1、江西省上高县第二中学 2018 届高三上学期第四次月考理科综合生物试题一、选择题1. 以下判断细胞死活的方法及解释正确的是A. 用较高浓度的硝酸钾溶液处理洋葱外表皮细胞，一段时间后用显微镜未能观察到质壁分离现象，说明是死细胞B. 用健那绿处理人体蛔虫的体细胞，显微镜下没有发现被染成蓝绿色的线粒体，说明是死细胞C. 通过显微镜观察到黑藻的叶绿体在细胞质中运动，并随着照射光线的强弱而改变受光面，说明是活细胞D. 因为活细胞膜具有选择透过性，用甲基绿吡罗红未能将人口腔上皮细胞的细胞核染成红色说明是活细胞【答案】C【解析】植物细胞可以通过主动运输的方式吸收硝酸钾，用一定浓度的硝酸钾溶液处理洋葱外表皮细
2、胞，先发生质壁分离，随后自动复原，若 A用较高浓度的硝酸钾溶液处理洋葱外表皮细胞，一段时间后用显微镜未能观察到质壁分离现象，可能是已经完成了自动复原过程，A 错误；蛔虫寄生在体内，长期进化导致其失去线粒体，只能进行无氧呼吸，B 错误；生活状态的植物细胞内叶绿体随细胞质的流动而运动，C 正确；观察细胞内 DNA 与 RNA 的分布实验中，需用 8%的盐酸处理细胞后，才能有利于甲基绿吡罗红混合染色剂的染色，D 错误。【考点定位】观察植物细胞质壁分离及复原实验，高倍镜观察线粒体和叶绿体，观察细胞内DNA 与 RNA 的分布实验。【名师点睛】细胞死活的方法有：1）能观察到质壁分离或复原现象的植物细胞是
3、活细胞，2）活细胞内的叶绿体是随细胞质的流动而运动的，3）活细胞的线粒体可被健那绿染成绿色，4）活的动物细胞不能被台盼蓝染色剂染色，死细胞可以被染成蓝色，5）活细胞的细胞膜被荧光蛋白标记后，能显示其具有流动性。2. 在真核细胞中，下列物质都需要以 RNA 作为模板的是A. 性激素和淋巴因子 B. 胰岛素和细胞骨架C. 胰蛋白酶和 tRNA D. 神经递质和磷酯分子【答案】B【解析】以 RNA 作为模板，翻译的产物为蛋白质。性激素属于脂质，A 项错误；胰岛素和细胞骨架都是蛋白质，B 项正确；tRNA 是 DNA 转录形成的，不属于蛋白质，C 项错误；神经递质中的乙酰胆碱、多巴胺、5-羟色胺、氨基
4、酸类、一氧化氮等以及磷脂分子都不是蛋白质，D 项错误。【点睛】解答本题需抓住问题的实质：以 RNA 作为模板合成的物质是蛋白质，据此分析各选项的化学本质是否为蛋白质，进而作出正确的判断。3. 下表为人体从一个卵原细胞开始发生连续生理过程时细胞染色体组数变化及各阶段相关特点的描述。下列说法正确的是生理过程 甲 乙 丙 丁染色体组数 2121 12 242 ?相关描述 性激素作用 细胞膜功能体现 遗传信息不变功能趋向专门化A. 人类的超雄（47，XYY）综合征个体的形成与甲过程中同源染色体行为有关B. 甲过程和丙过程中都有着丝粒的分裂，但前者进行了两次后者进行了一次C. 乙过程体现了细胞识别功能，
5、丁过程 mRNA 不同决定细胞功能不同D. 丙过程的子细胞核中最多有 46 个 DNA 分子来自于卵原细胞【答案】C【解析】A人类的 47,XYY 综合征个体中的 2 个 Y 是由于减数第二次分裂过程中,姐妹染色单体分开后进入同一个细胞所致，与甲过程中同源染色体行为无关，A 错误；B甲过程为减数分裂、丙过程为有丝分裂，在减数第二次分裂的后期和有丝分裂的后期都进行了着丝粒的分裂，B 错误；C乙为受精作用，体现了细胞间的识别即细胞膜的能进行细胞间的信息交流的功能，丁为细胞分化，实质是基因的选择性表达，转录出不同的 mRNA，控制合成出不同蛋白质，决定细胞功能不同，C 正确；D丙过程为细胞的有丝分裂
6、，其子细胞核中最多有 46个 DNA 分子，其中来自于卵原细胞的 DNA 占一半，即 23 个，D 错误。【考点定位】减数分裂、受精作用、有丝分裂【名师点睛】做题的前提是要把图中甲乙丙丁过程理清：甲为在雌性激素的作用下，卵原细胞进行的减数分裂过程；乙为受精作用，体现了膜的流动性的结构特点及细胞膜的能进行细胞间的信息交流的功能；丙为细胞的有丝分裂，通过细胞分裂，可以把遗传信息从亲代传到子代；丁为细胞分化，实质是基因的选择性表达，形成了一些在形态、结构和生理功能上发生稳定性差异的细胞，细胞分化，使多细胞生物体中的细胞趋向专门化，有利于提高各种生理功能的效率。4. 等位基因（A、a）与（D、d）位于
7、同一对常染色体上，基因型为 AA 或 dd 的个体胚胎致死。两对等位基因功能互不影响，且在减数分裂过程不发生交叉互换。以基因型如下图果蝇为亲本，逐代自由交配，则后代中基因 A 的频率将A. 上升 B. 不变 C. 下降 D. 先升后降【答案】B【解析】试题分析：亲本产生配子为 1AD:1ad，自交第一代为 1AADD(致死):2AaDd：1aadd（致死） ，故第一代都是 AaDd，自交第二代也都是 AaDd，每一代都与亲代一样，故基因频率不变，B 正确。考点：本题考查基因频率相关知识，意在考查考生能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或
8、得出正确的结论能力。5. 果蝇是二倍体，红眼基因在其 X 染色体上。下面甲图为某红眼雄蝇一个精原细胞 A 经过两次正常有丝分裂产生四个子细胞（ala4）示意图；乙图为此果蝇体内一个精原细胞 B 经过正常减数分裂产生四个精细胞（blb4）示意图。在不考虑生物变异情况下，下列叙述正确的是A. 两图的过程与过程中细胞内均有一次核 DNA 复制B. 两图的过程中细胞内染色体数与核 DNA 数比值均有变化C. 两图的过程中细胞内均能发生同源染色体相互分离现象D. 甲图四个子细胞含红眼基因数不同，乙图四个精细胞含红眼基因数相同【答案】B【解析】乙图的过程 II 中细胞内没有进行核 DNA 复制，A 错误；
9、两图的过程 II 中细胞内均发生着丝点分裂，故染色体数与核 DNA 数的比值均有变化，B 正确；只有乙图的过程 I 中细胞内能发生同源染色体相互分离现象，C 错误；图甲中的四个子细胞是有丝分裂产生的，故所含红眼基因数相同，图乙中的四个精细胞是减数分裂产生的，且 X、Y 染色体上基因数不同，所含红眼基因数不完全相同，D 错误【考点定位】DNA 分子的复制；细胞的减数分裂【名师点睛】学生对减数分裂过程理解不清减数第一次分裂与减数第二次分裂的比较名称项目减数第一次分裂 减数第二次分裂DNA 复制 不复制着丝点 不分裂 分裂染色体 2nn，减半 n2nn，不减半DNA 数目 4n2n，减半 2nn，减
10、半染色体主要行为同源染色体联会、分离染色单体分开同源染色体 有 无6. 在小鼠的一个自然种群中，体色有黄色和灰色，尾巴有短尾和长尾，两对相对性状分别受位于两对常染色体上的两对等位基因控制。其中一对等位基因设为 A、a，另一对等位基因设为 B、b（具有显性纯合致死效应） 。任取一对黄色短尾鼠，让其多次交配，F 1的表现型为黄色短尾：黄色长尾：灰色短尾：灰色长尾=6: 3:2:1。以下说法错误的是A. 黄色短尾小鼠的基因型有两种B. 控制短尾的基因是 B，控制黄色的基因是 AC. 让 F1中黄色长尾雌雄鼠自由交配，F 2中不会出现短尾鼠D. 让 F1中黄色短尾雌鼠与灰色长尾雄鼠交配，F 2的表现型
11、之比为 1:1:1:1【答案】D【点睛】本题考查自由组合定律及应用，首先要求考生能够根据题干信息“任取一对黄色短尾鼠，让其多次交配，F 1的表现型为黄色短尾黄色长尾灰色短尾灰色长尾=6321” ，判断出显隐性关系，并判断出短尾显性纯合致死，再准确判断选项。二、非选择题7. 含酶牙膏可以分解食物残渣，使我们牙齿亮洁、口气清新。请回答下列有关酶的问题: 向 5 支盛有等量人胃蛋白酶溶液但 pH 各不相同的试管中，各加 1 块 1cm3的正方体凝固蛋白质，在 25室温条件下，记录各试管中蛋白块消失的时间，如下表：酶溶液的 pH 1 2 3 4 5蛋白块消失的时间（min） 13 9 11 45 60
12、（1）该实验的目的是_。分析表中所记录的时间，可得出结论：_。（2）请提供两种使实验在更短的时间内完成的方法，并说明理由。方法 1:_，理由:_。方法 2:_，理由:_。（3）如果要确认上述实验中蛋白块的消失是由于酶的作用而不是其他因素的作用，还应补充的对照实验是_。【答案】 (1). 探究 pH 对蛋白酶活性的影响 (2). pH 为 2 时胃蛋白酶活性较强，pH高于或低于 2 时胃蛋白酶的活性下降 (3). 适当提高温度 (4). 人胃蛋白酶的最适温度为 37左右，适当升高温度，酶活性增强 (5). 将蛋白块切碎 (6). 可增大底物与酶的接触面积，使反应加快 (7). 另取 5 支与实验
13、组相同的试管，将加热煮沸后的胃蛋白酶溶液分别加入每支试管中，其他操作同实验组【解析】 【试题分析】（1）根据题中实验设计可以看出，本实验的自变量为溶液的 pH，因此该实验的目的是探究pH 值对蛋白酶活性的影响；表中结果看出，在 pH 为 2 时，蛋白块消失的时间最短，因此可得出结论：pH 为 2 时胃蛋白酶活性较强，pH 高于或低于 2 时胃蛋白酶的活性下降。（2）缩短反应时间就需要提高酶促反应速率。方法一：可以适当提高温度，因为人胃蛋白酶的最适温度为 37左右，适当升高温度，可使酶活性增强；方法二：可以将蛋白块切碎以增大底物与酶的接触面积，使酶促反应加快。（3）要确认上述实验中蛋白块的消失是
14、由于酶的作用而不是其他因素的作用，还应补充设置每组实验的对照实验，即另取 5 支与实验组相同的试管，将加热煮沸后的胃蛋白酶（或不含胃蛋白酶）溶液分别加入每支试管中，其他操作同实验组。8. .在我国南方稻田种植紫云英已有悠久历史，利用上部 2/3 作饲料喂猪，下部 1/3 作绿肥，既养猪又肥田。研究紫云英的结构及生理过程有利于指导农业生产、提高粮食产量。请回答下列问题:（1）图甲为紫云英叶肉细胞中的生物膜及在其上所完成的一个生化反应，该生物膜是_，结构吸收的光能用于_。（2）图乙是在 C02浓度一定、温度 25、不同光照强度条件下测得的紫云英叶片光合速率。请据图分析:A 和 B 两点，植物叶肉细
15、胞产生 ATP 的共同场所是_；C 点时，该植物总光合速率为_mg/(100cm 2叶h）（用 CO2吸收量表示） 。.图甲是某同学“探究光照强度对水藻光合速率的影响”的实验装置图（灯亮度可调） ， 图乙曲线是将图甲中的试管密闭后，调节灯亮度的过程中，水面上方 C02相对含量的变化。试回答：（1）图甲装置中隔在灯与试管之间“盛水玻璃柱”的作用是_。 （2）假设图甲试管水中的 C02浓度始终不变，图乙中 D 点时，图甲的灯处于开启状态，判断依据是_，图乙中从 A 到 E 这段时间内水藻体内有机物含量会_（增多/减少/不变） 。（3）图乙中，若在 C 点突然增加光照，则在短时间内叶绿体内三碳化合物
16、含量将_。 （增多/减少/不变）【答案】 (1). 叶绿体类囊体薄膜 (2). 水的光解及 ATP 合成 (3). 细胞质基质和线粒体 (4). 20 (5). 吸收灯光的热量，避免光照对试管内水温的影响 (6). D点时光合作用等于呼吸作用 (7). 增多 (8). 减少【解析】 【试题分析】. 本题结合紫云英叶肉细胞中膜结构图解和曲线图，考查光合作用和呼吸作用、影响光合速率的环境因素的相关知识，要求考生识记光合作用和呼吸作用的具体过程，能准确判断图甲生物膜的名称；掌握影响光合速率的环境因素，能准确分析曲线图中点、线段的含义，再结合所学的知识答题。图甲生物膜上能发生水的光解反应，该反应发生在
17、光合作用的光反应阶段，场所是叶绿体类囊体膜；图中为光合色素，为磷脂分子。图乙是在 CO2浓度一定、温度 25、不同光照强度条件下测得的紫云英叶片光合速率，其中 A 点时，植物细胞只进行呼吸作用；AB 段，光合速率小于呼吸速率；B 点为光补偿点，此时光合速率等于呼吸速率；B 点之后，光合速率大于呼吸速率。可据此答题。. 本题结合图示主要考查光合作用的过程及影响光合作用的环境因素的相关知识。解答有关光合作用的坐标曲线时，要注意对“四点三趋势” （起点、折点、交点和终点以及升、平、降三种变化趋势）的生物学意义的分析，命题者常从这些特征性的地方作为命题的切入点。图乙中 AB 段和 DE 段表示光合速率
18、小于呼吸速率，密闭容器内的 CO2含量增加；B 和 D 点表示光合速率等于呼吸速率，为曲线的折点；BD 段表示光合速率大于呼吸速率，密闭容器中的CO2含量减少。.（1）图甲进行的是水的光解，因此是在叶绿体类囊体薄膜上的光合作用的光反应，其吸收的光能用于水的光解及 ATP 的合成。（2）图乙中 A 点只有细胞呼吸，B 点既有光合作用也有呼吸作用，所以 A 和 B 两点，植物叶肉细胞共同产生 ATP 的场所有细胞质基质和线粒体；C 点时净光合速率是 15 mg/100cm2叶h，呼吸速率是 5 mg/100cm2叶h，所以真光合速率是 15520 mg/100cm 2叶h。.（1）图甲装置中隔在灯
19、与试管之间“盛水玻璃柱”的作用是吸收灯光的热量，避免光照对试管内水温的影响。（2）图乙中 D 点时二氧化碳浓度达到平衡，此时光合作用等于呼吸作用，因此，图甲的灯处于开启状态；图乙中从 A 到 E 这段时间内，二氧化碳相对含量减少，被植物吸收用于光合作用合成有机物，因此水藻体内有机物含量会增多。（3）图乙中，若在 C 点突然增加光照，会导致光反应产生的H和 ATP 增多，促进三碳化合物的还原，而此时三碳化合物的产生量并没有同时增多，因此在短时间内叶绿体内三碳化合物含量将减少。9. 在一批野生正常翅果蝇中，出现了少数毛翅（H 位于常染色体）的显性突变个体。这些突变个体在培养过程中由于某种原因又恢复
20、为正常翅。这种突变成毛翅后又恢复为正常翅的个体称为回复体。回复体出现的原因有两种:一是 H 又突变为 h；二是体内另一对基因 RR 或 Rr突变为 rr，从而导致 H 基因无法表达。第一种情况下出现的回复体称为真回复体，第二种情况下出现的回复体称为假回复体。请分析回答下列问题：（1）表现为正常翅的假回复体的基因型可能是_。（2）现获得一批纯合的果蝇回复体，欲判断其基因型是 HHrr，还是 hhRR。现有三种基因型分别为 hhrr、HHRR，hhRR 的个体，请从中选择合适的个体进行杂交实验，写出实验思路，预测实验结果并得出结论。实验思路：让这批纯合的果蝇回复体与基因型为_的果蝇杂交，观察子代果
21、蝇的性状表现。预测实验结果并得出相应的结论：若子代果蝇_，则这批果蝇的基因型为 hhRR；若子代果蝇_，则这批果蝇的基因型为 HHrr。（3）实验结果表明，这批果蝇属于纯合的假回复体。欲判断这两对基因是位于同一对染色体上，还是位于不同对染色体上，用这些果蝇与基因型为_的果蝇进行杂交实验，预测子二代的表现型及比例，并得出结论:若_，则这两对基因位于不同对染色体上；若_则这两对基因位于同一对染色体上。【答案】 (1). HHrr、Hhrr (2). hhRR (3). 全为正常翅 (4). 全为毛翅 (5). hhRR (6). F2果蝇中毛翅与正常翅的比例为 9：7 (7). F 2果蝇中毛翅与
22、正常翅的比例不为 9：7【解析】 【试题分析】本题考查基因的自由组合规律的实质及应用相关知识点，意在考查学生分析题意、获取信息、实验设计及预测基因型和表现型的能力。根据题意分析可知，rr 抑制基因 H 的表达，因此只有在同时具备基因 R 和基因 H 时，果蝇才表现毛翅，其余情况下均为正常翅。果蝇的 9 种基因型中表现为正常翅的有 hhRr、hhrr、hhRR、HHrr、Hhrr，表现为毛翅的有HHRr、HHRR、HhRR、HhRr。欲判断一批纯合的果蝇回复体的基因型是 HHrr 还是 hhRR，在选择与其交配的果蝇时，应注意使两种交配情况下所产生的子代果蝇性状不相同，这样方可判断出这批纯合的果
23、蝇回复体的基因型。（1）由“R 基因的正常表达是 H 基因正常表达的前提”可知，表现为正常翅的“假回复体”的基因型可能是 HHrr、Hhrr。（2）欲判断这批纯合的果蝇回复体的基因型是 HHrr 还是 hhRR，需要让让这批纯合的果蝇回复体与基因型为 hhRR 的果蝇杂交（若与 HHRR 杂交，无论是 HHrr 还是 hhRR，后代均为毛翅；若与 hhrr 杂交，无论是 HHrr 还是 hhRR，后代均为正常翅，不能做出判断） ，观察子代果蝇的性状表现。预测实验结果并得出相应的结论：若子代果蝇全为正常翅，则这批果蝇的基因型为 hhRR；若子代果蝇全为毛翅，则这批果蝇的基因型为 HHrr。（3）
24、已知这批果蝇为“假回复体” ，即基因型为 HHrr，判断这两对基因是位于同一对染色体上，还是位于不同对染色体上，关键看杂交过程是否遵循基因的自由组合定律。若遵循基因的自由组合定律，则位于不同对染色体上；若不遵循基因的自由组合定律，则位于同一对染色体上。据此可将这些果蝇与基因型为 hhRR 的果蝇进行杂交实验，若 F2果蝇中毛翅与正常翅的比例为 97，则这两对基因位于不同对染色体上；若 F2果蝇中毛翅与正常翅的比例不为 97，则这两对基因位于同一对染色体上。10. 荠菜的果实形状有三角形和卵圆形两种，该性状的遗传涉及两对等位基因，分别用A、a 和 B、b 表示。为探究荠菜果实形状的遗传规律，进行
25、了杂交实验如下图。现有 3 包基因型分别为 AABB、AaBB 和 aaBB 的荠菜种子，由于标签丢失而无法区分。根据以上遗传规律，请设计实验方案确定每包种子的基因型。有已知性状（三角形果实和卵圆形果实）的荠菜种子可供选用。（1）实验步骤：_；_；_。（2）结果预测：.如果_，则包内种子基因型为 AABB；.如果_，则包内种子基因型为 AaBB；.如果_，则包内种子基因型为 aaBB。【答案】 (1). 用 3 包种子长成的植株分别与卵圆形果实种子长成的植株杂交，得 F1 (2). F1长成的植株自交得 F2 (3). F2长成植株后，按果实形状的表现型统计植株的比例 (4). F2三角形与卵
26、圆形果实植株的比例约为 15:1 (5). F2三角形与卵圆形果实植株的比例约为 27：5 (6). F 2三角形与卵圆形果实植株的比例约为 3：1【解析】 【试题分析】本题主要考查自由组合定律的应用及实验设计的有关知识，对题图的分析可作为解答此题的突破口。分析题图：三角形果实个体和卵圆形果实个体杂交，后代所结果实皆为三角形，则三角形为显性，F 2代中三角形果实卵圆形果实151，符合孟德尔两对相对性状杂交实验中双杂合子自交比例 9331 的变形（933）1，可知纯隐性（基因型为 aabb）为卵圆形，其余皆为三角形。据此答题。（1）图解中 F2果实的形状三角形和卵圆形比例为 30120151，且
27、涉及两对等位基因，由此可推知 F1的基因型为 AaBb，卵圆形果实为 aabb，则果实形状的遗传遵循基因的自由组合定律。3 包基因型分别为 AABB、AaBB 和 aaBB 的三角形果实的荠菜种子和卵圆形果实的种子（aabb） ，种植后杂交，其后代所结果实皆为三角形。然后再将得到的 F1植株进行自交，可根据 F2所有果实形状及比例进行推断，可据此进行实验设计。因此，实验步骤为：用 3 包种子长成的植株分别与卵圆形果实种子长成的植株杂交，得 F1；F 1长成的植株自交得 F2；F 2长成植株后，按果实形状的表现型统计植株的比例。（2）结果预测：（可用逆推法）. 若包内种子基因型为 AABB，与卵
28、圆形即 aabb 杂交结果即 F1为 AaBb，其自交后代中卵圆形即 aabb 占 1/16，所以 F2中三角形与卵圆形果实植株的比例约为 151；. 若包内种子基因型为 AaBB，与卵圆形即 aabb 杂交结果有 1/2AaBb 和 1/2aaBb，两者分别自交，1/2AaBb 的自交后代中卵圆形即 aabb 占 1/21/161/32,1/2aaBb 的自交后代中卵圆形即 aabb 占 1/21/41/8，所以它们的后代 F2中卵圆形果实植株 1/321/85/32，三角形果实植株占 15/3227/32，因此，F 2三角形与卵圆形果实植株的比例约为 275；. 若包内种子基因型为 aaB
29、B，与卵圆形即 aabb 杂交结果即 F1为 aaBb，其自交后代中卵圆形即 aabb 占 1/4，所以 F2三角形与卵圆形果实植株的比例约为 31。11. 以下是有关生物技术实践的几个问题，请回答：.某年我国某地由于柑橘大实蝇的危害，橘农遭受到了很大的损失，当地政府想尽一切办法帮助橘农尽量减少损失。有人想提取橘皮精油获取利润，一般提取橘皮精油的方法是_法，橘皮精油的提取之所以不采取水蒸气蒸馏法，是因为水中蒸馏会导致_等问题。.某同学在做微生物实验时，不小心把圆褐固氮菌样品和酵母菌样品放在一起，已知青霉素会影响固氮菌的生长繁殖，但不影响真菌的生长繁殖。请填空完成分离这两种菌的主要实验步骤： （
30、1）分别配置_的培养基和_的培养基，分别分成两份，依次标上A、a、B、b 备用；（2）分别向 A、B 培养基接种_；（3）把接种后的培养基放在恒温箱中 3d4d；（4）从培养基上生长的菌落中挑取生长良好的菌株，分别接种到_中；（5）_。（6）A、B 两培养基筛选出的微生物依次为_。【答案】 (1). 压榨 (2). 原料焦糊和有效成分水解 (3). 无氮源（或不含氮和青霉素） (4). 加青霉素和氮源 (5). 混有两种菌的样品 (6). a、b 培养基 (7). 把接种后的培养基放在恒温箱中 3d4d (8). 圆褐固氮菌和酵母菌【解析】 【试题分析】本题考查植物有效成分的提取微生物的培养和
31、分离的相关知识。解答本题的关键是根据不同微生物的特点选择恰当的培养基。圆褐固氮菌是自生固氮菌能够自主固氮，酵母菌不能自主固氮；又圆褐固氮菌是原核生物细菌，酵母菌是真核生物，可利用青霉素能杀菌，而对真核细胞生长无影响，可利用这些特点来分离圆褐固氮菌和酵母菌。. 由于橘皮精油的有效成分在用水蒸气蒸馏时会发生部分水解，使用水中蒸馏法又会产生原料焦糊的问题，故一般采用压榨法提取橘皮精油；橘皮精油的提取之所以不采取水蒸气蒸馏法，是因为水中蒸馏会导致原料焦糊和有效成分水解等问题。. （1）将微生物进行分离一般采用选择培养基。选择培养基是在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微
32、生物的生长。圆褐固氮菌是自生固氮菌，能在无氮培养基上生长繁殖，而酵母菌则不能；青霉素不影响酵母菌等真菌的生长繁殖，而会抑制圆褐固氮菌的生长繁殖。根据这一原理可将两种微生物分离开来。所以分别配置无氮源（或不含氮和青霉素）的培养基和加青霉素（或加青霉素和氮源）的培养基，分别分成两份，依次标上 A、a、B、b 备用。（2）分别向 A、B 培养基接种混有两种茵的样品。（4）为了进一步进行提纯，从 A、B 培养基上生长的菌落中挑取生长良好的菌株，分别接种到 a、b 培养基中。（5）把接种后的培养基放在恒温箱中 3d-4d。（6）根据前面分析和实验步骤可知，A、B 两培养基筛选出的微生物依次为圆褐固氮菌和酵母菌。
