1、环境科学专业毕业论文 精品论文 杂色鲍(Haliotis diversicolor)异物代谢酶对苯并a芘暴露和细菌感染的应答特性研究关键词：杂色鲍 细菌感染 免疫调节 异物代谢酶摘要：杂色鲍(Haliotis diversicolor)属软体动物门，腹足纲，前鳃亚纲，原始腹足目，鲍科，是我国南方鲍种，因其生长迅速，经济价值高，在南海海域得到广泛养殖。但长期以来遭受疾病困扰，致使鲍鱼养殖业经常遭受重大损失，而迄今尚无有效的免疫防治措施。为探索鲍的免疫相关机制，本实验室前期利用 SSH技术，构建了细菌攻毒杂色鲍血淋巴细胞 SSH cDNA文库，发现细菌感染下杂色鲍血淋巴细胞中细胞色素 P450(C
2、YP7A1)与谷胱甘肽硫转移酶(abGSTsigma)基因上调表达，推测在鲍体内 CYP7A1与 abGSTsigma不仅参与异源物质的代谢过程，也可能参与机体的免疫应答过程。本研究拟在此基础上，对杂色鲍分别进行 BaP暴露与细菌攻毒，观察在两个不同刺激过程中 CYP7A1与 abGSTsigma基因分别在杂色鲍体内的诱导表达情况，从而对 CYP7A1与abGSTsigma是否参与异源物质的代谢以及可能的免疫应答过程做出分析。取得的主要研究成果如下。 1，利用 RACE技术克隆了杂色鲍 CYP7A1与abGSTsigma cDNA全长序列：CYP7A1 cDNA 序列(GeneBank 登录号
3、为 EF587282)全长 2185bp，包含一个 1494bp的开放阅读框，编码 498个氨基酸，其理论分子量为 57557.0Da，等电点为 6.56。abGSTsigma cDNA 序列全长1328bp(GeneBank登录号为 EF546619)。包含有一个 624bp ORF，编码 208个氨基酸，其理论分子量为 23.67KDa，等电点为 5.67。 2， CYP7A1 与abGSTsigma mRNA在健康杂色鲍的存在情况：利用 Real-time PCR技术检测了CYP7A1与 abGSTsigma在健康杂色鲍体内的不同组织器官(鳃、血淋巴细胞、消化腺、外套膜、腹足、上足、性腺
4、、肾、粘液腺)中的转录表达情况，结果表明abGSTsigma、CYP7A1 基因均广泛的在各种组织中表达。其中外套膜，鳃等表达量较高，腹足，消化腺和次之，血淋巴细胞表达量最低。 3，在 BaP暴露条件下 CYP7A1与 abGSTsigma两种基因在杂色鲍不同组织中的表达变化：在 BaP诱导下 abGSTsigma在消化腺、鳃、外套膜、血淋巴细胞 4个组织中均上调表达，酶活性也有提高。而 CYP7A1则仅在血淋巴细胞中有上调表达，在外套膜、消化腺、鳃中无上调表达。 4，在细菌攻毒条件下 CYP7A1与 abGSTsigma两种基因在杂色鲍不同组织中的表达变化：abGSTsigma 在被检测的
5、4个组织中均显著上调表达，酶活性也有提高。而 CYP7A1则仅在血淋巴细胞中有上调表达，在消化腺、鳃中无上调表达。 5，研究结果表明 abGSTsigma可能参与了免疫应答过程：abGSTsigma 基因在细菌感染和 BaP暴露下都在不同组织中显著表达，表明杂色鲍 abGSTsigma基因可能参与鲍体内异源物质代谢与免疫应答两个过程。而 CYP7A1基因仅在血淋巴细胞中表达，推测在杂色鲍体内，CYP7A1 可能与免疫应答过程相关，而与异源物质代谢相关性较小。正文内容杂色鲍(Haliotis diversicolor)属软体动物门，腹足纲，前鳃亚纲，原始腹足目，鲍科，是我国南方鲍种，因其生长迅速
6、，经济价值高，在南海海域得到广泛养殖。但长期以来遭受疾病困扰，致使鲍鱼养殖业经常遭受重大损失，而迄今尚无有效的免疫防治措施。为探索鲍的免疫相关机制，本实验室前期利用 SSH技术，构建了细菌攻毒杂色鲍血淋巴细胞 SSH cDNA文库，发现细菌感染下杂色鲍血淋巴细胞中细胞色素 P450(CYP7A1)与谷胱甘肽硫转移酶(abGSTsigma)基因上调表达，推测在鲍体内 CYP7A1与 abGSTsigma不仅参与异源物质的代谢过程，也可能参与机体的免疫应答过程。本研究拟在此基础上，对杂色鲍分别进行 BaP暴露与细菌攻毒，观察在两个不同刺激过程中 CYP7A1与 abGSTsigma基因分别在杂色鲍
7、体内的诱导表达情况，从而对 CYP7A1与abGSTsigma是否参与异源物质的代谢以及可能的免疫应答过程做出分析。取得的主要研究成果如下。 1，利用 RACE技术克隆了杂色鲍 CYP7A1与abGSTsigma cDNA全长序列：CYP7A1 cDNA 序列(GeneBank 登录号为 EF587282)全长 2185bp，包含一个 1494bp的开放阅读框，编码 498个氨基酸，其理论分子量为 57557.0Da，等电点为 6.56。abGSTsigma cDNA 序列全长1328bp(GeneBank登录号为 EF546619)。包含有一个 624bp ORF，编码 208个氨基酸，其理
8、论分子量为 23.67KDa，等电点为 5.67。 2， CYP7A1 与abGSTsigma mRNA在健康杂色鲍的存在情况：利用 Real-time PCR技术检测了CYP7A1与 abGSTsigma在健康杂色鲍体内的不同组织器官(鳃、血淋巴细胞、消化腺、外套膜、腹足、上足、性腺、肾、粘液腺)中的转录表达情况，结果表明abGSTsigma、CYP7A1 基因均广泛的在各种组织中表达。其中外套膜，鳃等表达量较高，腹足，消化腺和次之，血淋巴细胞表达量最低。 3，在 BaP暴露条件下 CYP7A1与 abGSTsigma两种基因在杂色鲍不同组织中的表达变化：在 BaP诱导下 abGSTsigm
9、a在消化腺、鳃、外套膜、血淋巴细胞 4个组织中均上调表达，酶活性也有提高。而 CYP7A1则仅在血淋巴细胞中有上调表达，在外套膜、消化腺、鳃中无上调表达。 4，在细菌攻毒条件下 CYP7A1与 abGSTsigma两种基因在杂色鲍不同组织中的表达变化：abGSTsigma 在被检测的 4个组织中均显著上调表达，酶活性也有提高。而 CYP7A1则仅在血淋巴细胞中有上调表达，在消化腺、鳃中无上调表达。 5，研究结果表明 abGSTsigma可能参与了免疫应答过程：abGSTsigma 基因在细菌感染和 BaP暴露下都在不同组织中显著表达，表明杂色鲍 abGSTsigma基因可能参与鲍体内异源物质代
10、谢与免疫应答两个过程。而 CYP7A1基因仅在血淋巴细胞中表达，推测在杂色鲍体内，CYP7A1 可能与免疫应答过程相关，而与异源物质代谢相关性较小。杂色鲍(Haliotis diversicolor)属软体动物门，腹足纲，前鳃亚纲，原始腹足目，鲍科，是我国南方鲍种，因其生长迅速，经济价值高，在南海海域得到广泛养殖。但长期以来遭受疾病困扰，致使鲍鱼养殖业经常遭受重大损失，而迄今尚无有效的免疫防治措施。为探索鲍的免疫相关机制，本实验室前期利用SSH技术，构建了细菌攻毒杂色鲍血淋巴细胞 SSH cDNA文库，发现细菌感染下杂色鲍血淋巴细胞中细胞色素 P450(CYP7A1)与谷胱甘肽硫转移酶(abG
11、STsigma)基因上调表达，推测在鲍体内 CYP7A1与 abGSTsigma不仅参与异源物质的代谢过程，也可能参与机体的免疫应答过程。本研究拟在此基础上，对杂色鲍分别进行 BaP暴露与细菌攻毒，观察在两个不同刺激过程中 CYP7A1与 abGSTsigma基因分别在杂色鲍体内的诱导表达情况，从而对 CYP7A1与 abGSTsigma是否参与异源物质的代谢以及可能的免疫应答过程做出分析。取得的主要研究成果如下。 1，利用 RACE技术克隆了杂色鲍 CYP7A1与 abGSTsigma cDNA全长序列：CYP7A1 cDNA序列(GeneBank 登录号为 EF587282)全长 2185
12、bp，包含一个1494bp的开放阅读框，编码 498个氨基酸，其理论分子量为 57557.0Da，等电点为 6.56。abGSTsigma cDNA 序列全长 1328bp(GeneBank登录号为 EF546619)。包含有一个 624bp ORF，编码 208个氨基酸，其理论分子量为 23.67KDa，等电点为 5.67。 2， CYP7A1 与 abGSTsigma mRNA在健康杂色鲍的存在情况：利用 Real-time PCR技术检测了 CYP7A1与 abGSTsigma在健康杂色鲍体内的不同组织器官(鳃、血淋巴细胞、消化腺、外套膜、腹足、上足、性腺、肾、粘液腺)中的转录表达情况，
13、结果表明 abGSTsigma、CYP7A1 基因均广泛的在各种组织中表达。其中外套膜，鳃等表达量较高，腹足，消化腺和次之，血淋巴细胞表达量最低。 3，在 BaP暴露条件下 CYP7A1与 abGSTsigma两种基因在杂色鲍不同组织中的表达变化：在 BaP诱导下 abGSTsigma在消化腺、鳃、外套膜、血淋巴细胞 4个组织中均上调表达，酶活性也有提高。而 CYP7A1则仅在血淋巴细胞中有上调表达，在外套膜、消化腺、鳃中无上调表达。 4，在细菌攻毒条件下CYP7A1与 abGSTsigma两种基因在杂色鲍不同组织中的表达变化：abGSTsigma在被检测的 4个组织中均显著上调表达，酶活性也
14、有提高。而 CYP7A1则仅在血淋巴细胞中有上调表达，在消化腺、鳃中无上调表达。 5，研究结果表明abGSTsigma可能参与了免疫应答过程：abGSTsigma 基因在细菌感染和 BaP暴露下都在不同组织中显著表达，表明杂色鲍 abGSTsigma基因可能参与鲍体内异源物质代谢与免疫应答两个过程。而 CYP7A1基因仅在血淋巴细胞中表达，推测在杂色鲍体内，CYP7A1 可能与免疫应答过程相关，而与异源物质代谢相关性较小。杂色鲍(Haliotis diversicolor)属软体动物门，腹足纲，前鳃亚纲，原始腹足目，鲍科，是我国南方鲍种，因其生长迅速，经济价值高，在南海海域得到广泛养殖。但长期
15、以来遭受疾病困扰，致使鲍鱼养殖业经常遭受重大损失，而迄今尚无有效的免疫防治措施。为探索鲍的免疫相关机制，本实验室前期利用SSH技术，构建了细菌攻毒杂色鲍血淋巴细胞 SSH cDNA文库，发现细菌感染下杂色鲍血淋巴细胞中细胞色素 P450(CYP7A1)与谷胱甘肽硫转移酶(abGSTsigma)基因上调表达，推测在鲍体内 CYP7A1与 abGSTsigma不仅参与异源物质的代谢过程，也可能参与机体的免疫应答过程。本研究拟在此基础上，对杂色鲍分别进行 BaP暴露与细菌攻毒，观察在两个不同刺激过程中 CYP7A1与 abGSTsigma基因分别在杂色鲍体内的诱导表达情况，从而对 CYP7A1与 a
16、bGSTsigma是否参与异源物质的代谢以及可能的免疫应答过程做出分析。取得的主要研究成果如下。 1，利用 RACE技术克隆了杂色鲍 CYP7A1与 abGSTsigma cDNA全长序列：CYP7A1 cDNA序列(GeneBank 登录号为 EF587282)全长 2185bp，包含一个1494bp的开放阅读框，编码 498个氨基酸，其理论分子量为 57557.0Da，等电点为 6.56。abGSTsigma cDNA 序列全长 1328bp(GeneBank登录号为 EF546619)。包含有一个 624bp ORF，编码 208个氨基酸，其理论分子量为 23.67KDa，等电点为 5.
17、67。 2， CYP7A1 与 abGSTsigma mRNA在健康杂色鲍的存在情况：利用 Real-time PCR技术检测了 CYP7A1与 abGSTsigma在健康杂色鲍体内的不同组织器官(鳃、血淋巴细胞、消化腺、外套膜、腹足、上足、性腺、肾、粘液腺)中的转录表达情况，结果表明 abGSTsigma、CYP7A1 基因均广泛的在各种组织中表达。其中外套膜，鳃等表达量较高，腹足，消化腺和次之，血淋巴细胞表达量最低。 3，在 BaP暴露条件下 CYP7A1与 abGSTsigma两种基因在杂色鲍不同组织中的表达变化：在 BaP诱导下 abGSTsigma在消化腺、鳃、外套膜、血淋巴细胞 4
18、个组织中均上调表达，酶活性也有提高。而 CYP7A1则仅在血淋巴细胞中有上调表达，在外套膜、消化腺、鳃中无上调表达。 4，在细菌攻毒条件下CYP7A1与 abGSTsigma两种基因在杂色鲍不同组织中的表达变化：abGSTsigma在被检测的 4个组织中均显著上调表达，酶活性也有提高。而 CYP7A1则仅在血淋巴细胞中有上调表达，在消化腺、鳃中无上调表达。 5，研究结果表明abGSTsigma可能参与了免疫应答过程：abGSTsigma 基因在细菌感染和 BaP暴露下都在不同组织中显著表达，表明杂色鲍 abGSTsigma基因可能参与鲍体内异源物质代谢与免疫应答两个过程。而 CYP7A1基因仅
19、在血淋巴细胞中表达，推测在杂色鲍体内，CYP7A1 可能与免疫应答过程相关，而与异源物质代谢相关性较小。杂色鲍(Haliotis diversicolor)属软体动物门，腹足纲，前鳃亚纲，原始腹足目，鲍科，是我国南方鲍种，因其生长迅速，经济价值高，在南海海域得到广泛养殖。但长期以来遭受疾病困扰，致使鲍鱼养殖业经常遭受重大损失，而迄今尚无有效的免疫防治措施。为探索鲍的免疫相关机制，本实验室前期利用SSH技术，构建了细菌攻毒杂色鲍血淋巴细胞 SSH cDNA文库，发现细菌感染下杂色鲍血淋巴细胞中细胞色素 P450(CYP7A1)与谷胱甘肽硫转移酶(abGSTsigma)基因上调表达，推测在鲍体内
20、CYP7A1与 abGSTsigma不仅参与异源物质的代谢过程，也可能参与机体的免疫应答过程。本研究拟在此基础上，对杂色鲍分别进行 BaP暴露与细菌攻毒，观察在两个不同刺激过程中 CYP7A1与 abGSTsigma基因分别在杂色鲍体内的诱导表达情况，从而对 CYP7A1与 abGSTsigma是否参与异源物质的代谢以及可能的免疫应答过程做出分析。取得的主要研究成果如下。 1，利用 RACE技术克隆了杂色鲍 CYP7A1与 abGSTsigma cDNA全长序列：CYP7A1 cDNA序列(GeneBank 登录号为 EF587282)全长 2185bp，包含一个1494bp的开放阅读框，编码
21、 498个氨基酸，其理论分子量为 57557.0Da，等电点为 6.56。abGSTsigma cDNA 序列全长 1328bp(GeneBank登录号为 EF546619)。包含有一个 624bp ORF，编码 208个氨基酸，其理论分子量为 23.67KDa，等电点为 5.67。 2， CYP7A1 与 abGSTsigma mRNA在健康杂色鲍的存在情况：利用 Real-time PCR技术检测了 CYP7A1与 abGSTsigma在健康杂色鲍体内的不同组织器官(鳃、血淋巴细胞、消化腺、外套膜、腹足、上足、性腺、肾、粘液腺)中的转录表达情况，结果表明 abGSTsigma、CYP7A1
22、 基因均广泛的在各种组织中表达。其中外套膜，鳃等表达量较高，腹足，消化腺和次之，血淋巴细胞表达量最低。 3，在 BaP暴露条件下 CYP7A1与 abGSTsigma两种基因在杂色鲍不同组织中的表达变化：在 BaP诱导下 abGSTsigma在消化腺、鳃、外套膜、血淋巴细胞 4个组织中均上调表达，酶活性也有提高。而 CYP7A1则仅在血淋巴细胞中有上调表达，在外套膜、消化腺、鳃中无上调表达。 4，在细菌攻毒条件下CYP7A1与 abGSTsigma两种基因在杂色鲍不同组织中的表达变化：abGSTsigma在被检测的 4个组织中均显著上调表达，酶活性也有提高。而 CYP7A1则仅在血淋巴细胞中有
23、上调表达，在消化腺、鳃中无上调表达。 5，研究结果表明abGSTsigma可能参与了免疫应答过程：abGSTsigma 基因在细菌感染和 BaP暴露下都在不同组织中显著表达，表明杂色鲍 abGSTsigma基因可能参与鲍体内异源物质代谢与免疫应答两个过程。而 CYP7A1基因仅在血淋巴细胞中表达，推测在杂色鲍体内，CYP7A1 可能与免疫应答过程相关，而与异源物质代谢相关性较小。杂色鲍(Haliotis diversicolor)属软体动物门，腹足纲，前鳃亚纲，原始腹足目，鲍科，是我国南方鲍种，因其生长迅速，经济价值高，在南海海域得到广泛养殖。但长期以来遭受疾病困扰，致使鲍鱼养殖业经常遭受重大
24、损失，而迄今尚无有效的免疫防治措施。为探索鲍的免疫相关机制，本实验室前期利用SSH技术，构建了细菌攻毒杂色鲍血淋巴细胞 SSH cDNA文库，发现细菌感染下杂色鲍血淋巴细胞中细胞色素 P450(CYP7A1)与谷胱甘肽硫转移酶(abGSTsigma)基因上调表达，推测在鲍体内 CYP7A1与 abGSTsigma不仅参与异源物质的代谢过程，也可能参与机体的免疫应答过程。本研究拟在此基础上，对杂色鲍分别进行 BaP暴露与细菌攻毒，观察在两个不同刺激过程中 CYP7A1与 abGSTsigma基因分别在杂色鲍体内的诱导表达情况，从而对 CYP7A1与 abGSTsigma是否参与异源物质的代谢以及
25、可能的免疫应答过程做出分析。取得的主要研究成果如下。 1，利用 RACE技术克隆了杂色鲍 CYP7A1与 abGSTsigma cDNA全长序列：CYP7A1 cDNA序列(GeneBank 登录号为 EF587282)全长 2185bp，包含一个1494bp的开放阅读框，编码 498个氨基酸，其理论分子量为 57557.0Da，等电点为 6.56。abGSTsigma cDNA 序列全长 1328bp(GeneBank登录号为 EF546619)。包含有一个 624bp ORF，编码 208个氨基酸，其理论分子量为 23.67KDa，等电点为 5.67。 2， CYP7A1 与 abGSTs
26、igma mRNA在健康杂色鲍的存在情况：利用 Real-time PCR技术检测了 CYP7A1与 abGSTsigma在健康杂色鲍体内的不同组织器官(鳃、血淋巴细胞、消化腺、外套膜、腹足、上足、性腺、肾、粘液腺)中的转录表达情况，结果表明 abGSTsigma、CYP7A1 基因均广泛的在各种组织中表达。其中外套膜，鳃等表达量较高，腹足，消化腺和次之，血淋巴细胞表达量最低。 3，在 BaP暴露条件下 CYP7A1与 abGSTsigma两种基因在杂色鲍不同组织中的表达变化：在 BaP诱导下 abGSTsigma在消化腺、鳃、外套膜、血淋巴细胞 4个组织中均上调表达，酶活性也有提高。而 CY
27、P7A1则仅在血淋巴细胞中有上调表达，在外套膜、消化腺、鳃中无上调表达。 4，在细菌攻毒条件下CYP7A1与 abGSTsigma两种基因在杂色鲍不同组织中的表达变化：abGSTsigma在被检测的 4个组织中均显著上调表达，酶活性也有提高。而 CYP7A1则仅在血淋巴细胞中有上调表达，在消化腺、鳃中无上调表达。 5，研究结果表明abGSTsigma可能参与了免疫应答过程：abGSTsigma 基因在细菌感染和 BaP暴露下都在不同组织中显著表达，表明杂色鲍 abGSTsigma基因可能参与鲍体内异源物质代谢与免疫应答两个过程。而 CYP7A1基因仅在血淋巴细胞中表达，推测在杂色鲍体内，CYP
28、7A1 可能与免疫应答过程相关，而与异源物质代谢相关性较小。杂色鲍(Haliotis diversicolor)属软体动物门，腹足纲，前鳃亚纲，原始腹足目，鲍科，是我国南方鲍种，因其生长迅速，经济价值高，在南海海域得到广泛养殖。但长期以来遭受疾病困扰，致使鲍鱼养殖业经常遭受重大损失，而迄今尚无有效的免疫防治措施。为探索鲍的免疫相关机制，本实验室前期利用SSH技术，构建了细菌攻毒杂色鲍血淋巴细胞 SSH cDNA文库，发现细菌感染下杂色鲍血淋巴细胞中细胞色素 P450(CYP7A1)与谷胱甘肽硫转移酶(abGSTsigma)基因上调表达，推测在鲍体内 CYP7A1与 abGSTsigma不仅参与
29、异源物质的代谢过程，也可能参与机体的免疫应答过程。本研究拟在此基础上，对杂色鲍分别进行 BaP暴露与细菌攻毒，观察在两个不同刺激过程中 CYP7A1与 abGSTsigma基因分别在杂色鲍体内的诱导表达情况，从而对 CYP7A1与 abGSTsigma是否参与异源物质的代谢以及可能的免疫应答过程做出分析。取得的主要研究成果如下。 1，利用 RACE技术克隆了杂色鲍 CYP7A1与 abGSTsigma cDNA全长序列：CYP7A1 cDNA序列(GeneBank 登录号为 EF587282)全长 2185bp，包含一个1494bp的开放阅读框，编码 498个氨基酸，其理论分子量为 57557
30、.0Da，等电点为 6.56。abGSTsigma cDNA 序列全长 1328bp(GeneBank登录号为 EF546619)。包含有一个 624bp ORF，编码 208个氨基酸，其理论分子量为 23.67KDa，等电点为 5.67。 2， CYP7A1 与 abGSTsigma mRNA在健康杂色鲍的存在情况：利用 Real-time PCR技术检测了 CYP7A1与 abGSTsigma在健康杂色鲍体内的不同组织器官(鳃、血淋巴细胞、消化腺、外套膜、腹足、上足、性腺、肾、粘液腺)中的转录表达情况，结果表明 abGSTsigma、CYP7A1 基因均广泛的在各种组织中表达。其中外套膜，
31、鳃等表达量较高，腹足，消化腺和次之，血淋巴细胞表达量最低。 3，在 BaP暴露条件下 CYP7A1与 abGSTsigma两种基因在杂色鲍不同组织中的表达变化：在 BaP诱导下 abGSTsigma在消化腺、鳃、外套膜、血淋巴细胞 4个组织中均上调表达，酶活性也有提高。而 CYP7A1则仅在血淋巴细胞中有上调表达，在外套膜、消化腺、鳃中无上调表达。 4，在细菌攻毒条件下CYP7A1与 abGSTsigma两种基因在杂色鲍不同组织中的表达变化：abGSTsigma在被检测的 4个组织中均显著上调表达，酶活性也有提高。而 CYP7A1则仅在血淋巴细胞中有上调表达，在消化腺、鳃中无上调表达。 5，研
32、究结果表明abGSTsigma可能参与了免疫应答过程：abGSTsigma 基因在细菌感染和 BaP暴露下都在不同组织中显著表达，表明杂色鲍 abGSTsigma基因可能参与鲍体内异源物质代谢与免疫应答两个过程。而 CYP7A1基因仅在血淋巴细胞中表达，推测在杂色鲍体内，CYP7A1 可能与免疫应答过程相关，而与异源物质代谢相关性较小。杂色鲍(Haliotis diversicolor)属软体动物门，腹足纲，前鳃亚纲，原始腹足目，鲍科，是我国南方鲍种，因其生长迅速，经济价值高，在南海海域得到广泛养殖。但长期以来遭受疾病困扰，致使鲍鱼养殖业经常遭受重大损失，而迄今尚无有效的免疫防治措施。为探索鲍
33、的免疫相关机制，本实验室前期利用SSH技术，构建了细菌攻毒杂色鲍血淋巴细胞 SSH cDNA文库，发现细菌感染下杂色鲍血淋巴细胞中细胞色素 P450(CYP7A1)与谷胱甘肽硫转移酶(abGSTsigma)基因上调表达，推测在鲍体内 CYP7A1与 abGSTsigma不仅参与异源物质的代谢过程，也可能参与机体的免疫应答过程。本研究拟在此基础上，对杂色鲍分别进行 BaP暴露与细菌攻毒，观察在两个不同刺激过程中 CYP7A1与 abGSTsigma基因分别在杂色鲍体内的诱导表达情况，从而对 CYP7A1与 abGSTsigma是否参与异源物质的代谢以及可能的免疫应答过程做出分析。取得的主要研究成
34、果如下。 1，利用 RACE技术克隆了杂色鲍 CYP7A1与 abGSTsigma cDNA全长序列：CYP7A1 cDNA序列(GeneBank 登录号为 EF587282)全长 2185bp，包含一个1494bp的开放阅读框，编码 498个氨基酸，其理论分子量为 57557.0Da，等电点为 6.56。abGSTsigma cDNA 序列全长 1328bp(GeneBank登录号为 EF546619)。包含有一个 624bp ORF，编码 208个氨基酸，其理论分子量为 23.67KDa，等电点为 5.67。 2， CYP7A1 与 abGSTsigma mRNA在健康杂色鲍的存在情况：利
35、用 Real-time PCR技术检测了 CYP7A1与 abGSTsigma在健康杂色鲍体内的不同组织器官(鳃、血淋巴细胞、消化腺、外套膜、腹足、上足、性腺、肾、粘液腺)中的转录表达情况，结果表明 abGSTsigma、CYP7A1 基因均广泛的在各种组织中表达。其中外套膜，鳃等表达量较高，腹足，消化腺和次之，血淋巴细胞表达量最低。 3，在 BaP暴露条件下 CYP7A1与 abGSTsigma两种基因在杂色鲍不同组织中的表达变化：在 BaP诱导下 abGSTsigma在消化腺、鳃、外套膜、血淋巴细胞 4个组织中均上调表达，酶活性也有提高。而 CYP7A1则仅在血淋巴细胞中有上调表达，在外套
36、膜、消化腺、鳃中无上调表达。 4，在细菌攻毒条件下CYP7A1与 abGSTsigma两种基因在杂色鲍不同组织中的表达变化：abGSTsigma在被检测的 4个组织中均显著上调表达，酶活性也有提高。而 CYP7A1则仅在血淋巴细胞中有上调表达，在消化腺、鳃中无上调表达。 5，研究结果表明abGSTsigma可能参与了免疫应答过程：abGSTsigma 基因在细菌感染和 BaP暴露下都在不同组织中显著表达，表明杂色鲍 abGSTsigma基因可能参与鲍体内异源物质代谢与免疫应答两个过程。而 CYP7A1基因仅在血淋巴细胞中表达，推测在杂色鲍体内，CYP7A1 可能与免疫应答过程相关，而与异源物质
37、代谢相关性较小。杂色鲍(Haliotis diversicolor)属软体动物门，腹足纲，前鳃亚纲，原始腹足目，鲍科，是我国南方鲍种，因其生长迅速，经济价值高，在南海海域得到广泛养殖。但长期以来遭受疾病困扰，致使鲍鱼养殖业经常遭受重大损失，而迄今尚无有效的免疫防治措施。为探索鲍的免疫相关机制，本实验室前期利用SSH技术，构建了细菌攻毒杂色鲍血淋巴细胞 SSH cDNA文库，发现细菌感染下杂色鲍血淋巴细胞中细胞色素 P450(CYP7A1)与谷胱甘肽硫转移酶(abGSTsigma)基因上调表达，推测在鲍体内 CYP7A1与 abGSTsigma不仅参与异源物质的代谢过程，也可能参与机体的免疫应答
38、过程。本研究拟在此基础上，对杂色鲍分别进行 BaP暴露与细菌攻毒，观察在两个不同刺激过程中 CYP7A1与 abGSTsigma基因分别在杂色鲍体内的诱导表达情况，从而对 CYP7A1与 abGSTsigma是否参与异源物质的代谢以及可能的免疫应答过程做出分析。取得的主要研究成果如下。 1，利用 RACE技术克隆了杂色鲍 CYP7A1与 abGSTsigma cDNA全长序列：CYP7A1 cDNA序列(GeneBank 登录号为 EF587282)全长 2185bp，包含一个1494bp的开放阅读框，编码 498个氨基酸，其理论分子量为 57557.0Da，等电点为 6.56。abGSTsi
39、gma cDNA 序列全长 1328bp(GeneBank登录号为 EF546619)。包含有一个 624bp ORF，编码 208个氨基酸，其理论分子量为 23.67KDa，等电点为 5.67。 2， CYP7A1 与 abGSTsigma mRNA在健康杂色鲍的存在情况：利用 Real-time PCR技术检测了 CYP7A1与 abGSTsigma在健康杂色鲍体内的不同组织器官(鳃、血淋巴细胞、消化腺、外套膜、腹足、上足、性腺、肾、粘液腺)中的转录表达情况，结果表明 abGSTsigma、CYP7A1 基因均广泛的在各种组织中表达。其中外套膜，鳃等表达量较高，腹足，消化腺和次之，血淋巴细
40、胞表达量最低。 3，在 BaP暴露条件下 CYP7A1与 abGSTsigma两种基因在杂色鲍不同组织中的表达变化：在 BaP诱导下 abGSTsigma在消化腺、鳃、外套膜、血淋巴细胞 4个组织中均上调表达，酶活性也有提高。而 CYP7A1则仅在血淋巴细胞中有上调表达，在外套膜、消化腺、鳃中无上调表达。 4，在细菌攻毒条件下CYP7A1与 abGSTsigma两种基因在杂色鲍不同组织中的表达变化：abGSTsigma在被检测的 4个组织中均显著上调表达，酶活性也有提高。而 CYP7A1则仅在血淋巴细胞中有上调表达，在消化腺、鳃中无上调表达。 5，研究结果表明abGSTsigma可能参与了免疫
41、应答过程：abGSTsigma 基因在细菌感染和 BaP暴露下都在不同组织中显著表达，表明杂色鲍 abGSTsigma基因可能参与鲍体内异源物质代谢与免疫应答两个过程。而 CYP7A1基因仅在血淋巴细胞中表达，推测在杂色鲍体内，CYP7A1 可能与免疫应答过程相关，而与异源物质代谢相关性较小。杂色鲍(Haliotis diversicolor)属软体动物门，腹足纲，前鳃亚纲，原始腹足目，鲍科，是我国南方鲍种，因其生长迅速，经济价值高，在南海海域得到广泛养殖。但长期以来遭受疾病困扰，致使鲍鱼养殖业经常遭受重大损失，而迄今尚无有效的免疫防治措施。为探索鲍的免疫相关机制，本实验室前期利用SSH技术，
42、构建了细菌攻毒杂色鲍血淋巴细胞 SSH cDNA文库，发现细菌感染下杂色鲍血淋巴细胞中细胞色素 P450(CYP7A1)与谷胱甘肽硫转移酶(abGSTsigma)基因上调表达，推测在鲍体内 CYP7A1与 abGSTsigma不仅参与异源物质的代谢过程，也可能参与机体的免疫应答过程。本研究拟在此基础上，对杂色鲍分别进行 BaP暴露与细菌攻毒，观察在两个不同刺激过程中 CYP7A1与 abGSTsigma基因分别在杂色鲍体内的诱导表达情况，从而对 CYP7A1与 abGSTsigma是否参与异源物质的代谢以及可能的免疫应答过程做出分析。取得的主要研究成果如下。 1，利用 RACE技术克隆了杂色鲍
43、 CYP7A1与 abGSTsigma cDNA全长序列：CYP7A1 cDNA序列(GeneBank 登录号为 EF587282)全长 2185bp，包含一个1494bp的开放阅读框，编码 498个氨基酸，其理论分子量为 57557.0Da，等电点为 6.56。abGSTsigma cDNA 序列全长 1328bp(GeneBank登录号为 EF546619)。包含有一个 624bp ORF，编码 208个氨基酸，其理论分子量为 23.67KDa，等电点为 5.67。 2， CYP7A1 与 abGSTsigma mRNA在健康杂色鲍的存在情况：利用 Real-time PCR技术检测了 C
44、YP7A1与 abGSTsigma在健康杂色鲍体内的不同组织器官(鳃、血淋巴细胞、消化腺、外套膜、腹足、上足、性腺、肾、粘液腺)中的转录表达情况，结果表明 abGSTsigma、CYP7A1 基因均广泛的在各种组织中表达。其中外套膜，鳃等表达量较高，腹足，消化腺和次之，血淋巴细胞表达量最低。 3，在 BaP暴露条件下 CYP7A1与 abGSTsigma两种基因在杂色鲍不同组织中的表达变化：在 BaP诱导下 abGSTsigma在消化腺、鳃、外套膜、血淋巴细胞 4个组织中均上调表达，酶活性也有提高。而 CYP7A1则仅在血淋巴细胞中有上调表达，在外套膜、消化腺、鳃中无上调表达。 4，在细菌攻毒
45、条件下CYP7A1与 abGSTsigma两种基因在杂色鲍不同组织中的表达变化：abGSTsigma在被检测的 4个组织中均显著上调表达，酶活性也有提高。而 CYP7A1则仅在血淋巴细胞中有上调表达，在消化腺、鳃中无上调表达。 5，研究结果表明abGSTsigma可能参与了免疫应答过程：abGSTsigma 基因在细菌感染和 BaP暴露下都在不同组织中显著表达，表明杂色鲍 abGSTsigma基因可能参与鲍体内异源物质代谢与免疫应答两个过程。而 CYP7A1基因仅在血淋巴细胞中表达，推测在杂色鲍体内，CYP7A1 可能与免疫应答过程相关，而与异源物质代谢相关性较小。杂色鲍(Haliotis d
46、iversicolor)属软体动物门，腹足纲，前鳃亚纲，原始腹足目，鲍科，是我国南方鲍种，因其生长迅速，经济价值高，在南海海域得到广泛养殖。但长期以来遭受疾病困扰，致使鲍鱼养殖业经常遭受重大损失，而迄今尚无有效的免疫防治措施。为探索鲍的免疫相关机制，本实验室前期利用SSH技术，构建了细菌攻毒杂色鲍血淋巴细胞 SSH cDNA文库，发现细菌感染下杂色鲍血淋巴细胞中细胞色素 P450(CYP7A1)与谷胱甘肽硫转移酶(abGSTsigma)基因上调表达，推测在鲍体内 CYP7A1与 abGSTsigma不仅参与异源物质的代谢过程，也可能参与机体的免疫应答过程。本研究拟在此基础上，对杂色鲍分别进行
47、BaP暴露与细菌攻毒，观察在两个不同刺激过程中 CYP7A1与 abGSTsigma基因分别在杂色鲍体内的诱导表达情况，从而对 CYP7A1与 abGSTsigma是否参与异源物质的代谢以及可能的免疫应答过程做出分析。取得的主要研究成果如下。 1，利用 RACE技术克隆了杂色鲍 CYP7A1与 abGSTsigma cDNA全长序列：CYP7A1 cDNA序列(GeneBank 登录号为 EF587282)全长 2185bp，包含一个1494bp的开放阅读框，编码 498个氨基酸，其理论分子量为 57557.0Da，等电点为 6.56。abGSTsigma cDNA 序列全长 1328bp(G
48、eneBank登录号为 EF546619)。包含有一个 624bp ORF，编码 208个氨基酸，其理论分子量为 23.67KDa，等电点为 5.67。 2， CYP7A1 与 abGSTsigma mRNA在健康杂色鲍的存在情况：利用 Real-time PCR技术检测了 CYP7A1与 abGSTsigma在健康杂色鲍体内的不同组织器官(鳃、血淋巴细胞、消化腺、外套膜、腹足、上足、性腺、肾、粘液腺)中的转录表达情况，结果表明 abGSTsigma、CYP7A1 基因均广泛的在各种组织中表达。其中外套膜，鳃等表达量较高，腹足，消化腺和次之，血淋巴细胞表达量最低。 3，在 BaP暴露条件下 C
49、YP7A1与 abGSTsigma两种基因在杂色鲍不同组织中的表达变化：在 BaP诱导下 abGSTsigma在消化腺、鳃、外套膜、血淋巴细胞 4个组织中均上调表达，酶活性也有提高。而 CYP7A1则仅在血淋巴细胞中有上调表达，在外套膜、消化腺、鳃中无上调表达。 4，在细菌攻毒条件下CYP7A1与 abGSTsigma两种基因在杂色鲍不同组织中的表达变化：abGSTsigma在被检测的 4个组织中均显著上调表达，酶活性也有提高。而 CYP7A1则仅在血淋巴细胞中有上调表达，在消化腺、鳃中无上调表达。 5，研究结果表明abGSTsigma可能参与了免疫应答过程：abGSTsigma 基因在细菌感染和 BaP暴露下都在不同组织中显著表达，表明杂色鲍 abGSTsigma基因可能参与鲍体内异源物质代谢与免疫应答两个过程。而 CYP7A1基因仅在血淋巴细胞中表达，推测在杂色鲍体内，CYP7A1 可能与免疫应答过程相关，而与异源物质代谢相关性较小。特别提醒 ：正文内容由 PDF文件转码生成，如您电脑未有相应转换码，则无法显示正文内容，请您下载相应软件，下载地址为 http:/ 。如还不能显示，可以联系我 q
