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抗真菌抗生素生产过程中利迪链霉菌蛋白质组研究.doc

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1、生物化工专业毕业论文 精品论文 抗真菌抗生素生产过程中利迪链霉菌蛋白质组研究关键词:利迪链霉菌 抗真菌活性物 蛋白质组 代谢物组 抗真菌抗生素摘要:为了更好地研究利迪链霉菌 AS4.2501(StreptomyceslydicusAS4.2501)生产抗真菌生物活性物过程中细胞的生理和生产特性,本文以S.lydicusAS4.2501 为研究体系,通过考察细胞生产抗真菌活性物质的能力、放大培养过程中细胞内外蛋白组、小分子代谢物,试图从蛋白质组角度探索抗真菌活性物生产过程中细胞生理和生产特性。 运用菌丝块法对利迪链霉菌菌丝体、胞外分泌物的抗真菌生物活性进行考察,结果表明无论是菌丝体还是胞外分泌物

2、,S.lydicusE9 的抗真菌活性均高于 S.lydicusAS4.2501。 2-DE 分析表明,在摇瓶培养条件下 S.lydicusAS4.2501 与高产菌株 S.lydicusE9 的胞内、胞外蛋白质变化差异明显。对 22 个差异显著的蛋白点进行 MALDI-TOF-MS鉴定,它们是 tetR 家族调节蛋白、CIp 样 ATP 依赖性蛋白酶亚基、磷酸甘油变位酶、磷脂酶、5-脱氧嘧苷三磷酸核苷酸脱水酶、聚磷酸盐葡糖激酶、6-磷酸葡萄糖脱氢酶等,这些蛋白涉及基因翻译转录调节、糖类代谢、磷脂代谢及抗真菌活性物的合成等功能。 进一步考察了高产菌株 S.lydicusE9 从摇瓶到2L 和

3、30L 放大过程中,不同的发酵阶段细胞胞内、外蛋白组的变化,结果表明生长和生产的不同阶段蛋白质的表达存在明显的差异。MALDI-TOF-MS 鉴定了不同阶段差异显著的 32 个蛋白点,这些蛋白包括乙酰辅酶 A 乙酰转移酶、羧化酶、乙酰转移酶和鸟氨酸氨基甲酰转移酶等在聚酮途径中具有重要作用的蛋白和腺嘌呤磷酸核糖基转移酶、谷氨酸盐合成酶等,结果表明这种抗真菌活性物质的生产可能是通过聚酮途径合成来实现的。 利用 GC-TOF-MS 对S.lydicusAS4.2501 和 S.lydicusE9 的小分子代谢物进行了研究,通过 PCA 分析,初步鉴定出了五种对 PCA 聚类影响较大的物质,分别是丙三

4、醇、丁四醇、D-半乳糖、葡萄糖醇、D-松二糖。其在抗真菌活性物质生产中的作用有待进一步研究。正文内容为了更好地研究利迪链霉菌 AS4.2501(StreptomyceslydicusAS4.2501)生产抗真菌生物活性物过程中细胞的生理和生产特性,本文以S.lydicusAS4.2501 为研究体系,通过考察细胞生产抗真菌活性物质的能力、放大培养过程中细胞内外蛋白组、小分子代谢物,试图从蛋白质组角度探索抗真菌活性物生产过程中细胞生理和生产特性。 运用菌丝块法对利迪链霉菌菌丝体、胞外分泌物的抗真菌生物活性进行考察,结果表明无论是菌丝体还是胞外分泌物,S.lydicusE9 的抗真菌活性均高于 S

5、.lydicusAS4.2501。 2-DE 分析表明,在摇瓶培养条件下 S.lydicusAS4.2501 与高产菌株 S.lydicusE9 的胞内、胞外蛋白质变化差异明显。对 22 个差异显著的蛋白点进行 MALDI-TOF-MS鉴定,它们是 tetR 家族调节蛋白、CIp 样 ATP 依赖性蛋白酶亚基、磷酸甘油变位酶、磷脂酶、5-脱氧嘧苷三磷酸核苷酸脱水酶、聚磷酸盐葡糖激酶、6-磷酸葡萄糖脱氢酶等,这些蛋白涉及基因翻译转录调节、糖类代谢、磷脂代谢及抗真菌活性物的合成等功能。 进一步考察了高产菌株 S.lydicusE9 从摇瓶到2L 和 30L 放大过程中,不同的发酵阶段细胞胞内、外蛋

6、白组的变化,结果表明生长和生产的不同阶段蛋白质的表达存在明显的差异。MALDI-TOF-MS 鉴定了不同阶段差异显著的 32 个蛋白点,这些蛋白包括乙酰辅酶 A 乙酰转移酶、羧化酶、乙酰转移酶和鸟氨酸氨基甲酰转移酶等在聚酮途径中具有重要作用的蛋白和腺嘌呤磷酸核糖基转移酶、谷氨酸盐合成酶等,结果表明这种抗真菌活性物质的生产可能是通过聚酮途径合成来实现的。 利用 GC-TOF-MS 对S.lydicusAS4.2501 和 S.lydicusE9 的小分子代谢物进行了研究,通过 PCA 分析,初步鉴定出了五种对 PCA 聚类影响较大的物质,分别是丙三醇、丁四醇、D-半乳糖、葡萄糖醇、D-松二糖。其

7、在抗真菌活性物质生产中的作用有待进一步研究。为了更好地研究利迪链霉菌 AS4.2501(StreptomyceslydicusAS4.2501)生产抗真菌生物活性物过程中细胞的生理和生产特性,本文以 S.lydicusAS4.2501 为研究体系,通过考察细胞生产抗真菌活性物质的能力、放大培养过程中细胞内外蛋白组、小分子代谢物,试图从蛋白质组角度探索抗真菌活性物生产过程中细胞生理和生产特性。 运用菌丝块法对利迪链霉菌菌丝体、胞外分泌物的抗真菌生物活性进行考察,结果表明无论是菌丝体还是胞外分泌物,S.lydicusE9的抗真菌活性均高于 S.lydicusAS4.2501。 2-DE 分析表明,

8、在摇瓶培养条件下 S.lydicusAS4.2501 与高产菌株 S.lydicusE9 的胞内、胞外蛋白质变化差异明显。对 22 个差异显著的蛋白点进行 MALDI-TOF-MS 鉴定,它们是 tetR 家族调节蛋白、CIp 样 ATP 依赖性蛋白酶亚基、磷酸甘油变位酶、磷脂酶、5-脱氧嘧苷三磷酸核苷酸脱水酶、聚磷酸盐葡糖激酶、6-磷酸葡萄糖脱氢酶等,这些蛋白涉及基因翻译转录调节、糖类代谢、磷脂代谢及抗真菌活性物的合成等功能。 进一步考察了高产菌株 S.lydicusE9 从摇瓶到 2L 和 30L 放大过程中,不同的发酵阶段细胞胞内、外蛋白组的变化,结果表明生长和生产的不同阶段蛋白质的表达

9、存在明显的差异。MALDI-TOF-MS 鉴定了不同阶段差异显著的 32个蛋白点,这些蛋白包括乙酰辅酶 A 乙酰转移酶、羧化酶、乙酰转移酶和鸟氨酸氨基甲酰转移酶等在聚酮途径中具有重要作用的蛋白和腺嘌呤磷酸核糖基转移酶、谷氨酸盐合成酶等,结果表明这种抗真菌活性物质的生产可能是通过聚酮途径合成来实现的。 利用 GC-TOF-MS 对 S.lydicusAS4.2501 和S.lydicusE9 的小分子代谢物进行了研究,通过 PCA 分析,初步鉴定出了五种对 PCA 聚类影响较大的物质,分别是丙三醇、丁四醇、D-半乳糖、葡萄糖醇、D-松二糖。其在抗真菌活性物质生产中的作用有待进一步研究。为了更好地

10、研究利迪链霉菌 AS4.2501(StreptomyceslydicusAS4.2501)生产抗真菌生物活性物过程中细胞的生理和生产特性,本文以 S.lydicusAS4.2501 为研究体系,通过考察细胞生产抗真菌活性物质的能力、放大培养过程中细胞内外蛋白组、小分子代谢物,试图从蛋白质组角度探索抗真菌活性物生产过程中细胞生理和生产特性。 运用菌丝块法对利迪链霉菌菌丝体、胞外分泌物的抗真菌生物活性进行考察,结果表明无论是菌丝体还是胞外分泌物,S.lydicusE9的抗真菌活性均高于 S.lydicusAS4.2501。 2-DE 分析表明,在摇瓶培养条件下 S.lydicusAS4.2501

11、与高产菌株 S.lydicusE9 的胞内、胞外蛋白质变化差异明显。对 22 个差异显著的蛋白点进行 MALDI-TOF-MS 鉴定,它们是 tetR 家族调节蛋白、CIp 样 ATP 依赖性蛋白酶亚基、磷酸甘油变位酶、磷脂酶、5-脱氧嘧苷三磷酸核苷酸脱水酶、聚磷酸盐葡糖激酶、6-磷酸葡萄糖脱氢酶等,这些蛋白涉及基因翻译转录调节、糖类代谢、磷脂代谢及抗真菌活性物的合成等功能。 进一步考察了高产菌株 S.lydicusE9 从摇瓶到 2L 和 30L 放大过程中,不同的发酵阶段细胞胞内、外蛋白组的变化,结果表明生长和生产的不同阶段蛋白质的表达存在明显的差异。MALDI-TOF-MS 鉴定了不同阶

12、段差异显著的 32个蛋白点,这些蛋白包括乙酰辅酶 A 乙酰转移酶、羧化酶、乙酰转移酶和鸟氨酸氨基甲酰转移酶等在聚酮途径中具有重要作用的蛋白和腺嘌呤磷酸核糖基转移酶、谷氨酸盐合成酶等,结果表明这种抗真菌活性物质的生产可能是通过聚酮途径合成来实现的。 利用 GC-TOF-MS 对 S.lydicusAS4.2501 和S.lydicusE9 的小分子代谢物进行了研究,通过 PCA 分析,初步鉴定出了五种对 PCA 聚类影响较大的物质,分别是丙三醇、丁四醇、D-半乳糖、葡萄糖醇、D-松二糖。其在抗真菌活性物质生产中的作用有待进一步研究。为了更好地研究利迪链霉菌 AS4.2501(Streptomyc

13、eslydicusAS4.2501)生产抗真菌生物活性物过程中细胞的生理和生产特性,本文以 S.lydicusAS4.2501 为研究体系,通过考察细胞生产抗真菌活性物质的能力、放大培养过程中细胞内外蛋白组、小分子代谢物,试图从蛋白质组角度探索抗真菌活性物生产过程中细胞生理和生产特性。 运用菌丝块法对利迪链霉菌菌丝体、胞外分泌物的抗真菌生物活性进行考察,结果表明无论是菌丝体还是胞外分泌物,S.lydicusE9的抗真菌活性均高于 S.lydicusAS4.2501。 2-DE 分析表明,在摇瓶培养条件下 S.lydicusAS4.2501 与高产菌株 S.lydicusE9 的胞内、胞外蛋白质

14、变化差异明显。对 22 个差异显著的蛋白点进行 MALDI-TOF-MS 鉴定,它们是 tetR 家族调节蛋白、CIp 样 ATP 依赖性蛋白酶亚基、磷酸甘油变位酶、磷脂酶、5-脱氧嘧苷三磷酸核苷酸脱水酶、聚磷酸盐葡糖激酶、6-磷酸葡萄糖脱氢酶等,这些蛋白涉及基因翻译转录调节、糖类代谢、磷脂代谢及抗真菌活性物的合成等功能。 进一步考察了高产菌株 S.lydicusE9 从摇瓶到 2L 和 30L 放大过程中,不同的发酵阶段细胞胞内、外蛋白组的变化,结果表明生长和生产的不同阶段蛋白质的表达存在明显的差异。MALDI-TOF-MS 鉴定了不同阶段差异显著的 32个蛋白点,这些蛋白包括乙酰辅酶 A

15、乙酰转移酶、羧化酶、乙酰转移酶和鸟氨酸氨基甲酰转移酶等在聚酮途径中具有重要作用的蛋白和腺嘌呤磷酸核糖基转移酶、谷氨酸盐合成酶等,结果表明这种抗真菌活性物质的生产可能是通过聚酮途径合成来实现的。 利用 GC-TOF-MS 对 S.lydicusAS4.2501 和S.lydicusE9 的小分子代谢物进行了研究,通过 PCA 分析,初步鉴定出了五种对 PCA 聚类影响较大的物质,分别是丙三醇、丁四醇、D-半乳糖、葡萄糖醇、D-松二糖。其在抗真菌活性物质生产中的作用有待进一步研究。为了更好地研究利迪链霉菌 AS4.2501(StreptomyceslydicusAS4.2501)生产抗真菌生物活性

16、物过程中细胞的生理和生产特性,本文以 S.lydicusAS4.2501 为研究体系,通过考察细胞生产抗真菌活性物质的能力、放大培养过程中细胞内外蛋白组、小分子代谢物,试图从蛋白质组角度探索抗真菌活性物生产过程中细胞生理和生产特性。 运用菌丝块法对利迪链霉菌菌丝体、胞外分泌物的抗真菌生物活性进行考察,结果表明无论是菌丝体还是胞外分泌物,S.lydicusE9的抗真菌活性均高于 S.lydicusAS4.2501。 2-DE 分析表明,在摇瓶培养条件下 S.lydicusAS4.2501 与高产菌株 S.lydicusE9 的胞内、胞外蛋白质变化差异明显。对 22 个差异显著的蛋白点进行 MAL

17、DI-TOF-MS 鉴定,它们是 tetR 家族调节蛋白、CIp 样 ATP 依赖性蛋白酶亚基、磷酸甘油变位酶、磷脂酶、5-脱氧嘧苷三磷酸核苷酸脱水酶、聚磷酸盐葡糖激酶、6-磷酸葡萄糖脱氢酶等,这些蛋白涉及基因翻译转录调节、糖类代谢、磷脂代谢及抗真菌活性物的合成等功能。 进一步考察了高产菌株 S.lydicusE9 从摇瓶到 2L 和 30L 放大过程中,不同的发酵阶段细胞胞内、外蛋白组的变化,结果表明生长和生产的不同阶段蛋白质的表达存在明显的差异。MALDI-TOF-MS 鉴定了不同阶段差异显著的 32个蛋白点,这些蛋白包括乙酰辅酶 A 乙酰转移酶、羧化酶、乙酰转移酶和鸟氨酸氨基甲酰转移酶等

18、在聚酮途径中具有重要作用的蛋白和腺嘌呤磷酸核糖基转移酶、谷氨酸盐合成酶等,结果表明这种抗真菌活性物质的生产可能是通过聚酮途径合成来实现的。 利用 GC-TOF-MS 对 S.lydicusAS4.2501 和S.lydicusE9 的小分子代谢物进行了研究,通过 PCA 分析,初步鉴定出了五种对 PCA 聚类影响较大的物质,分别是丙三醇、丁四醇、D-半乳糖、葡萄糖醇、D-松二糖。其在抗真菌活性物质生产中的作用有待进一步研究。为了更好地研究利迪链霉菌 AS4.2501(StreptomyceslydicusAS4.2501)生产抗真菌生物活性物过程中细胞的生理和生产特性,本文以 S.lydicu

19、sAS4.2501 为研究体系,通过考察细胞生产抗真菌活性物质的能力、放大培养过程中细胞内外蛋白组、小分子代谢物,试图从蛋白质组角度探索抗真菌活性物生产过程中细胞生理和生产特性。 运用菌丝块法对利迪链霉菌菌丝体、胞外分泌物的抗真菌生物活性进行考察,结果表明无论是菌丝体还是胞外分泌物,S.lydicusE9的抗真菌活性均高于 S.lydicusAS4.2501。 2-DE 分析表明,在摇瓶培养条件下 S.lydicusAS4.2501 与高产菌株 S.lydicusE9 的胞内、胞外蛋白质变化差异明显。对 22 个差异显著的蛋白点进行 MALDI-TOF-MS 鉴定,它们是 tetR 家族调节蛋

20、白、CIp 样 ATP 依赖性蛋白酶亚基、磷酸甘油变位酶、磷脂酶、5-脱氧嘧苷三磷酸核苷酸脱水酶、聚磷酸盐葡糖激酶、6-磷酸葡萄糖脱氢酶等,这些蛋白涉及基因翻译转录调节、糖类代谢、磷脂代谢及抗真菌活性物的合成等功能。 进一步考察了高产菌株 S.lydicusE9 从摇瓶到 2L 和 30L 放大过程中,不同的发酵阶段细胞胞内、外蛋白组的变化,结果表明生长和生产的不同阶段蛋白质的表达存在明显的差异。MALDI-TOF-MS 鉴定了不同阶段差异显著的 32个蛋白点,这些蛋白包括乙酰辅酶 A 乙酰转移酶、羧化酶、乙酰转移酶和鸟氨酸氨基甲酰转移酶等在聚酮途径中具有重要作用的蛋白和腺嘌呤磷酸核糖基转移酶

21、、谷氨酸盐合成酶等,结果表明这种抗真菌活性物质的生产可能是通过聚酮途径合成来实现的。 利用 GC-TOF-MS 对 S.lydicusAS4.2501 和S.lydicusE9 的小分子代谢物进行了研究,通过 PCA 分析,初步鉴定出了五种对 PCA 聚类影响较大的物质,分别是丙三醇、丁四醇、D-半乳糖、葡萄糖醇、D-松二糖。其在抗真菌活性物质生产中的作用有待进一步研究。为了更好地研究利迪链霉菌 AS4.2501(StreptomyceslydicusAS4.2501)生产抗真菌生物活性物过程中细胞的生理和生产特性,本文以 S.lydicusAS4.2501 为研究体系,通过考察细胞生产抗真菌

22、活性物质的能力、放大培养过程中细胞内外蛋白组、小分子代谢物,试图从蛋白质组角度探索抗真菌活性物生产过程中细胞生理和生产特性。 运用菌丝块法对利迪链霉菌菌丝体、胞外分泌物的抗真菌生物活性进行考察,结果表明无论是菌丝体还是胞外分泌物,S.lydicusE9的抗真菌活性均高于 S.lydicusAS4.2501。 2-DE 分析表明,在摇瓶培养条件下 S.lydicusAS4.2501 与高产菌株 S.lydicusE9 的胞内、胞外蛋白质变化差异明显。对 22 个差异显著的蛋白点进行 MALDI-TOF-MS 鉴定,它们是 tetR 家族调节蛋白、CIp 样 ATP 依赖性蛋白酶亚基、磷酸甘油变位

23、酶、磷脂酶、5-脱氧嘧苷三磷酸核苷酸脱水酶、聚磷酸盐葡糖激酶、6-磷酸葡萄糖脱氢酶等,这些蛋白涉及基因翻译转录调节、糖类代谢、磷脂代谢及抗真菌活性物的合成等功能。 进一步考察了高产菌株 S.lydicusE9 从摇瓶到 2L 和 30L 放大过程中,不同的发酵阶段细胞胞内、外蛋白组的变化,结果表明生长和生产的不同阶段蛋白质的表达存在明显的差异。MALDI-TOF-MS 鉴定了不同阶段差异显著的 32个蛋白点,这些蛋白包括乙酰辅酶 A 乙酰转移酶、羧化酶、乙酰转移酶和鸟氨酸氨基甲酰转移酶等在聚酮途径中具有重要作用的蛋白和腺嘌呤磷酸核糖基转移酶、谷氨酸盐合成酶等,结果表明这种抗真菌活性物质的生产可

24、能是通过聚酮途径合成来实现的。 利用 GC-TOF-MS 对 S.lydicusAS4.2501 和S.lydicusE9 的小分子代谢物进行了研究,通过 PCA 分析,初步鉴定出了五种对 PCA 聚类影响较大的物质,分别是丙三醇、丁四醇、D-半乳糖、葡萄糖醇、D-松二糖。其在抗真菌活性物质生产中的作用有待进一步研究。为了更好地研究利迪链霉菌 AS4.2501(StreptomyceslydicusAS4.2501)生产抗真菌生物活性物过程中细胞的生理和生产特性,本文以 S.lydicusAS4.2501 为研究体系,通过考察细胞生产抗真菌活性物质的能力、放大培养过程中细胞内外蛋白组、小分子代

25、谢物,试图从蛋白质组角度探索抗真菌活性物生产过程中细胞生理和生产特性。 运用菌丝块法对利迪链霉菌菌丝体、胞外分泌物的抗真菌生物活性进行考察,结果表明无论是菌丝体还是胞外分泌物,S.lydicusE9的抗真菌活性均高于 S.lydicusAS4.2501。 2-DE 分析表明,在摇瓶培养条件下 S.lydicusAS4.2501 与高产菌株 S.lydicusE9 的胞内、胞外蛋白质变化差异明显。对 22 个差异显著的蛋白点进行 MALDI-TOF-MS 鉴定,它们是 tetR 家族调节蛋白、CIp 样 ATP 依赖性蛋白酶亚基、磷酸甘油变位酶、磷脂酶、5-脱氧嘧苷三磷酸核苷酸脱水酶、聚磷酸盐葡

26、糖激酶、6-磷酸葡萄糖脱氢酶等,这些蛋白涉及基因翻译转录调节、糖类代谢、磷脂代谢及抗真菌活性物的合成等功能。 进一步考察了高产菌株 S.lydicusE9 从摇瓶到 2L 和 30L 放大过程中,不同的发酵阶段细胞胞内、外蛋白组的变化,结果表明生长和生产的不同阶段蛋白质的表达存在明显的差异。MALDI-TOF-MS 鉴定了不同阶段差异显著的 32个蛋白点,这些蛋白包括乙酰辅酶 A 乙酰转移酶、羧化酶、乙酰转移酶和鸟氨酸氨基甲酰转移酶等在聚酮途径中具有重要作用的蛋白和腺嘌呤磷酸核糖基转移酶、谷氨酸盐合成酶等,结果表明这种抗真菌活性物质的生产可能是通过聚酮途径合成来实现的。 利用 GC-TOF-M

27、S 对 S.lydicusAS4.2501 和S.lydicusE9 的小分子代谢物进行了研究,通过 PCA 分析,初步鉴定出了五种对 PCA 聚类影响较大的物质,分别是丙三醇、丁四醇、D-半乳糖、葡萄糖醇、D-松二糖。其在抗真菌活性物质生产中的作用有待进一步研究。为了更好地研究利迪链霉菌 AS4.2501(StreptomyceslydicusAS4.2501)生产抗真菌生物活性物过程中细胞的生理和生产特性,本文以 S.lydicusAS4.2501 为研究体系,通过考察细胞生产抗真菌活性物质的能力、放大培养过程中细胞内外蛋白组、小分子代谢物,试图从蛋白质组角度探索抗真菌活性物生产过程中细胞

28、生理和生产特性。 运用菌丝块法对利迪链霉菌菌丝体、胞外分泌物的抗真菌生物活性进行考察,结果表明无论是菌丝体还是胞外分泌物,S.lydicusE9的抗真菌活性均高于 S.lydicusAS4.2501。 2-DE 分析表明,在摇瓶培养条件下 S.lydicusAS4.2501 与高产菌株 S.lydicusE9 的胞内、胞外蛋白质变化差异明显。对 22 个差异显著的蛋白点进行 MALDI-TOF-MS 鉴定,它们是 tetR 家族调节蛋白、CIp 样 ATP 依赖性蛋白酶亚基、磷酸甘油变位酶、磷脂酶、5-脱氧嘧苷三磷酸核苷酸脱水酶、聚磷酸盐葡糖激酶、6-磷酸葡萄糖脱氢酶等,这些蛋白涉及基因翻译转

29、录调节、糖类代谢、磷脂代谢及抗真菌活性物的合成等功能。 进一步考察了高产菌株 S.lydicusE9 从摇瓶到 2L 和 30L 放大过程中,不同的发酵阶段细胞胞内、外蛋白组的变化,结果表明生长和生产的不同阶段蛋白质的表达存在明显的差异。MALDI-TOF-MS 鉴定了不同阶段差异显著的 32个蛋白点,这些蛋白包括乙酰辅酶 A 乙酰转移酶、羧化酶、乙酰转移酶和鸟氨酸氨基甲酰转移酶等在聚酮途径中具有重要作用的蛋白和腺嘌呤磷酸核糖基转移酶、谷氨酸盐合成酶等,结果表明这种抗真菌活性物质的生产可能是通过聚酮途径合成来实现的。 利用 GC-TOF-MS 对 S.lydicusAS4.2501 和S.ly

30、dicusE9 的小分子代谢物进行了研究,通过 PCA 分析,初步鉴定出了五种对 PCA 聚类影响较大的物质,分别是丙三醇、丁四醇、D-半乳糖、葡萄糖醇、D-松二糖。其在抗真菌活性物质生产中的作用有待进一步研究。为了更好地研究利迪链霉菌 AS4.2501(StreptomyceslydicusAS4.2501)生产抗真菌生物活性物过程中细胞的生理和生产特性,本文以 S.lydicusAS4.2501 为研究体系,通过考察细胞生产抗真菌活性物质的能力、放大培养过程中细胞内外蛋白组、小分子代谢物,试图从蛋白质组角度探索抗真菌活性物生产过程中细胞生理和生产特性。 运用菌丝块法对利迪链霉菌菌丝体、胞外

31、分泌物的抗真菌生物活性进行考察,结果表明无论是菌丝体还是胞外分泌物,S.lydicusE9的抗真菌活性均高于 S.lydicusAS4.2501。 2-DE 分析表明,在摇瓶培养条件下 S.lydicusAS4.2501 与高产菌株 S.lydicusE9 的胞内、胞外蛋白质变化差异明显。对 22 个差异显著的蛋白点进行 MALDI-TOF-MS 鉴定,它们是 tetR 家族调节蛋白、CIp 样 ATP 依赖性蛋白酶亚基、磷酸甘油变位酶、磷脂酶、5-脱氧嘧苷三磷酸核苷酸脱水酶、聚磷酸盐葡糖激酶、6-磷酸葡萄糖脱氢酶等,这些蛋白涉及基因翻译转录调节、糖类代谢、磷脂代谢及抗真菌活性物的合成等功能。

32、 进一步考察了高产菌株 S.lydicusE9 从摇瓶到 2L 和 30L 放大过程中,不同的发酵阶段细胞胞内、外蛋白组的变化,结果表明生长和生产的不同阶段蛋白质的表达存在明显的差异。MALDI-TOF-MS 鉴定了不同阶段差异显著的 32个蛋白点,这些蛋白包括乙酰辅酶 A 乙酰转移酶、羧化酶、乙酰转移酶和鸟氨酸氨基甲酰转移酶等在聚酮途径中具有重要作用的蛋白和腺嘌呤磷酸核糖基转移酶、谷氨酸盐合成酶等,结果表明这种抗真菌活性物质的生产可能是通过聚酮途径合成来实现的。 利用 GC-TOF-MS 对 S.lydicusAS4.2501 和S.lydicusE9 的小分子代谢物进行了研究,通过 PCA

33、 分析,初步鉴定出了五种对 PCA 聚类影响较大的物质,分别是丙三醇、丁四醇、D-半乳糖、葡萄糖醇、D-松二糖。其在抗真菌活性物质生产中的作用有待进一步研究。特别提醒 :正文内容由 PDF 文件转码生成,如您电脑未有相应转换码,则无法显示正文内容,请您下载相应软件,下载地址为 http:/ 。如还不能显示,可以联系我 q q 1627550258 ,提供原格式文档。“垐垯櫃 换烫梯葺铑?endstreamendobj2x 滌?U 閩 AZ箾 FTP 鈦X 飼?狛P? 燚?琯嫼 b?袍*甒?颙嫯?4)=r 宵?i?j 彺帖 B3 锝檡骹笪 yLrQ#?0 鯖 l 壛枒l 壛枒 l 壛枒 l 壛枒 l 壛枒 l 壛枒 l 壛枒 l 壛枒 l 壛枒 l 壛枒 l 壛枒 l 壛渓?擗#?“?# 綫 G 刿#K 芿$?7. 耟?Wa 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 皗 E|?pDb 癳$Fb 癳$Fb癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$F?責鯻 0 橔 C,f 薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵秾腵薍秾腵%?秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍

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