1、青蒿琥酯对孕体组织的损伤娄小娥，周慧君，黄泓忭（浙江大学药学院药理学研究室，浙江杭州；杭州中美华东制药股份有限公司，浙江杭州）摘要：为了探讨青蒿琥酯（）对胚胎发育的影响，作者观察了对体外培养人蜕膜细胞存活率的影响，并选用大鼠用直接法和法测定胚胎和胎盘组织中谷胱甘肽过氧化物酶（）的活性及脂质过氧化产物丙二醛（）含量结果表明，二氢青蒿素对体外培养的人蜕膜细胞有直接杀伤作用，其为（）大鼠于妊娠，末次给药后，胚胎中活性显著降低，含量显著升高（），并使胎盘中活性非常显著升高（）结果提示，能直接损伤蜕膜，破坏胚胎和胎盘的抗氧化系统的平衡状态，造成胚胎和胎盘组织的氧化损伤，最终导致胚胎吸收关键词：青蒿琥酯；
2、谷胱甘肽过氧化物酶；过氧化物脂质类；丙二醛；蜕膜中图分类号：文献标识码：文章编号：（）青蒿琥酯（，）是倍半萜内酯类抗疟药青蒿素的衍生物，临床用于抗氯喹疟疾治疗和凶险型疟疾急救的毒理学研究表明，骨髓造血和胚胎组织是其敏感的中毒靶组织，它不仅可引起多种动物的胚胎吸收，且能抑制体外培养的小鼠胚胎的生长为进一步揭示抑制胚胎生长的原因，本文从胚胎和胎盘组织脂质过氧化程度，分析损伤孕体及蜕膜组织的诱发因子，拟进一步探究其胚胎毒性的可能机理收稿日期：接受日期：作者简介：娄小娥（），女，浙江省杭州市人，主管药剂师，在读医学硕士研究生，主要研究方向药理学现工作单位：浙江大学医学院附属邵逸夫医院药剂科，杭州联系作
3、者：（），：（），：材料和方法动物和材料（）大鼠，体重：，（），（）（珋）由浙江大学湖滨校区实验动物中心提供人蜕膜组织（妊娠周的健康早孕妇女的人工流产组织）由上海瑞金医院妇产科提供药品和试剂（纯度）及注射液（广西桂林第二制药厂），批号，临用前用配制成所需溶液二氢青蒿素由上海医药工业研究院合成室惠赠，白色粉末，纯度十二烷基硫酸钠（）和为上海华美生物工程公司产品，为上海试剂二厂产品，和（）培养基为产品人蜕膜细胞培养蜕膜组织经胰酶消化后，每克离体的蜕膜组织可得约个细胞，经台盼蓝染色镜检细胞存活率大于。将蜕膜细胞分散在培养液中，调整细胞浓度按每孔个细胞接种于孔培养板，置于，培养箱中培养后，细胞贴壁良好
4、，铺展生长，存活率以上人蜕膜细胞离体培养后，加二氢青蒿素，及，研究证明进入生物体内后，迅速转化为二氢青蒿素唯一的活性代谢产物而发挥其抗疟作用，因此我们直接用二氢青蒿素来研究对蜕膜细胞的作用，同时设溶剂二甲亚砜（）组和空白对照组，继续培养后，在倒置显微镜下观察细胞形态后，用台盼蓝染色，进行活细胞计数并按法计算胚胎和胎盘中谷胱甘肽过氧化物酶（，）活性和丙二醛（，）含量的测定按常规交配试验方法，大鼠每日下午：时合笼，次晨阴道涂片发现精子者为妊娠；（）：妊娠大鼠随机分组，于妊娠连续，及，对照组相当容量的溶液末次给药后处死，剖腹取出子宫，于冰生理盐水中清除脂肪和结缔组织分离胚胎和胎盘，以窝为单位，称重，
5、按（）加缓冲液制成匀浆胚胎和胎盘组织中活性测定采用直接法，蛋白质含量测定采用考马氏亮蓝法胚胎和胎盘组织中脂质过氧化产物含量测定采用法数据以珋表示，检验比较组间显著性差异，并进行相关系数的显著性检验结果二氢青蒿素对体外培养的人蜕膜细胞的杀伤作用离体培养的人蜕膜细胞与药物和共培养后，观察细胞形态发现：空白对照和组的细胞贴壁生长良好，呈多角形，彼此连接成片给药组随二氢青蒿素浓度的增加，细胞间隙增大，胞体变小，固缩，胞内出现空泡化，贴壁细胞明显减少细胞计数结果表明，与共培养后，活细胞数与空白对照组相比无显著变化给药组随二氢青蒿素剂量的增加而活细胞数显著减少：，及组活细胞数分别为（），（）和（）个，且呈
6、显著的相关性（，）用法计算，为（）青蒿琥酯对妊娠大鼠胚胎和胎盘活力和含量的影响表结果表明，随剂量增高，胚胎中活性降低而含量相对升高，与剂量组与对照组比较，两指标均有显著性差异且胚胎中的活性与剂量呈显著负相关（，），而与剂量呈正相关（，）胎盘中活力随着剂量增高，先增加而后下降，在组达最高，胎盘中含量组比对照组显著上升讨论母体与胎儿间正常的氧化平衡状态对于胚胎正常发育尤其重要结构中具有过氧桥键，在体内外代谢中可产生自由基本研究结果表明，大鼠于妊娠后，胚胎中的含量随给药剂量增加而升高，说明其进入体内后代谢产生的活性氧对胚胎直接造成氧化损伤同时还使胚胎的活性随给药剂量增加而显著下降，以比值来衡量胚胎的
7、抗氧化能力，组大鼠胚胎的抗氧化能力还是正常的（未降低），但和组明显下降，说明能使胚胎的抗氧化能力显著下降胎盘活性变化是先升高而后下降，这种胚胎和胎盘中活性和含量不同的变化，正是由于胎盘作为母体的一部分，对活性氧造成的生物膜脂质过氧化损伤的代偿能力比胚胎强而组胎盘活性降低可能是升高的结果因此当的剂量增大到一定值时，其胎盘氧化平衡遭到破坏，最终受到氧化损伤，成为胚胎发育受阻的诱发因素蜕膜在妊娠的维持中起着重要的作用，通过离体人蜕膜细胞培养实验发现，的活性代谢产物（）（）（）珋，中国药理学与毒理学杂志年月；（）二氢青蒿素可直接损伤蜕膜细胞，表明能造成蜕膜受损，使发育中的胚胎失去血液供应和营养，导致胚
8、胎发育受阻，最终孕体被排出或吸收本研究结果表明，能直接损伤蜕膜组织；扰乱胎盘与母体间的氧化平衡状态，破坏胚胎生长所需的营养供应站；并直接引起或促进胚胎脂质过氧化损伤，使胚胎自由基清除系统的抗氧化能力降低，从而产生胚胎毒性，引起胚胎吸收参考文献：刘旭抗疟药青蒿琥酯的研究药学进展，（）：石笑春，滕翕和青蒿琥酯对体外培养小鼠胚胎的影响癌变畸变突变，（）：，（）：，（）：夏奕明，朱莲珍血和组织中谷胱甘肽过氧化物酶活力的测定方法直接法卫生研究，（）：，（）：石笑春，吕富双，焦岫卿，王治乔青蒿琥酯诱发大鼠骨髓细胞膜系的脂质过氧化作用军事医学科学院院刊，（）：，（）：石笑春，张清林，吴可，王澍，孙存普，王治乔青蒿琥酯诱发自由基对孕鼠与胎鼠造血细胞的毒性中国药理学与毒理学杂志，（）：，（）：，（，；，）：，（）（），（），（）：；（本文编辑周宇红）；（）
