1、生物学 植物学专业毕业论文 精品论文 拟南芥未知基因 AtBN3功能的研究关键词：拟南芥 逆境胁迫 基因表达摘要：拟南芥是第一个完成全基因组测序的高等植物，但到目前为止，仍有大量基因的功能有待我们去探索。随着反向遗传学的发展和现代分子生物学技术的进步，这些功能未知基因的定位、基因功能的分析，基因的表达与调控的研究正越来越得到人们的重视。 本研究通过基因工程、分子生物学等手段来研究拟南芥基因组中的未知功能基因 AtBN3(受 BR-NO 调节的基因)。AtBN3 位于拟南芥第四条染色体上，全长 2071bp，基因内部不含内含子。该基因所编码的蛋白序列有 652 个氨基酸。生物信息学分析结果显示该
2、基因可能响应各种逆境胁迫的应答，而且对 BR 等各种植物激素的信号具有敏感性。同时，启动子顺式调控元件中包含多个胁迫应答相关元件。本论文通过分子生物学实验方法研究了该基因在各种胁迫条件下的表达，同时研究了 BR 和 NO 对该基因表达的影响。 首先通过半定量 RT-PCR 的方法检测 AtBN3 在各种诱导下的表达结果的变化。结果表明，该基因在热、冷、盐和渗透胁迫中，基因的表达量与对照相比都有显著的变化，而在油菜素内酯合成缺陷突变体 det2 中，这种变化的差异明显变小。因此，我们推测 AtBN3 基因是一个拟南芥中与抗逆相关的基因，并且它在逆境下的表达完全由内源 BR 水平调节。 我们又以拟
3、南芥野生型 Col-0，油菜素内酯合成缺陷突变体 det2 和油菜素内酯信号传递突变体 bril-5 三种植株为材料，用 BR、NO 的供体 GSNO 和 NO 的清除剂 cPTIO 这三种试剂的不同组合处理这三种材料。 结果显示，AtBN3 是一个 NO 与 BR 共同调控的基因。BR 和 NO 对AtBN3 都具有正向调控作用，但是与处理时间相关。 内源 BR 或 NO 的缺失，对该基因的表达都会产生影响。BR 对该基因的诱导受内源 NO 水平的影响；NO对该基因的诱导也受内源 BR 水平的影响。我们还推测 AtBN3 可能是位于 BR 传递途径中受体下游的一个调控因子。 我们通过半定量
4、RT-PCR 法检测了AtBN3 的组织表达特异性。结果显示，其在茎中表达量最高，根中次之，叶和花中最少。 用 Gateway 技术构建了三个不同的载体：用于研究 AtBN3 组织表达特异性的 pBN3：GUS 启动子融合表达载体，AtBN3-GFP 亚细胞定位表达载体，以及 ox-AtBN3 过表达载体。 本实验为进一步研究 AtBN3 的生物学功能奠定了基础。正文内容拟南芥是第一个完成全基因组测序的高等植物，但到目前为止，仍有大量基因的功能有待我们去探索。随着反向遗传学的发展和现代分子生物学技术的进步，这些功能未知基因的定位、基因功能的分析，基因的表达与调控的研究正越来越得到人们的重视。
5、本研究通过基因工程、分子生物学等手段来研究拟南芥基因组中的未知功能基因 AtBN3(受 BR-NO 调节的基因)。AtBN3 位于拟南芥第四条染色体上，全长 2071bp，基因内部不含内含子。该基因所编码的蛋白序列有 652 个氨基酸。生物信息学分析结果显示该基因可能响应各种逆境胁迫的应答，而且对 BR 等各种植物激素的信号具有敏感性。同时，启动子顺式调控元件中包含多个胁迫应答相关元件。本论文通过分子生物学实验方法研究了该基因在各种胁迫条件下的表达，同时研究了 BR 和 NO 对该基因表达的影响。 首先通过半定量 RT-PCR 的方法检测 AtBN3 在各种诱导下的表达结果的变化。结果表明，该
6、基因在热、冷、盐和渗透胁迫中，基因的表达量与对照相比都有显著的变化，而在油菜素内酯合成缺陷突变体 det2 中，这种变化的差异明显变小。因此，我们推测 AtBN3 基因是一个拟南芥中与抗逆相关的基因，并且它在逆境下的表达完全由内源 BR 水平调节。 我们又以拟南芥野生型 Col-0，油菜素内酯合成缺陷突变体 det2 和油菜素内酯信号传递突变体 bril-5 三种植株为材料，用 BR、NO 的供体 GSNO 和 NO 的清除剂 cPTIO 这三种试剂的不同组合处理这三种材料。 结果显示，AtBN3 是一个 NO 与 BR 共同调控的基因。BR 和 NO 对AtBN3 都具有正向调控作用，但是与
7、处理时间相关。 内源 BR 或 NO 的缺失，对该基因的表达都会产生影响。BR 对该基因的诱导受内源 NO 水平的影响；NO对该基因的诱导也受内源 BR 水平的影响。我们还推测 AtBN3 可能是位于 BR 传递途径中受体下游的一个调控因子。 我们通过半定量 RT-PCR 法检测了AtBN3 的组织表达特异性。结果显示，其在茎中表达量最高，根中次之，叶和花中最少。 用 Gateway 技术构建了三个不同的载体：用于研究 AtBN3 组织表达特异性的 pBN3：GUS 启动子融合表达载体，AtBN3-GFP 亚细胞定位表达载体，以及 ox-AtBN3 过表达载体。 本实验为进一步研究 AtBN3
8、 的生物学功能奠定了基础。拟南芥是第一个完成全基因组测序的高等植物，但到目前为止，仍有大量基因的功能有待我们去探索。随着反向遗传学的发展和现代分子生物学技术的进步，这些功能未知基因的定位、基因功能的分析，基因的表达与调控的研究正越来越得到人们的重视。 本研究通过基因工程、分子生物学等手段来研究拟南芥基因组中的未知功能基因 AtBN3(受 BR-NO 调节的基因)。AtBN3 位于拟南芥第四条染色体上，全长 2071bp，基因内部不含内含子。该基因所编码的蛋白序列有652 个氨基酸。生物信息学分析结果显示该基因可能响应各种逆境胁迫的应答，而且对 BR 等各种植物激素的信号具有敏感性。同时，启动子
9、顺式调控元件中包含多个胁迫应答相关元件。本论文通过分子生物学实验方法研究了该基因在各种胁迫条件下的表达，同时研究了 BR 和 NO 对该基因表达的影响。 首先通过半定量 RT-PCR 的方法检测 AtBN3 在各种诱导下的表达结果的变化。结果表明，该基因在热、冷、盐和渗透胁迫中，基因的表达量与对照相比都有显著的变化，而在油菜素内酯合成缺陷突变体 det2 中，这种变化的差异明显变小。因此，我们推测 AtBN3 基因是一个拟南芥中与抗逆相关的基因，并且它在逆境下的表达完全由内源 BR 水平调节。 我们又以拟南芥野生型 Col-0，油菜素内酯合成缺陷突变体 det2 和油菜素内酯信号传递突变体 b
10、ril-5 三种植株为材料，用BR、NO 的供体 GSNO 和 NO 的清除剂 cPTIO 这三种试剂的不同组合处理这三种材料。 结果显示，AtBN3 是一个 NO 与 BR 共同调控的基因。BR 和 NO 对 AtBN3都具有正向调控作用，但是与处理时间相关。 内源 BR 或 NO 的缺失，对该基因的表达都会产生影响。BR 对该基因的诱导受内源 NO 水平的影响；NO 对该基因的诱导也受内源 BR 水平的影响。我们还推测 AtBN3 可能是位于 BR 传递途径中受体下游的一个调控因子。 我们通过半定量 RT-PCR 法检测了 AtBN3 的组织表达特异性。结果显示，其在茎中表达量最高，根中次
11、之，叶和花中最少。 用 Gateway 技术构建了三个不同的载体：用于研究 AtBN3 组织表达特异性的pBN3：GUS 启动子融合表达载体，AtBN3-GFP 亚细胞定位表达载体，以及 ox-AtBN3 过表达载体。 本实验为进一步研究 AtBN3 的生物学功能奠定了基础。拟南芥是第一个完成全基因组测序的高等植物，但到目前为止，仍有大量基因的功能有待我们去探索。随着反向遗传学的发展和现代分子生物学技术的进步，这些功能未知基因的定位、基因功能的分析，基因的表达与调控的研究正越来越得到人们的重视。 本研究通过基因工程、分子生物学等手段来研究拟南芥基因组中的未知功能基因 AtBN3(受 BR-NO
12、 调节的基因)。AtBN3 位于拟南芥第四条染色体上，全长 2071bp，基因内部不含内含子。该基因所编码的蛋白序列有652 个氨基酸。生物信息学分析结果显示该基因可能响应各种逆境胁迫的应答，而且对 BR 等各种植物激素的信号具有敏感性。同时，启动子顺式调控元件中包含多个胁迫应答相关元件。本论文通过分子生物学实验方法研究了该基因在各种胁迫条件下的表达，同时研究了 BR 和 NO 对该基因表达的影响。 首先通过半定量 RT-PCR 的方法检测 AtBN3 在各种诱导下的表达结果的变化。结果表明，该基因在热、冷、盐和渗透胁迫中，基因的表达量与对照相比都有显著的变化，而在油菜素内酯合成缺陷突变体 d
13、et2 中，这种变化的差异明显变小。因此，我们推测 AtBN3 基因是一个拟南芥中与抗逆相关的基因，并且它在逆境下的表达完全由内源 BR 水平调节。 我们又以拟南芥野生型 Col-0，油菜素内酯合成缺陷突变体 det2 和油菜素内酯信号传递突变体 bril-5 三种植株为材料，用BR、NO 的供体 GSNO 和 NO 的清除剂 cPTIO 这三种试剂的不同组合处理这三种材料。 结果显示，AtBN3 是一个 NO 与 BR 共同调控的基因。BR 和 NO 对 AtBN3都具有正向调控作用，但是与处理时间相关。 内源 BR 或 NO 的缺失，对该基因的表达都会产生影响。BR 对该基因的诱导受内源
14、NO 水平的影响；NO 对该基因的诱导也受内源 BR 水平的影响。我们还推测 AtBN3 可能是位于 BR 传递途径中受体下游的一个调控因子。 我们通过半定量 RT-PCR 法检测了 AtBN3 的组织表达特异性。结果显示，其在茎中表达量最高，根中次之，叶和花中最少。 用 Gateway 技术构建了三个不同的载体：用于研究 AtBN3 组织表达特异性的pBN3：GUS 启动子融合表达载体，AtBN3-GFP 亚细胞定位表达载体，以及 ox-AtBN3 过表达载体。 本实验为进一步研究 AtBN3 的生物学功能奠定了基础。拟南芥是第一个完成全基因组测序的高等植物，但到目前为止，仍有大量基因的功能
15、有待我们去探索。随着反向遗传学的发展和现代分子生物学技术的进步，这些功能未知基因的定位、基因功能的分析，基因的表达与调控的研究正越来越得到人们的重视。 本研究通过基因工程、分子生物学等手段来研究拟南芥基因组中的未知功能基因 AtBN3(受 BR-NO 调节的基因)。AtBN3 位于拟南芥第四条染色体上，全长 2071bp，基因内部不含内含子。该基因所编码的蛋白序列有652 个氨基酸。生物信息学分析结果显示该基因可能响应各种逆境胁迫的应答，而且对 BR 等各种植物激素的信号具有敏感性。同时，启动子顺式调控元件中包含多个胁迫应答相关元件。本论文通过分子生物学实验方法研究了该基因在各种胁迫条件下的表
16、达，同时研究了 BR 和 NO 对该基因表达的影响。 首先通过半定量 RT-PCR 的方法检测 AtBN3 在各种诱导下的表达结果的变化。结果表明，该基因在热、冷、盐和渗透胁迫中，基因的表达量与对照相比都有显著的变化，而在油菜素内酯合成缺陷突变体 det2 中，这种变化的差异明显变小。因此，我们推测 AtBN3 基因是一个拟南芥中与抗逆相关的基因，并且它在逆境下的表达完全由内源 BR 水平调节。 我们又以拟南芥野生型 Col-0，油菜素内酯合成缺陷突变体 det2 和油菜素内酯信号传递突变体 bril-5 三种植株为材料，用BR、NO 的供体 GSNO 和 NO 的清除剂 cPTIO 这三种试
17、剂的不同组合处理这三种材料。 结果显示，AtBN3 是一个 NO 与 BR 共同调控的基因。BR 和 NO 对 AtBN3都具有正向调控作用，但是与处理时间相关。 内源 BR 或 NO 的缺失，对该基因的表达都会产生影响。BR 对该基因的诱导受内源 NO 水平的影响；NO 对该基因的诱导也受内源 BR 水平的影响。我们还推测 AtBN3 可能是位于 BR 传递途径中受体下游的一个调控因子。 我们通过半定量 RT-PCR 法检测了 AtBN3 的组织表达特异性。结果显示，其在茎中表达量最高，根中次之，叶和花中最少。 用 Gateway 技术构建了三个不同的载体：用于研究 AtBN3 组织表达特异
18、性的pBN3：GUS 启动子融合表达载体，AtBN3-GFP 亚细胞定位表达载体，以及 ox-AtBN3 过表达载体。 本实验为进一步研究 AtBN3 的生物学功能奠定了基础。拟南芥是第一个完成全基因组测序的高等植物，但到目前为止，仍有大量基因的功能有待我们去探索。随着反向遗传学的发展和现代分子生物学技术的进步，这些功能未知基因的定位、基因功能的分析，基因的表达与调控的研究正越来越得到人们的重视。 本研究通过基因工程、分子生物学等手段来研究拟南芥基因组中的未知功能基因 AtBN3(受 BR-NO 调节的基因)。AtBN3 位于拟南芥第四条染色体上，全长 2071bp，基因内部不含内含子。该基因
19、所编码的蛋白序列有652 个氨基酸。生物信息学分析结果显示该基因可能响应各种逆境胁迫的应答，而且对 BR 等各种植物激素的信号具有敏感性。同时，启动子顺式调控元件中包含多个胁迫应答相关元件。本论文通过分子生物学实验方法研究了该基因在各种胁迫条件下的表达，同时研究了 BR 和 NO 对该基因表达的影响。 首先通过半定量 RT-PCR 的方法检测 AtBN3 在各种诱导下的表达结果的变化。结果表明，该基因在热、冷、盐和渗透胁迫中，基因的表达量与对照相比都有显著的变化，而在油菜素内酯合成缺陷突变体 det2 中，这种变化的差异明显变小。因此，我们推测 AtBN3 基因是一个拟南芥中与抗逆相关的基因，
20、并且它在逆境下的表达完全由内源 BR 水平调节。 我们又以拟南芥野生型 Col-0，油菜素内酯合成缺陷突变体 det2 和油菜素内酯信号传递突变体 bril-5 三种植株为材料，用BR、NO 的供体 GSNO 和 NO 的清除剂 cPTIO 这三种试剂的不同组合处理这三种材料。 结果显示，AtBN3 是一个 NO 与 BR 共同调控的基因。BR 和 NO 对 AtBN3都具有正向调控作用，但是与处理时间相关。 内源 BR 或 NO 的缺失，对该基因的表达都会产生影响。BR 对该基因的诱导受内源 NO 水平的影响；NO 对该基因的诱导也受内源 BR 水平的影响。我们还推测 AtBN3 可能是位于
21、 BR 传递途径中受体下游的一个调控因子。 我们通过半定量 RT-PCR 法检测了 AtBN3 的组织表达特异性。结果显示，其在茎中表达量最高，根中次之，叶和花中最少。 用 Gateway 技术构建了三个不同的载体：用于研究 AtBN3 组织表达特异性的pBN3：GUS 启动子融合表达载体，AtBN3-GFP 亚细胞定位表达载体，以及 ox-AtBN3 过表达载体。 本实验为进一步研究 AtBN3 的生物学功能奠定了基础。拟南芥是第一个完成全基因组测序的高等植物，但到目前为止，仍有大量基因的功能有待我们去探索。随着反向遗传学的发展和现代分子生物学技术的进步，这些功能未知基因的定位、基因功能的分
22、析，基因的表达与调控的研究正越来越得到人们的重视。 本研究通过基因工程、分子生物学等手段来研究拟南芥基因组中的未知功能基因 AtBN3(受 BR-NO 调节的基因)。AtBN3 位于拟南芥第四条染色体上，全长 2071bp，基因内部不含内含子。该基因所编码的蛋白序列有652 个氨基酸。生物信息学分析结果显示该基因可能响应各种逆境胁迫的应答，而且对 BR 等各种植物激素的信号具有敏感性。同时，启动子顺式调控元件中包含多个胁迫应答相关元件。本论文通过分子生物学实验方法研究了该基因在各种胁迫条件下的表达，同时研究了 BR 和 NO 对该基因表达的影响。 首先通过半定量 RT-PCR 的方法检测 At
23、BN3 在各种诱导下的表达结果的变化。结果表明，该基因在热、冷、盐和渗透胁迫中，基因的表达量与对照相比都有显著的变化，而在油菜素内酯合成缺陷突变体 det2 中，这种变化的差异明显变小。因此，我们推测 AtBN3 基因是一个拟南芥中与抗逆相关的基因，并且它在逆境下的表达完全由内源 BR 水平调节。 我们又以拟南芥野生型 Col-0，油菜素内酯合成缺陷突变体 det2 和油菜素内酯信号传递突变体 bril-5 三种植株为材料，用BR、NO 的供体 GSNO 和 NO 的清除剂 cPTIO 这三种试剂的不同组合处理这三种材料。 结果显示，AtBN3 是一个 NO 与 BR 共同调控的基因。BR 和
24、 NO 对 AtBN3都具有正向调控作用，但是与处理时间相关。 内源 BR 或 NO 的缺失，对该基因的表达都会产生影响。BR 对该基因的诱导受内源 NO 水平的影响；NO 对该基因的诱导也受内源 BR 水平的影响。我们还推测 AtBN3 可能是位于 BR 传递途径中受体下游的一个调控因子。 我们通过半定量 RT-PCR 法检测了 AtBN3 的组织表达特异性。结果显示，其在茎中表达量最高，根中次之，叶和花中最少。 用 Gateway 技术构建了三个不同的载体：用于研究 AtBN3 组织表达特异性的pBN3：GUS 启动子融合表达载体，AtBN3-GFP 亚细胞定位表达载体，以及 ox-AtB
25、N3 过表达载体。 本实验为进一步研究 AtBN3 的生物学功能奠定了基础。拟南芥是第一个完成全基因组测序的高等植物，但到目前为止，仍有大量基因的功能有待我们去探索。随着反向遗传学的发展和现代分子生物学技术的进步，这些功能未知基因的定位、基因功能的分析，基因的表达与调控的研究正越来越得到人们的重视。 本研究通过基因工程、分子生物学等手段来研究拟南芥基因组中的未知功能基因 AtBN3(受 BR-NO 调节的基因)。AtBN3 位于拟南芥第四条染色体上，全长 2071bp，基因内部不含内含子。该基因所编码的蛋白序列有652 个氨基酸。生物信息学分析结果显示该基因可能响应各种逆境胁迫的应答，而且对
26、BR 等各种植物激素的信号具有敏感性。同时，启动子顺式调控元件中包含多个胁迫应答相关元件。本论文通过分子生物学实验方法研究了该基因在各种胁迫条件下的表达，同时研究了 BR 和 NO 对该基因表达的影响。 首先通过半定量 RT-PCR 的方法检测 AtBN3 在各种诱导下的表达结果的变化。结果表明，该基因在热、冷、盐和渗透胁迫中，基因的表达量与对照相比都有显著的变化，而在油菜素内酯合成缺陷突变体 det2 中，这种变化的差异明显变小。因此，我们推测 AtBN3 基因是一个拟南芥中与抗逆相关的基因，并且它在逆境下的表达完全由内源 BR 水平调节。 我们又以拟南芥野生型 Col-0，油菜素内酯合成缺
27、陷突变体 det2 和油菜素内酯信号传递突变体 bril-5 三种植株为材料，用BR、NO 的供体 GSNO 和 NO 的清除剂 cPTIO 这三种试剂的不同组合处理这三种材料。 结果显示，AtBN3 是一个 NO 与 BR 共同调控的基因。BR 和 NO 对 AtBN3都具有正向调控作用，但是与处理时间相关。 内源 BR 或 NO 的缺失，对该基因的表达都会产生影响。BR 对该基因的诱导受内源 NO 水平的影响；NO 对该基因的诱导也受内源 BR 水平的影响。我们还推测 AtBN3 可能是位于 BR 传递途径中受体下游的一个调控因子。 我们通过半定量 RT-PCR 法检测了 AtBN3 的组
28、织表达特异性。结果显示，其在茎中表达量最高，根中次之，叶和花中最少。 用 Gateway 技术构建了三个不同的载体：用于研究 AtBN3 组织表达特异性的pBN3：GUS 启动子融合表达载体，AtBN3-GFP 亚细胞定位表达载体，以及 ox-AtBN3 过表达载体。 本实验为进一步研究 AtBN3 的生物学功能奠定了基础。拟南芥是第一个完成全基因组测序的高等植物，但到目前为止，仍有大量基因的功能有待我们去探索。随着反向遗传学的发展和现代分子生物学技术的进步，这些功能未知基因的定位、基因功能的分析，基因的表达与调控的研究正越来越得到人们的重视。 本研究通过基因工程、分子生物学等手段来研究拟南芥
29、基因组中的未知功能基因 AtBN3(受 BR-NO 调节的基因)。AtBN3 位于拟南芥第四条染色体上，全长 2071bp，基因内部不含内含子。该基因所编码的蛋白序列有652 个氨基酸。生物信息学分析结果显示该基因可能响应各种逆境胁迫的应答，而且对 BR 等各种植物激素的信号具有敏感性。同时，启动子顺式调控元件中包含多个胁迫应答相关元件。本论文通过分子生物学实验方法研究了该基因在各种胁迫条件下的表达，同时研究了 BR 和 NO 对该基因表达的影响。 首先通过半定量 RT-PCR 的方法检测 AtBN3 在各种诱导下的表达结果的变化。结果表明，该基因在热、冷、盐和渗透胁迫中，基因的表达量与对照相
30、比都有显著的变化，而在油菜素内酯合成缺陷突变体 det2 中，这种变化的差异明显变小。因此，我们推测 AtBN3 基因是一个拟南芥中与抗逆相关的基因，并且它在逆境下的表达完全由内源 BR 水平调节。 我们又以拟南芥野生型 Col-0，油菜素内酯合成缺陷突变体 det2 和油菜素内酯信号传递突变体 bril-5 三种植株为材料，用BR、NO 的供体 GSNO 和 NO 的清除剂 cPTIO 这三种试剂的不同组合处理这三种材料。 结果显示，AtBN3 是一个 NO 与 BR 共同调控的基因。BR 和 NO 对 AtBN3都具有正向调控作用，但是与处理时间相关。 内源 BR 或 NO 的缺失，对该基
31、因的表达都会产生影响。BR 对该基因的诱导受内源 NO 水平的影响；NO 对该基因的诱导也受内源 BR 水平的影响。我们还推测 AtBN3 可能是位于 BR 传递途径中受体下游的一个调控因子。 我们通过半定量 RT-PCR 法检测了 AtBN3 的组织表达特异性。结果显示，其在茎中表达量最高，根中次之，叶和花中最少。 用 Gateway 技术构建了三个不同的载体：用于研究 AtBN3 组织表达特异性的pBN3：GUS 启动子融合表达载体，AtBN3-GFP 亚细胞定位表达载体，以及 ox-AtBN3 过表达载体。 本实验为进一步研究 AtBN3 的生物学功能奠定了基础。拟南芥是第一个完成全基因
32、组测序的高等植物，但到目前为止，仍有大量基因的功能有待我们去探索。随着反向遗传学的发展和现代分子生物学技术的进步，这些功能未知基因的定位、基因功能的分析，基因的表达与调控的研究正越来越得到人们的重视。 本研究通过基因工程、分子生物学等手段来研究拟南芥基因组中的未知功能基因 AtBN3(受 BR-NO 调节的基因)。AtBN3 位于拟南芥第四条染色体上，全长 2071bp，基因内部不含内含子。该基因所编码的蛋白序列有652 个氨基酸。生物信息学分析结果显示该基因可能响应各种逆境胁迫的应答，而且对 BR 等各种植物激素的信号具有敏感性。同时，启动子顺式调控元件中包含多个胁迫应答相关元件。本论文通过
33、分子生物学实验方法研究了该基因在各种胁迫条件下的表达，同时研究了 BR 和 NO 对该基因表达的影响。 首先通过半定量 RT-PCR 的方法检测 AtBN3 在各种诱导下的表达结果的变化。结果表明，该基因在热、冷、盐和渗透胁迫中，基因的表达量与对照相比都有显著的变化，而在油菜素内酯合成缺陷突变体 det2 中，这种变化的差异明显变小。因此，我们推测 AtBN3 基因是一个拟南芥中与抗逆相关的基因，并且它在逆境下的表达完全由内源 BR 水平调节。 我们又以拟南芥野生型 Col-0，油菜素内酯合成缺陷突变体 det2 和油菜素内酯信号传递突变体 bril-5 三种植株为材料，用BR、NO 的供体
34、GSNO 和 NO 的清除剂 cPTIO 这三种试剂的不同组合处理这三种材料。 结果显示，AtBN3 是一个 NO 与 BR 共同调控的基因。BR 和 NO 对 AtBN3都具有正向调控作用，但是与处理时间相关。 内源 BR 或 NO 的缺失，对该基因的表达都会产生影响。BR 对该基因的诱导受内源 NO 水平的影响；NO 对该基因的诱导也受内源 BR 水平的影响。我们还推测 AtBN3 可能是位于 BR 传递途径中受体下游的一个调控因子。 我们通过半定量 RT-PCR 法检测了 AtBN3 的组织表达特异性。结果显示，其在茎中表达量最高，根中次之，叶和花中最少。 用 Gateway 技术构建了
35、三个不同的载体：用于研究 AtBN3 组织表达特异性的pBN3：GUS 启动子融合表达载体，AtBN3-GFP 亚细胞定位表达载体，以及 ox-AtBN3 过表达载体。 本实验为进一步研究 AtBN3 的生物学功能奠定了基础。拟南芥是第一个完成全基因组测序的高等植物，但到目前为止，仍有大量基因的功能有待我们去探索。随着反向遗传学的发展和现代分子生物学技术的进步，这些功能未知基因的定位、基因功能的分析，基因的表达与调控的研究正越来越得到人们的重视。 本研究通过基因工程、分子生物学等手段来研究拟南芥基因组中的未知功能基因 AtBN3(受 BR-NO 调节的基因)。AtBN3 位于拟南芥第四条染色体
36、上，全长 2071bp，基因内部不含内含子。该基因所编码的蛋白序列有652 个氨基酸。生物信息学分析结果显示该基因可能响应各种逆境胁迫的应答，而且对 BR 等各种植物激素的信号具有敏感性。同时，启动子顺式调控元件中包含多个胁迫应答相关元件。本论文通过分子生物学实验方法研究了该基因在各种胁迫条件下的表达，同时研究了 BR 和 NO 对该基因表达的影响。 首先通过半定量 RT-PCR 的方法检测 AtBN3 在各种诱导下的表达结果的变化。结果表明，该基因在热、冷、盐和渗透胁迫中，基因的表达量与对照相比都有显著的变化，而在油菜素内酯合成缺陷突变体 det2 中，这种变化的差异明显变小。因此，我们推测
37、 AtBN3 基因是一个拟南芥中与抗逆相关的基因，并且它在逆境下的表达完全由内源 BR 水平调节。 我们又以拟南芥野生型 Col-0，油菜素内酯合成缺陷突变体 det2 和油菜素内酯信号传递突变体 bril-5 三种植株为材料，用BR、NO 的供体 GSNO 和 NO 的清除剂 cPTIO 这三种试剂的不同组合处理这三种材料。 结果显示，AtBN3 是一个 NO 与 BR 共同调控的基因。BR 和 NO 对 AtBN3都具有正向调控作用，但是与处理时间相关。 内源 BR 或 NO 的缺失，对该基因的表达都会产生影响。BR 对该基因的诱导受内源 NO 水平的影响；NO 对该基因的诱导也受内源 B
38、R 水平的影响。我们还推测 AtBN3 可能是位于 BR 传递途径中受体下游的一个调控因子。 我们通过半定量 RT-PCR 法检测了 AtBN3 的组织表达特异性。结果显示，其在茎中表达量最高，根中次之，叶和花中最少。 用 Gateway 技术构建了三个不同的载体：用于研究 AtBN3 组织表达特异性的pBN3：GUS 启动子融合表达载体，AtBN3-GFP 亚细胞定位表达载体，以及 ox-AtBN3 过表达载体。 本实验为进一步研究 AtBN3 的生物学功能奠定了基础。特别提醒 ：正文内容由 PDF 文件转码生成，如您电脑未有相应转换码，则无法显示正文内容，请您下载相应软件，下载地址为 ht
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