1、动物遗传育种与繁殖专业优秀论文 小鼠卵细胞质对供体核 DNA 甲基化和“印记”基因表达的调控关键词：卵细胞质 DNA 甲基化 基因组印记 基因表达 核重序 U2afbp-rs摘要：为了区分核移植重组胚中所表达的 U2afbp-rs 基因是来源于父源还是母源的，本文作者利用单核苷酸单链构象多态性(SSCP)方法检测KM、B6、Balb/c、129S1、C3H、DBA 和 A/J 品系中小鼠 U2afbp-rs 基因的多态性，以检测出这些品系小鼠间可能存在的多态位点；利用细胞核移植技术将NIH3T3 细胞核和孤雌桑椹胚单个卵裂球分别移植到去核 M期受体卵母细胞中，通过免疫荧光染色后比较体外受精胚、
2、孤雌胚、NIH3T3 核移植重组胚和孤雌桑椹胚核移植重组胚附殖前各时期胚胎 DNA 甲基化水平的变化，以探明克隆胚细胞核去分化与 DNA 甲基化的相互关系；利用 Real-time PCR 技术检测体外受精胚、孤雌胚和孤雌桑椹胚核移植重组胚附殖前各时期胚胎中印记基因 U2afbp-rs 基因以及非印记基因 eIF-4C 基因表达量的变化，以探明小鼠卵细胞质对克隆胚细胞核中印记基因表达的调控。结果表明： 1尽管国外有文献报道了U2afbp-rs 基因在 C57BL/6J 和 PWK 品系间存在着丰富的多态位点，但这些位点在本研究所检测的小鼠品系中并不存在多态性，提示 U2afbp-rs 基因可能
3、在KM、B6、Balb/c、129S1、C3H、DBA 和 A/J 品系小鼠中并不存在多态位点。 2体外受精胚中印记基因 U2afbp-rs 和非印记基因 eIF-4C 都正常表达，它们在小鼠 ZGA 时期都发生瞬时高表达。但在孤雌胚中，U2afbp-rs 和 eIF-4C 基因都出现异常的表达模式，这可能是 DNA 甲基化与染色质结构改变的相互影响所导致的，染色质的重构在印记基因以及非印记基因的表达中都起着重要的调控作用。 3孤雌桑椹胚核移植重组胚中 U2afbp-rs 基因和 eIF-4C 基因的表达水平要显著低于对照孤雌胚，但其表达量变化规律与对照孤雌胚相同，说明了卵细胞质对供体核印记基
4、因的表达具有一定的调控作用。 4NIH3T3 体细胞核移植重组胚和孤雌桑椹胚核移植重组胚中供体核基因组 DNA 在核移植后无显著变化，说明了克隆胚基因组 DNA 的主动去甲基化不完全。正文内容为了区分核移植重组胚中所表达的 U2afbp-rs 基因是来源于父源还是母源的，本文作者利用单核苷酸单链构象多态性(SSCP)方法检测KM、B6、Balb/c、129S1、C3H、DBA 和 A/J 品系中小鼠 U2afbp-rs 基因的多态性，以检测出这些品系小鼠间可能存在的多态位点；利用细胞核移植技术将NIH3T3 细胞核和孤雌桑椹胚单个卵裂球分别移植到去核 M期受体卵母细胞中，通过免疫荧光染色后比较
5、体外受精胚、孤雌胚、NIH3T3 核移植重组胚和孤雌桑椹胚核移植重组胚附殖前各时期胚胎 DNA 甲基化水平的变化，以探明克隆胚细胞核去分化与 DNA 甲基化的相互关系；利用 Real-time PCR 技术检测体外受精胚、孤雌胚和孤雌桑椹胚核移植重组胚附殖前各时期胚胎中印记基因 U2afbp-rs 基因以及非印记基因 eIF-4C 基因表达量的变化，以探明小鼠卵细胞质对克隆胚细胞核中印记基因表达的调控。结果表明： 1尽管国外有文献报道了U2afbp-rs 基因在 C57BL/6J 和 PWK 品系间存在着丰富的多态位点，但这些位点在本研究所检测的小鼠品系中并不存在多态性，提示 U2afbp-r
6、s 基因可能在KM、B6、Balb/c、129S1、C3H、DBA 和 A/J 品系小鼠中并不存在多态位点。 2体外受精胚中印记基因 U2afbp-rs 和非印记基因 eIF-4C 都正常表达，它们在小鼠 ZGA 时期都发生瞬时高表达。但在孤雌胚中，U2afbp-rs 和 eIF-4C 基因都出现异常的表达模式，这可能是 DNA 甲基化与染色质结构改变的相互影响所导致的，染色质的重构在印记基因以及非印记基因的表达中都起着重要的调控作用。 3孤雌桑椹胚核移植重组胚中 U2afbp-rs 基因和 eIF-4C 基因的表达水平要显著低于对照孤雌胚，但其表达量变化规律与对照孤雌胚相同，说明了卵细胞质对
7、供体核印记基因的表达具有一定的调控作用。 4NIH3T3 体细胞核移植重组胚和孤雌桑椹胚核移植重组胚中供体核基因组 DNA 在核移植后无显著变化，说明了克隆胚基因组 DNA 的主动去甲基化不完全。为了区分核移植重组胚中所表达的 U2afbp-rs 基因是来源于父源还是母源的，本文作者利用单核苷酸单链构象多态性(SSCP)方法检测KM、B6、Balb/c、129S1、C3H、DBA 和 A/J 品系中小鼠 U2afbp-rs 基因的多态性，以检测出这些品系小鼠间可能存在的多态位点；利用细胞核移植技术将NIH3T3 细胞核和孤雌桑椹胚单个卵裂球分别移植到去核 M期受体卵母细胞中，通过免疫荧光染色后
8、比较体外受精胚、孤雌胚、NIH3T3 核移植重组胚和孤雌桑椹胚核移植重组胚附殖前各时期胚胎 DNA 甲基化水平的变化，以探明克隆胚细胞核去分化与 DNA 甲基化的相互关系；利用 Real-time PCR 技术检测体外受精胚、孤雌胚和孤雌桑椹胚核移植重组胚附殖前各时期胚胎中印记基因 U2afbp-rs 基因以及非印记基因 eIF-4C 基因表达量的变化，以探明小鼠卵细胞质对克隆胚细胞核中印记基因表达的调控。结果表明： 1尽管国外有文献报道了U2afbp-rs 基因在 C57BL/6J 和 PWK 品系间存在着丰富的多态位点，但这些位点在本研究所检测的小鼠品系中并不存在多态性，提示 U2afbp
9、-rs 基因可能在KM、B6、Balb/c、129S1、C3H、DBA 和 A/J 品系小鼠中并不存在多态位点。 2体外受精胚中印记基因 U2afbp-rs 和非印记基因 eIF-4C 都正常表达，它们在小鼠 ZGA 时期都发生瞬时高表达。但在孤雌胚中，U2afbp-rs 和 eIF-4C 基因都出现异常的表达模式，这可能是 DNA 甲基化与染色质结构改变的相互影响所导致的，染色质的重构在印记基因以及非印记基因的表达中都起着重要的调控作用。 3孤雌桑椹胚核移植重组胚中 U2afbp-rs 基因和 eIF-4C 基因的表达水平要显著低于对照孤雌胚，但其表达量变化规律与对照孤雌胚相同，说明了卵细胞
10、质对供体核印记基因的表达具有一定的调控作用。 4NIH3T3 体细胞核移植重组胚和孤雌桑椹胚核移植重组胚中供体核基因组 DNA 在核移植后无显著变化，说明了克隆胚基因组 DNA 的主动去甲基化不完全。为了区分核移植重组胚中所表达的 U2afbp-rs 基因是来源于父源还是母源的，本文作者利用单核苷酸单链构象多态性(SSCP)方法检测KM、B6、Balb/c、129S1、C3H、DBA 和 A/J 品系中小鼠 U2afbp-rs 基因的多态性，以检测出这些品系小鼠间可能存在的多态位点；利用细胞核移植技术将NIH3T3 细胞核和孤雌桑椹胚单个卵裂球分别移植到去核 M期受体卵母细胞中，通过免疫荧光染
11、色后比较体外受精胚、孤雌胚、NIH3T3 核移植重组胚和孤雌桑椹胚核移植重组胚附殖前各时期胚胎 DNA 甲基化水平的变化，以探明克隆胚细胞核去分化与 DNA 甲基化的相互关系；利用 Real-time PCR 技术检测体外受精胚、孤雌胚和孤雌桑椹胚核移植重组胚附殖前各时期胚胎中印记基因 U2afbp-rs 基因以及非印记基因 eIF-4C 基因表达量的变化，以探明小鼠卵细胞质对克隆胚细胞核中印记基因表达的调控。结果表明： 1尽管国外有文献报道了U2afbp-rs 基因在 C57BL/6J 和 PWK 品系间存在着丰富的多态位点，但这些位点在本研究所检测的小鼠品系中并不存在多态性，提示 U2af
12、bp-rs 基因可能在KM、B6、Balb/c、129S1、C3H、DBA 和 A/J 品系小鼠中并不存在多态位点。 2体外受精胚中印记基因 U2afbp-rs 和非印记基因 eIF-4C 都正常表达，它们在小鼠 ZGA 时期都发生瞬时高表达。但在孤雌胚中，U2afbp-rs 和 eIF-4C 基因都出现异常的表达模式，这可能是 DNA 甲基化与染色质结构改变的相互影响所导致的，染色质的重构在印记基因以及非印记基因的表达中都起着重要的调控作用。 3孤雌桑椹胚核移植重组胚中 U2afbp-rs 基因和 eIF-4C 基因的表达水平要显著低于对照孤雌胚，但其表达量变化规律与对照孤雌胚相同，说明了卵
13、细胞质对供体核印记基因的表达具有一定的调控作用。 4NIH3T3 体细胞核移植重组胚和孤雌桑椹胚核移植重组胚中供体核基因组 DNA 在核移植后无显著变化，说明了克隆胚基因组 DNA 的主动去甲基化不完全。为了区分核移植重组胚中所表达的 U2afbp-rs 基因是来源于父源还是母源的，本文作者利用单核苷酸单链构象多态性(SSCP)方法检测KM、B6、Balb/c、129S1、C3H、DBA 和 A/J 品系中小鼠 U2afbp-rs 基因的多态性，以检测出这些品系小鼠间可能存在的多态位点；利用细胞核移植技术将NIH3T3 细胞核和孤雌桑椹胚单个卵裂球分别移植到去核 M期受体卵母细胞中，通过免疫荧
14、光染色后比较体外受精胚、孤雌胚、NIH3T3 核移植重组胚和孤雌桑椹胚核移植重组胚附殖前各时期胚胎 DNA 甲基化水平的变化，以探明克隆胚细胞核去分化与 DNA 甲基化的相互关系；利用 Real-time PCR 技术检测体外受精胚、孤雌胚和孤雌桑椹胚核移植重组胚附殖前各时期胚胎中印记基因 U2afbp-rs 基因以及非印记基因 eIF-4C 基因表达量的变化，以探明小鼠卵细胞质对克隆胚细胞核中印记基因表达的调控。结果表明： 1尽管国外有文献报道了U2afbp-rs 基因在 C57BL/6J 和 PWK 品系间存在着丰富的多态位点，但这些位点在本研究所检测的小鼠品系中并不存在多态性，提示 U2
15、afbp-rs 基因可能在KM、B6、Balb/c、129S1、C3H、DBA 和 A/J 品系小鼠中并不存在多态位点。 2体外受精胚中印记基因 U2afbp-rs 和非印记基因 eIF-4C 都正常表达，它们在小鼠 ZGA 时期都发生瞬时高表达。但在孤雌胚中，U2afbp-rs 和 eIF-4C 基因都出现异常的表达模式，这可能是 DNA 甲基化与染色质结构改变的相互影响所导致的，染色质的重构在印记基因以及非印记基因的表达中都起着重要的调控作用。 3孤雌桑椹胚核移植重组胚中 U2afbp-rs 基因和 eIF-4C 基因的表达水平要显著低于对照孤雌胚，但其表达量变化规律与对照孤雌胚相同，说明
16、了卵细胞质对供体核印记基因的表达具有一定的调控作用。 4NIH3T3 体细胞核移植重组胚和孤雌桑椹胚核移植重组胚中供体核基因组 DNA 在核移植后无显著变化，说明了克隆胚基因组 DNA 的主动去甲基化不完全。为了区分核移植重组胚中所表达的 U2afbp-rs 基因是来源于父源还是母源的，本文作者利用单核苷酸单链构象多态性(SSCP)方法检测KM、B6、Balb/c、129S1、C3H、DBA 和 A/J 品系中小鼠 U2afbp-rs 基因的多态性，以检测出这些品系小鼠间可能存在的多态位点；利用细胞核移植技术将NIH3T3 细胞核和孤雌桑椹胚单个卵裂球分别移植到去核 M期受体卵母细胞中，通过免
17、疫荧光染色后比较体外受精胚、孤雌胚、NIH3T3 核移植重组胚和孤雌桑椹胚核移植重组胚附殖前各时期胚胎 DNA 甲基化水平的变化，以探明克隆胚细胞核去分化与 DNA 甲基化的相互关系；利用 Real-time PCR 技术检测体外受精胚、孤雌胚和孤雌桑椹胚核移植重组胚附殖前各时期胚胎中印记基因 U2afbp-rs 基因以及非印记基因 eIF-4C 基因表达量的变化，以探明小鼠卵细胞质对克隆胚细胞核中印记基因表达的调控。结果表明： 1尽管国外有文献报道了U2afbp-rs 基因在 C57BL/6J 和 PWK 品系间存在着丰富的多态位点，但这些位点在本研究所检测的小鼠品系中并不存在多态性，提示
18、U2afbp-rs 基因可能在KM、B6、Balb/c、129S1、C3H、DBA 和 A/J 品系小鼠中并不存在多态位点。 2体外受精胚中印记基因 U2afbp-rs 和非印记基因 eIF-4C 都正常表达，它们在小鼠 ZGA 时期都发生瞬时高表达。但在孤雌胚中，U2afbp-rs 和 eIF-4C 基因都出现异常的表达模式，这可能是 DNA 甲基化与染色质结构改变的相互影响所导致的，染色质的重构在印记基因以及非印记基因的表达中都起着重要的调控作用。 3孤雌桑椹胚核移植重组胚中 U2afbp-rs 基因和 eIF-4C 基因的表达水平要显著低于对照孤雌胚，但其表达量变化规律与对照孤雌胚相同，
19、说明了卵细胞质对供体核印记基因的表达具有一定的调控作用。 4NIH3T3 体细胞核移植重组胚和孤雌桑椹胚核移植重组胚中供体核基因组 DNA 在核移植后无显著变化，说明了克隆胚基因组 DNA 的主动去甲基化不完全。为了区分核移植重组胚中所表达的 U2afbp-rs 基因是来源于父源还是母源的，本文作者利用单核苷酸单链构象多态性(SSCP)方法检测KM、B6、Balb/c、129S1、C3H、DBA 和 A/J 品系中小鼠 U2afbp-rs 基因的多态性，以检测出这些品系小鼠间可能存在的多态位点；利用细胞核移植技术将NIH3T3 细胞核和孤雌桑椹胚单个卵裂球分别移植到去核 M期受体卵母细胞中，通
20、过免疫荧光染色后比较体外受精胚、孤雌胚、NIH3T3 核移植重组胚和孤雌桑椹胚核移植重组胚附殖前各时期胚胎 DNA 甲基化水平的变化，以探明克隆胚细胞核去分化与 DNA 甲基化的相互关系；利用 Real-time PCR 技术检测体外受精胚、孤雌胚和孤雌桑椹胚核移植重组胚附殖前各时期胚胎中印记基因 U2afbp-rs 基因以及非印记基因 eIF-4C 基因表达量的变化，以探明小鼠卵细胞质对克隆胚细胞核中印记基因表达的调控。结果表明： 1尽管国外有文献报道了U2afbp-rs 基因在 C57BL/6J 和 PWK 品系间存在着丰富的多态位点，但这些位点在本研究所检测的小鼠品系中并不存在多态性，提
21、示 U2afbp-rs 基因可能在KM、B6、Balb/c、129S1、C3H、DBA 和 A/J 品系小鼠中并不存在多态位点。 2体外受精胚中印记基因 U2afbp-rs 和非印记基因 eIF-4C 都正常表达，它们在小鼠 ZGA 时期都发生瞬时高表达。但在孤雌胚中，U2afbp-rs 和 eIF-4C 基因都出现异常的表达模式，这可能是 DNA 甲基化与染色质结构改变的相互影响所导致的，染色质的重构在印记基因以及非印记基因的表达中都起着重要的调控作用。 3孤雌桑椹胚核移植重组胚中 U2afbp-rs 基因和 eIF-4C 基因的表达水平要显著低于对照孤雌胚，但其表达量变化规律与对照孤雌胚相
22、同，说明了卵细胞质对供体核印记基因的表达具有一定的调控作用。 4NIH3T3 体细胞核移植重组胚和孤雌桑椹胚核移植重组胚中供体核基因组 DNA 在核移植后无显著变化，说明了克隆胚基因组 DNA 的主动去甲基化不完全。为了区分核移植重组胚中所表达的 U2afbp-rs 基因是来源于父源还是母源的，本文作者利用单核苷酸单链构象多态性(SSCP)方法检测KM、B6、Balb/c、129S1、C3H、DBA 和 A/J 品系中小鼠 U2afbp-rs 基因的多态性，以检测出这些品系小鼠间可能存在的多态位点；利用细胞核移植技术将NIH3T3 细胞核和孤雌桑椹胚单个卵裂球分别移植到去核 M期受体卵母细胞中
23、，通过免疫荧光染色后比较体外受精胚、孤雌胚、NIH3T3 核移植重组胚和孤雌桑椹胚核移植重组胚附殖前各时期胚胎 DNA 甲基化水平的变化，以探明克隆胚细胞核去分化与 DNA 甲基化的相互关系；利用 Real-time PCR 技术检测体外受精胚、孤雌胚和孤雌桑椹胚核移植重组胚附殖前各时期胚胎中印记基因 U2afbp-rs 基因以及非印记基因 eIF-4C 基因表达量的变化，以探明小鼠卵细胞质对克隆胚细胞核中印记基因表达的调控。结果表明： 1尽管国外有文献报道了U2afbp-rs 基因在 C57BL/6J 和 PWK 品系间存在着丰富的多态位点，但这些位点在本研究所检测的小鼠品系中并不存在多态性
24、，提示 U2afbp-rs 基因可能在KM、B6、Balb/c、129S1、C3H、DBA 和 A/J 品系小鼠中并不存在多态位点。 2体外受精胚中印记基因 U2afbp-rs 和非印记基因 eIF-4C 都正常表达，它们在小鼠 ZGA 时期都发生瞬时高表达。但在孤雌胚中，U2afbp-rs 和 eIF-4C 基因都出现异常的表达模式，这可能是 DNA 甲基化与染色质结构改变的相互影响所导致的，染色质的重构在印记基因以及非印记基因的表达中都起着重要的调控作用。 3孤雌桑椹胚核移植重组胚中 U2afbp-rs 基因和 eIF-4C 基因的表达水平要显著低于对照孤雌胚，但其表达量变化规律与对照孤雌
25、胚相同，说明了卵细胞质对供体核印记基因的表达具有一定的调控作用。 4NIH3T3 体细胞核移植重组胚和孤雌桑椹胚核移植重组胚中供体核基因组 DNA 在核移植后无显著变化，说明了克隆胚基因组 DNA 的主动去甲基化不完全。为了区分核移植重组胚中所表达的 U2afbp-rs 基因是来源于父源还是母源的，本文作者利用单核苷酸单链构象多态性(SSCP)方法检测KM、B6、Balb/c、129S1、C3H、DBA 和 A/J 品系中小鼠 U2afbp-rs 基因的多态性，以检测出这些品系小鼠间可能存在的多态位点；利用细胞核移植技术将NIH3T3 细胞核和孤雌桑椹胚单个卵裂球分别移植到去核 M期受体卵母细
26、胞中，通过免疫荧光染色后比较体外受精胚、孤雌胚、NIH3T3 核移植重组胚和孤雌桑椹胚核移植重组胚附殖前各时期胚胎 DNA 甲基化水平的变化，以探明克隆胚细胞核去分化与 DNA 甲基化的相互关系；利用 Real-time PCR 技术检测体外受精胚、孤雌胚和孤雌桑椹胚核移植重组胚附殖前各时期胚胎中印记基因 U2afbp-rs 基因以及非印记基因 eIF-4C 基因表达量的变化，以探明小鼠卵细胞质对克隆胚细胞核中印记基因表达的调控。结果表明： 1尽管国外有文献报道了U2afbp-rs 基因在 C57BL/6J 和 PWK 品系间存在着丰富的多态位点，但这些位点在本研究所检测的小鼠品系中并不存在多
27、态性，提示 U2afbp-rs 基因可能在KM、B6、Balb/c、129S1、C3H、DBA 和 A/J 品系小鼠中并不存在多态位点。 2体外受精胚中印记基因 U2afbp-rs 和非印记基因 eIF-4C 都正常表达，它们在小鼠 ZGA 时期都发生瞬时高表达。但在孤雌胚中，U2afbp-rs 和 eIF-4C 基因都出现异常的表达模式，这可能是 DNA 甲基化与染色质结构改变的相互影响所导致的，染色质的重构在印记基因以及非印记基因的表达中都起着重要的调控作用。 3孤雌桑椹胚核移植重组胚中 U2afbp-rs 基因和 eIF-4C 基因的表达水平要显著低于对照孤雌胚，但其表达量变化规律与对照
28、孤雌胚相同，说明了卵细胞质对供体核印记基因的表达具有一定的调控作用。 4NIH3T3 体细胞核移植重组胚和孤雌桑椹胚核移植重组胚中供体核基因组 DNA 在核移植后无显著变化，说明了克隆胚基因组 DNA 的主动去甲基化不完全。为了区分核移植重组胚中所表达的 U2afbp-rs 基因是来源于父源还是母源的，本文作者利用单核苷酸单链构象多态性(SSCP)方法检测KM、B6、Balb/c、129S1、C3H、DBA 和 A/J 品系中小鼠 U2afbp-rs 基因的多态性，以检测出这些品系小鼠间可能存在的多态位点；利用细胞核移植技术将NIH3T3 细胞核和孤雌桑椹胚单个卵裂球分别移植到去核 M期受体卵
29、母细胞中，通过免疫荧光染色后比较体外受精胚、孤雌胚、NIH3T3 核移植重组胚和孤雌桑椹胚核移植重组胚附殖前各时期胚胎 DNA 甲基化水平的变化，以探明克隆胚细胞核去分化与 DNA 甲基化的相互关系；利用 Real-time PCR 技术检测体外受精胚、孤雌胚和孤雌桑椹胚核移植重组胚附殖前各时期胚胎中印记基因 U2afbp-rs 基因以及非印记基因 eIF-4C 基因表达量的变化，以探明小鼠卵细胞质对克隆胚细胞核中印记基因表达的调控。结果表明： 1尽管国外有文献报道了U2afbp-rs 基因在 C57BL/6J 和 PWK 品系间存在着丰富的多态位点，但这些位点在本研究所检测的小鼠品系中并不存
30、在多态性，提示 U2afbp-rs 基因可能在KM、B6、Balb/c、129S1、C3H、DBA 和 A/J 品系小鼠中并不存在多态位点。 2体外受精胚中印记基因 U2afbp-rs 和非印记基因 eIF-4C 都正常表达，它们在小鼠 ZGA 时期都发生瞬时高表达。但在孤雌胚中，U2afbp-rs 和 eIF-4C 基因都出现异常的表达模式，这可能是 DNA 甲基化与染色质结构改变的相互影响所导致的，染色质的重构在印记基因以及非印记基因的表达中都起着重要的调控作用。 3孤雌桑椹胚核移植重组胚中 U2afbp-rs 基因和 eIF-4C 基因的表达水平要显著低于对照孤雌胚，但其表达量变化规律与
31、对照孤雌胚相同，说明了卵细胞质对供体核印记基因的表达具有一定的调控作用。 4NIH3T3 体细胞核移植重组胚和孤雌桑椹胚核移植重组胚中供体核基因组 DNA 在核移植后无显著变化，说明了克隆胚基因组 DNA 的主动去甲基化不完全。为了区分核移植重组胚中所表达的 U2afbp-rs 基因是来源于父源还是母源的，本文作者利用单核苷酸单链构象多态性(SSCP)方法检测KM、B6、Balb/c、129S1、C3H、DBA 和 A/J 品系中小鼠 U2afbp-rs 基因的多态性，以检测出这些品系小鼠间可能存在的多态位点；利用细胞核移植技术将NIH3T3 细胞核和孤雌桑椹胚单个卵裂球分别移植到去核 M期受
32、体卵母细胞中，通过免疫荧光染色后比较体外受精胚、孤雌胚、NIH3T3 核移植重组胚和孤雌桑椹胚核移植重组胚附殖前各时期胚胎 DNA 甲基化水平的变化，以探明克隆胚细胞核去分化与 DNA 甲基化的相互关系；利用 Real-time PCR 技术检测体外受精胚、孤雌胚和孤雌桑椹胚核移植重组胚附殖前各时期胚胎中印记基因 U2afbp-rs 基因以及非印记基因 eIF-4C 基因表达量的变化，以探明小鼠卵细胞质对克隆胚细胞核中印记基因表达的调控。结果表明： 1尽管国外有文献报道了U2afbp-rs 基因在 C57BL/6J 和 PWK 品系间存在着丰富的多态位点，但这些位点在本研究所检测的小鼠品系中并
33、不存在多态性，提示 U2afbp-rs 基因可能在KM、B6、Balb/c、129S1、C3H、DBA 和 A/J 品系小鼠中并不存在多态位点。 2体外受精胚中印记基因 U2afbp-rs 和非印记基因 eIF-4C 都正常表达，它们在小鼠 ZGA 时期都发生瞬时高表达。但在孤雌胚中，U2afbp-rs 和 eIF-4C 基因都出现异常的表达模式，这可能是 DNA 甲基化与染色质结构改变的相互影响所导致的，染色质的重构在印记基因以及非印记基因的表达中都起着重要的调控作用。 3孤雌桑椹胚核移植重组胚中 U2afbp-rs 基因和 eIF-4C 基因的表达水平要显著低于对照孤雌胚，但其表达量变化规
34、律与对照孤雌胚相同，说明了卵细胞质对供体核印记基因的表达具有一定的调控作用。 4NIH3T3 体细胞核移植重组胚和孤雌桑椹胚核移植重组胚中供体核基因组 DNA 在核移植后无显著变化，说明了克隆胚基因组 DNA 的主动去甲基化不完全。特别提醒 ：正文内容由 PDF 文件转码生成，如您电脑未有相应转换码，则无法显示正文内容，请您下载相应软件，下载地址为 http:/ 。如还不能显示，可以联系我 q q 1627550258 ，提供原格式文档。我们还可提供代笔服务，价格优惠，服务周到，包您通过。“垐垯櫃 换烫梯葺铑?endstreamendobj2x 滌甸?*U 躆 跦?l, 墀 VGi?o 嫅#4
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