酸- 乙酸钠缓冲液 (pH 4.0) 、 去离子水、 0.1M 含 0.5 M NaCl 的硼酸-四硼酸钠缓冲液 (pH 8.0)和去离子水充分洗涤(重复清洗 2次),抽干,去除未反应的配基。 保存:保存于 4、20%乙醇溶液中。 4 特色服务 (1)提供介质筛选及工艺开发的咨询; (2)接受客户委托开发各种分离介质和分离工艺; (3)按客户要求提供各种介质及相应规格的预装柱; (4)为客户提供专业的售前和售后服务。