1、第九章 常见园林植物的快速繁殖技术第一节 玫瑰组培快繁试验研究任务目标（一）知识目标：了解玫瑰的生物学特性；掌握玫瑰的组培快繁技术；掌握影响玫瑰组培快繁的因素。（二）能力目标：能够以玫瑰为快繁材料进行工厂化生产。（三）情感目标：激发学生热爱自然、热爱生命的热情；培养学生的团队协作意识；培养学生动手操作能力。重点、难点重点：玫瑰的组培快繁技术。难点：熟练运用组培快繁技术工厂化生产玫瑰组培苗。解决难点的方法：采用多媒体展示和现场演示的方法，使同学们能很清楚的看清老师展示的每个操作步骤并注意操作要求，布置任务，让学生分组操作，并完成玫瑰的组培快繁技术步骤。学生会产生一定的成就感。从而更好的掌握技能，
2、提高学习效率。教学方法及手段（一）教法：多媒体教学法、现场演示教学法、任务驱动教学法、讨论、分析、总结法等。1、运用多媒体图片观察及现场演示的教学方法能够激发学生的学习兴趣。2、安排学生操作任务，活跃课堂教学气氛，有利于任务目标的完成。3、学生的学习过程由观察入手，到领取任务，然后进行操作，最后完成任务。逐步深入，逐步掌握。（二）学法：1、产生兴趣2、动手操作3、享受成果4、归纳总结5、个性创作（课后）课时安排 2课时（1课时实训）任务内容及完成过程：、课前准备课前准备玫瑰外植体、组培所需的药品、用具等。导入新课玫瑰属蔷薇科蔷薇属小灌木。对环境适应性强，喜温暖凉爽的气候和充足的阳光，耐旱、耐寒
3、。玫瑰的观赏价值很高，在世界上被誉为“花中皇后”。其切花的销售额多年来稳居各类花木的前茅，与菊花类、香石竹类、唐菖蒲类并列为切化的四大支柱。玫瑰的繁殖方法主要有扦插、嫁接、组培等。用组织培养的方法生产玫瑰试管苗不仅生产周期短，而且繁殖倍数高，周年均可生产，年可生产玫瑰试管苗50万株。经济效益，社会效益都很可观。一、无菌培养物的建立（一）外植体的选择及清洗玫瑰品种数以万计，我们选择流行品种“红双喜”作试验材料。选取生长健壮的当年生枝条，用饱满而未萌发的侧芽作为外植体。以枝条中段芽最好。采回的枝条切去叶，再剥去附在茎上的叶柄及皮刺，先整段用毛刷沾浓洗衣粉水轻轻刷洗，再用自来水冲洗，毛巾擦干，切成2
4、3厘米一段，每段至少一个侧芽，装入消毒过的培养皿，放在超净工作台上。（二）消毒与接种用0.1%的升汞溶液表面灭菌5-10分钟，无菌水冲洗4-5次。按照无菌操作要求接种在三角瓶中。（三）培养基及培养玫瑰整个培养过程都选用MS基本培养基，再加入适量的生长调节物质。每阶段设置五组培养基配方对照试验，结果分析见附表。外植体培养阶段，一般只加细胞分裂素（6-BA）一种激素即可。控制培养室的温度25+3，光照强度1000Lx-1600Lx，光照时间为12-15h/d。3天后芽开始萌发，逐渐形成芽丛2-5个，从芽萌发到芽长到1厘米左右需要3-4周。二、茎芽增殖通过初代培养所获得的无菌苗，从原茎段上切下来，切
5、成1.5cm长的小段，转接到MS+细胞分裂素+生长素的培养基上，促使嫩茎长出更多的侧芽，原茎段弃去。经30天左右第一代继代培养可获得每瓶具有4-6株嫩梢的试管苗，以后每隔5-6周转接继代一次，可使无菌试管苗迅速、健壮增殖，数量不断扩大。茎芽增殖过程中培养基中要加入适量的细胞分裂素（6-BA），以促进侧芽形成，同时加入少量的生长素类药剂（IAA、NAA），以促进幼苗的健壮生长。培养室条件同初代培养。三、壮苗培养增殖倍率高的嫩茎较细弱，需要进行一次壮苗培养，以取得适合生根和移栽的小苗。壮苗培养基为：MS+BA0.3-0.5+NAA0.03-0.08四、生根培养当无根苗达到所需数量时，即可进行生根培
6、养。生根培养基选用1/2MS或1/4MS培养基，植物激素一般只加入生长素（IBA、NAA），培养基中最好再加300mg/L活性炭，效果更好。选取2-3cm高的健壮小苗接种于生根培养基上，培图9-1 玫瑰组培快繁养室的温度控制在28-30，增加光照强度1600 Lx -2000Lx，延长光照时间16 h/d，7天左右即可产生根原基，10天左右可长成1-2mm的白色正常根系，根系较发达，每株苗根均在4-6条。五、移栽管理（一）移栽基质移栽基质应疏松透气，有一定的保水、保肥能力，而且容易进行灭菌处理。玫瑰移栽基质以粗沙+园田土（1：3）为好，移栽后的成活率比较高。（二）移栽技术用镊子小心取出试管苗，
7、首先用0.1%的多菌灵溶液轻轻洗掉根部的培养基，然后种入经过消毒灭菌的基质中。种植密度23厘米46厘米/株，移栽完毕浇透水，并用0.1的百菌清、多菌灵等喷雾保苗。（三）移栽后管理移栽后最初几天要求保持高湿（相对湿度90%-100%），通常在大棚内打设小拱棚，每天喷雾3-4次，并且注意通风和防治病菌。当试管苗适应了新的环境后，再逐渐降低空气湿度，最终过度到可在正常的温室或自然条件下生长。移栽过程中应避免强烈的直射光，以较高强度的散射光为好，经过一段时间后，再逐渐增加光照强度。 温室温度控制在18-20为宜。一月后，进行第二次移栽，通常植入5厘米9厘米的塑料杯中，每杯种1苗，试管苗第二次移栽后，管
8、理上仍不可放松，须注意除草、施肥。移栽成活率可达到85%以上。再经46周，地上、地下部分都充分生长，有些植株还能开花，此时即可出售，或上盆种植，利于观赏。结果分析不同培养基配方对玫瑰试管苗各培养阶段生长分化的影响差异较大。表9-1 不同配方对玫瑰试管苗生长分化的影响培养时期 组号配方 第一组 第二组 第三组 第四组 第五组初代 配方 MS+BAP0.5 MS+BAP0.7 MS+BAP1.0 MS+BAP1.5 MS+BAP2.0生长分化状况 三天后，芽萌动。芽丛 2-3个，健壮。 三天后，芽萌动。芽丛2-3个，健壮。 五天后，芽萌动。芽丛 1-2 个，健壮。 一周后，芽萌动。芽丛1-2个，较
9、弱。 芽萌动较迟。芽丛 1-2 个，较弱。继代 配方 MS+BAP0.5+NAA0.02 MS+BAP1.0+NAA0.05 MS+BAP1.0+NAA0.1 MS+BAP1.5+NAA0.05 MS+BAP2.0+NAA0.1生长分化状况 试管苗长势弱，芽丛数1-2个。 试管苗长势健壮，芽丛数3-5个。 芽分化2-3个，较弱，并有愈伤组织产生。 芽分化2-3个，弱，苗细高。 芽分化3-4个，长势弱，苗细高。生根 配方 1/2MS+IBA0.3+活性炭0.3g/L 1/2MS+IBA0.5+活性炭0.3g/L 1/2MS+IBA0.5+NAA0.5+活性炭0.3g/L 1/2MS+IBA1.0+活性炭0.3g/L 1/2MS+IBA1.5+活性炭0.3g/L生长分化状况 一周后生根，1-2条。 四、五天后生根，3-4条，健壮。 一周后生根，.3-4条，健壮。 十天后生根，1-2条。 十天后生根，2-3条。小结：通过附表比较分析，筛选出适宜于玫瑰各时期培养的培养基配方分别为：初代：MS+BA0.5-0.7mg/L继代：MS+BA1.0mg/L+NAA0.05mg/L生根：1/2MS+IBA0.5mg/L+活性炭300mg/L复习思考题1. 说明玫瑰的组培快繁技术。2. 说明玫瑰组培苗的移栽技术。
