1、ICS 11.020 C 50 WS 中 华 人 民 共 和 国 卫生 行 业 标 准 WS/T 404.4 2018 临床常用 生化检验 项目参考 区间 第4 部分：血清总 胆红素、直接胆红 素 Reference intervals for common clinical biochemistry tests Part 4：Serum total bilirubin and direct bilirubin 2018-04-27 发布 2018-11-01 实施 中 华 人 民 共 和 国 国 家 卫 生 健 康 委 员 会 发布 WS/T 404.4 2018 I 前 言 WS/T 40
2、4 临床 常用 生化 检验项 目参 考区 间 分 为8 个部 分：第 1 部 分：血清 丙氨 酸氨基 转移 酶、天门 冬氨 酸氨基 转移 酶、碱性 磷酸 酶和-谷 氨酰 基 转 移酶；第2 部 分：血清 总蛋 白、白 蛋白；第3 部 分：血清 钾、钠、氯；第4 部 分：血清 总胆 红素、直接 胆红 素；第5 部 分：血清 尿素、肌酐；第6 部 分：血清 总钙、无机 磷、镁、铁；第7 部 分：血清 乳酸 脱氢酶、肌 酸激 酶；第8 部 分：血清 淀粉 酶。本部分 为WS/T 404 的第4 部分。本部分 按照 GB/T 1.1 2009 给 出的 规则 起草。本部分 起草 单位：中国 医 科大学
3、 附属 第一 医院、复 旦大学 附属 中山 医院、北 京医院、北京 大学 第三医院、四川 大学 华西 医院、中国 人民 解放 军第 四军 医大学 附属 第一 医院、广 东省中 医院。本部分 主要 起草 人：尚红、潘柏 申、陈文 祥、张传 宝、张 捷、王兰 兰、郝晓 柯、黄 宪章、申 子 瑜、赵敏、穆润 清、郭玮、王 蓓丽。WS/T 404.4 2018 1 临 床常用 生化检验 项目参 考区间 第 4 部分：血清总 胆红素、直接胆 红素 1 范围 WS/T 404 的 本部 分规 定了 中国成 年人 群血 清总 胆红 素、直 接胆 红素 的参 考区 间及其 应用。本部分 适用 于医 疗卫 生机
4、 构实验 室血 清 总 胆红 素、直接胆 红素 检验 结果 的报 告和解 释，相关 体 外 诊断厂商 也可 参照 使用。2 规范性 引用 文件 下列文 件对 于本 文件 的应 用是必 不可 少的。凡 是注 日期的 引用 文件，仅 所注 日期的 版本 适用 于 本 文件。凡 是不 注日 期的 引用 文件，其最 新版 本（包括 所有的 修改 单）适用 于本 文件。WS/T 402 临床 实验 室检 验项目 参考 区间 的制 定 3 术语和 定义 WS/T 402 界定 的术 语和 定 义适用 于本 文件。4 参考区 间 4.1 中国 成 年人 群（20 岁79 岁）血 清总 胆红 素、直接 胆红素
5、 参考 区间 见 表 1。表1 中国成 年人 群血 清总 胆红 素、直 接胆 红素 参考 区间 项目 分组 参考范围(mol/L)血清总胆红素(TBIL)男 26.0 女 21.0 男/女 23.0 血清直接胆红素(DBIL)系统 a 8.0 系统 b、c 4.0 注1：直接胆红素无国际公认的计量学溯源标准，因此本 文件目前提供系统特异的参考区间。注2：系统a：罗 氏 配套 系 统；系 统b：贝克曼DXC 系 列配 套 系统；系统c：贝 克 曼AU 系 列 配套 系 统，均 为 重 氮 法。表中 列 出 分 析 系统 是 为 了方 便 实验 室 合 理 引 用适 宜 的 参考 区 间或 进 行
6、 参 考 区间 转 移 时参 考，并 不 表 示 对 这些 产品的认可。4.2 中国成 年人 群血 清 总 胆红 素、直 接胆 红素 参考 区间 建立过 程的 相关 信息 参见 附录 A。WS/T 404.4 2018 2 5 参考区 间应 用 5.1 一般原 则 5.1.1 临床实 验室 应首 选本 文件 的参考 区间。注1：参考区间建立研究工作量和成本巨大，临床实验室引用参考区间比自己建立参考区间更为客观、可行。注2：本 参 考 区 间基 于 中 国成 年 人 群多 中 心 研 究结 果，研究 中 的 总胆 红 素 检 验结 果 可 溯源 至 国 际公 认 参 考 方法 或标准物质，参见附
7、录 B。注3：直 接 胆 红 素无 国 际 公认 的 计 量学 溯 源，本 文件 未 列出 参 考 区间 的 检 测 系统 的 使 用者 可 进 行参 考 区 间 转移，并在验证通过的基础上使用。5.1.2 使用本 文件 的参 考区 间前 应进行 必要 的验 证或 评估。注1：外部参考区间在实 验室的适用性主要取决于实验室与参考区间建立时检验结果的可比性和人群的适用性。注2：检 验 结 果 只有 存 在 恒定 的 系 统偏 倚（检 验结 果 正 确度）才 影响 参 考 区 间的 适 用 性，过 大 的实 验 室 内 变异 是实验室分析质量问题，不是参考区间适用性问题。注3：本 文件的 参考 区
8、 间 基于 血 清 的检 测 结 果 建立，若 临床 实 验 室使 用 的 标 本类 型 为 血浆，应 进行 适 当 的 评估 以决定是否采用本参考区间。5.2 参考区 间的 评估、验 证和 使用 5.2.1 按WS/T 402 的 有关 规定 进 行参考 区间 评估 和验 证。5.2.2 如实验 室确 认与 参考 区间 建立时 的检 验结 果可 比且 人群适 用，则可 直接 引用 本 文件的 参考 区间，若不确 定或 基 于 实验 室管 理体系 的要 求需 对引 用的 参考区 间进 行验 证，可按 下列步 骤进 行：a)筛选合 格参 考个 体不 少 于20 名，筛 选标 准参 见 A.2.2
9、；b)按本实 验室 操作 程序 采集、处理、分 析样 品；c)按适当 方法 检查 并剔 除离 群值（若有，则 另选 参考 个体补 足）；注：离群值检验采用Dixon 方法：首 先将检测结果按照大小排序并计算极差R，然后分别计算最大和最小值与其相邻数值之差D；若D/R 1/3，则 将最 大 值 或 最小 值 视为 离 群 值予以 剔 除；将余 下 数据 重 复 前述步 骤 进 行 离群 值 检验，直至剔除所有离群值。d)如选 择20 名合 格的 参考 个 体，将 20 个检 验结 果与 参 考区间 比 较，若 超出 参考 区间的 数据 不超过2 个，则 通过 验证；若 超过 2 个，则另 选 2
10、0 名 合 格参考 个体 重新 按照 上述 判断标 准进 行 验证。如参 考个 体多 于 20 名，超 出参 考区 间的 数据 不 超过10%则 通过 验证；若 超 过 10%的数 据超出参考 区间，则 另选 至少 20 名 合格 参考个 体，重新 按照上 述判 断标 准进 行验 证。验证结果若符合要 求，可直 接使 用参 考区间，否 则应 查找 原因。5.3 参考区 间未 通过 验证 时的 处理程 序 5.3.1 对未通 过验 证的 情况，应 首先评 价分 析质 量尤 其是 正确度，若 证实 是检 测系 统导致 的分 析质 量问题，应改 进或 更换 分析 系统。分析 质量 评价 可采 用，但
11、 不限 于下 列方 式：a)分析可 互通 有证 标准 物质 或其他 适宜 参考 物质；b)参加适 宜正 确度 验证 计划 或标准 化计 划；c)与性能 可靠 的其 他系 统或 方法进 行比 较。5.3.2 若证明 是人 群原 因（如民 族、高 海拔 地区、特殊 生活 习惯等 因素）未 通过 验证，则应 按 WS/T 402的要求 建立 或引 用适 宜参 考区间。WS/T 404.4 2018 3 A A 附 录 A（资料 性附 录）参考区 间建 立过 程的 相关 信息 A.1 参考区 间建 立的 步骤 本 文件 参考 区间 按WS/T 402 的要 求 采 用多 中心 的研 究 方式建 立，主
12、要 包括 以下 步骤：a)选择参 考个 体，组成 参考 样本组；b)采集处 理血 液样 品，获得 血清样 品；c)检测血 清样 品，获得 参考 值；d)统计处 理参 考值，建 立参 考区间。A.2 参考个 体选 择 A.2.1 参考样 本组 的选 择 设计 总 体参 考人 群为 我国 成年健 康人 群，参考 样本 组选自 东北（沈 阳）、华 北（北 京）、西 北（西安）、华 东（上 海）、华南（广州）和西 南（成 都）6 地 区城 乡 居民，每 地 区入 选 参考 个 体总 计 约720名，每 十岁 年龄 段的 参考 个体数 至少120 名，男女 比 为1:1，年 龄范 围为20 岁79岁 A
13、.2.2 参考个 体的 选择、各 中心 分别 在所 在地 区募 集足够 的可 能参 考个 体，征得知 情同 意，进 行参 考 个体的 筛选，组成 参考样本组。通过 问 卷调 查、体格 检查、实验 室检 查筛 选参 考个 体，满 足以 下要 求：a)自觉健 康；b)无下列 疾病：急慢 性感染（急性 上呼吸 道感 染、肺 炎、肺 结核等）、消 化系 统 疾病（肝硬化、肝炎、脂肪性 肝病、胆石 病、胆 囊炎、慢性 腹泻、炎症性 肠病等）、肾 脏疾病（慢性 肾脏 病、急性肾 损伤等）、代 谢和营 养疾病（糖尿 病、代谢综 合征、血脂异 常和 脂蛋白 异常血 症、高 尿酸血症 与痛 风等）、风湿 性 疾
14、病（类风 湿性 关节 炎、系统性 红斑 狼疮 等）、甲 状 腺疾病（甲 状腺功能亢 进症、甲 状腺 功能 减退症 等）、血 液系 统疾 病（贫血、白 血病 等）、动脉 粥样硬 化和 血 管疾病、心脏 病、肌病、恶 性肿瘤、烧 伤和 肌肉 损伤、肥胖 或消 瘦BMI（体重 指数）28 kg/m2或18.5kg/m2、高 血压（收缩 压140mmHg 和/或 舒张压 90mmHg）；c)6 个月 内未 进行 手术，4 个 月内未 献血、输 血或 大量 失血，2 周 内未 服用 药物；d)无酗酒（长 期饮 酒 或 2 周 内大量 饮酒）、嗜烟（吸 烟 量 20 支/d）；e)近期无 剧烈 运动 或重
15、 体力 劳动；f)女性未 处于 妊娠 或哺 乳期。注：参考个体未通过基因检测排除Gilbert 综合征、Dubin-Johnson 综合征、Rotor 综合征及Crigler-Najjar 综合征等先天性良性高胆红素血症。A.3 血液样 品采 集与 处理 WS/T 404.4 2018 4 血液 样 品采 集与 处理 原则 按WS/T 225 2002 有 关要 求进行，具 体要 求如 下：a)参考个 体准 备：采 血前 三 天保持 正常 生活 习惯，不 做剧烈 运动 和重 体力 劳动，采 血前 一天 晚餐后至第 二天 上午 采血 前禁 食，禁 食时 间 8 h14 h；b)采血：受检 者取
16、坐位，使 用真空 采血 方式，自 肘前 静脉采 血；c)血液样 品处 理：样 品在 采 集后 2 h 内 及时 分离 血清，检查 并剔除 溶血、黄疸 或乳糜 样品，血 清分离 后2 h 内进 行分 析。A.4 血清样 品分 析 A.4.1 分析系 统：目前 我国 临床 实验室 常用 的多 种分 析系 统。注：本 参 考 区 间建 立 所 使用 的 分析系 统 及 其 检测 结 果 的计 量 学溯源 见 附 录B。各分 析 系统 检 测 结果 的 正 确 度验 证 见A.4.2。A.4.2 分析系统 性能 评估：分析 系统于 参考个 体血 清样品 分析前 进行分 析性 能评估。按仪 器和试 剂
17、说明书规 定的 操作 程序 运行 分析系 统。精密 度评 估：分析两 个水 平质 控物，每 日测 定1批，重 复测 定4 次，测定5 d；正 确度 验证：分 析有证 标准 物质 进行 正确 度验证。精密 度和 正确 度 满足WS/T 403 的 有关 要 求。A.4.3 血清样 品分 析及 其质 量控 制：分 析性 能符 合要 求后 进行血 清样 品分 析，每份 血清样 品分 析一 次。精密度 控制 采用 两个 水平 质控物 质，每独 立分 析批 前后进 行质 控物 质分 析；定期分 析有 证标 准 物 质 进 行正确度 评估。A.5 参考值 处理 与参 考区 间建 立 A.5.1 离群值 检
18、查：按 照Dixon 方 法检查 并剔 除各 组离 群值。A.5.2 分组判 断：按照nested ANOVA 方 法对 性别、年 龄、地 区各组 参考 值进 行组-组 检 验，判 断需 否分组，将 不需 分组 的参 考值 合并，确定 实际 参考 样本 组。注：通过统计学分析，总胆红素及直接胆红素在不同年龄分组及不同地区分组间无统计学差异；总胆红素 参考区间需进行性别分组；直接胆红素参考区间需进行检测系统分组。A.5.3 参考限 和参考 区间 建立：用非参 数方法 计算 参考样 本组参 考值的95百 分位数 作为参 考上限，不设参考 下限。根 据临 床意 见对参 考限 进行 适当 取整，形成
19、参考 区间。WS/T 404.4 2018 5 B B 附 录 B（资料 性附 录）血清总 胆红 素、直接 胆 红 素的检 测方 法和 检测 结果 的计量 学溯 源 血清 总 胆红 素和 直接 胆红 素检测 方法 和检 测结 果的 计量学 溯源 见 表B.1。表B.1 血清总 胆红 素和 直接 胆红 素检测 方法 和检 测结 果的 计量学 溯源 项目 方法 计量学溯源 总胆红素 重氮法/矾酸盐氧化法 NIST SRM916a 直接胆红素 重氮法 WS/T 404.4 2018 6 参 考 文 献 1 WS/T 225 2002 临 床化学 检验 血液 标本 的收 集与处 理 2 WS/T 40
20、3 2012 临 床生物 化学 检验 常规 项目 分析质 量指 标 3 王吉 耀.内 科学.2 版.北京：人 民卫 生出 版社，2010 4 Donald S.Young.分 析前因 素对 临床 检验 结果 影响.3 版.李艳，等，译.北京：人 民军 医出版社，2009 5 Clinical and Laboratory Standards Institute（CLSI）.Defining，establishing，and verifying reference intervals in the clinical laboratory：Approved Guideline Third Edition.CLSI document C28-A3c.CLSI，Wayne，PA，USA，2010 6 Ichihara K，Boyd JC，IFCC Committee on Reference Intervals and Decision Limits（C-RIDL）.An appraisal of statistical procedures used in derivation of reference intervals.Clin Chem Lab Med，2010，48：1537-1551 _
