1、细胞生物学专业毕业论文 精品论文 姜黄素诱导食管癌 EC9706细胞凋亡过程中核基质蛋白的表达变化关键词：食管癌 EC9706 细胞 核基质-中间纤维系统 核基质蛋白 细胞凋亡 姜黄素摘要：本文在鉴定姜黄素(curcumin，Cur)诱导人食管癌 EC9706 细胞凋亡的基础上，应用选择性抽提整装透射电镜和蛋白质组学分析技术，对 EC9706 细胞凋亡诱导过程中核基质-中间纤维系统的构型变化和核基质蛋白组成变化进行系统研究。分析鉴定与食管癌细胞凋亡相关的特异核基质蛋白，并探索它们在食管癌细胞凋亡过程中的调控作用，以期能够从较为整体的水平上进一步认识食管癌细胞凋亡及其机理，从而找出食管癌细胞凋亡
2、研究的新方向。 实验结果显示，经 8g/mL，姜黄素处理之后，EC9706 细胞增殖受到明显抑制，细胞生长抑制率达 69.9；细胞周期检测出现亚二倍体(亚 G1 期)细胞峰值，细胞凋亡率达 23.0，并发生 G2/M 期阻滞；光镜和透射电镜观察结果显示，经姜黄素诱导处理后的 EC9706 细胞出现了细胞体积缩小、核质比例减小、细胞核固缩、核内染色质凝聚、线粒体肿胀、内质网网腔扩大、形成凋亡小体等显著的细胞凋亡特征；而且与凋亡相关的原癌基因 bcl-2 表达下调，促凋亡基因p53、fas、bax 等表达上调。选择性抽提整装光镜和电镜观察显示，经姜黄素处理的 EC9706 细胞，其核基质-中间纤维
3、系统虽然还能保持较为完整的网状结构，但纤维的数量和密度明显比对照组稀疏，且分布更加不均匀，并有局部的纤维断裂存在，核基质-中间纤维系统整体构型趋向于崩解；双向凝胶电泳分析显示在姜黄素诱导 EC9706 细胞凋亡前后存在 31 个差异表达的核基质蛋白，经质谱分析，鉴定了其中的 12 个蛋白，其中在凋亡的 EC9706 细胞中表达上调或新出现的蛋白有 8 个：Ran-binding protein3-like、Mitochondrial28S ribosomal protein S30、Rho guanine nucleotide exchange factor19、Rap1 GTPase-act
4、ivating protein2、Hsp70-binding protein1、2-5A-dependent ribonuclease、Adseverin、TATA element modulatory factor；表达下调的蛋白质有 4 个：Probable peptidyl-tRNA hydrolase、ATP synthase mitochondrial F1 complex assembly factor1、Serine protease hepsin、Cell division protein kinase6。其中除 Adseverin 外，其它蛋白质均首次在核基质中发现。 研究结
5、果表明，8g/mL 姜黄素对人食管癌 EC9706细胞的凋亡具有显著诱导作用，在 EC9706 细胞凋亡过程中，不仅其核基质-中间纤维系统构型产生了明显的凋亡特征性变化，而且其核基质蛋白组成也相应发生了明显改变。由此证实了与食管癌细胞凋亡相关的特异核基质蛋白的存在及其对食管癌细胞凋亡诱导的调控作用。正文内容本文在鉴定姜黄素(curcumin，Cur)诱导人食管癌 EC9706 细胞凋亡的基础上，应用选择性抽提整装透射电镜和蛋白质组学分析技术，对 EC9706 细胞凋亡诱导过程中核基质-中间纤维系统的构型变化和核基质蛋白组成变化进行系统研究。分析鉴定与食管癌细胞凋亡相关的特异核基质蛋白，并探索它
6、们在食管癌细胞凋亡过程中的调控作用，以期能够从较为整体的水平上进一步认识食管癌细胞凋亡及其机理，从而找出食管癌细胞凋亡研究的新方向。 实验结果显示，经 8g/mL，姜黄素处理之后，EC9706 细胞增殖受到明显抑制，细胞生长抑制率达 69.9；细胞周期检测出现亚二倍体(亚 G1 期)细胞峰值，细胞凋亡率达23.0，并发生 G2/M 期阻滞；光镜和透射电镜观察结果显示，经姜黄素诱导处理后的 EC9706 细胞出现了细胞体积缩小、核质比例减小、细胞核固缩、核内染色质凝聚、线粒体肿胀、内质网网腔扩大、形成凋亡小体等显著的细胞凋亡特征；而且与凋亡相关的原癌基因 bcl-2 表达下调，促凋亡基因 p53
7、、fas、bax等表达上调。选择性抽提整装光镜和电镜观察显示，经姜黄素处理的 EC9706 细胞，其核基质-中间纤维系统虽然还能保持较为完整的网状结构，但纤维的数量和密度明显比对照组稀疏，且分布更加不均匀，并有局部的纤维断裂存在，核基质-中间纤维系统整体构型趋向于崩解；双向凝胶电泳分析显示在姜黄素诱导EC9706 细胞凋亡前后存在 31 个差异表达的核基质蛋白，经质谱分析，鉴定了其中的 12 个蛋白，其中在凋亡的 EC9706 细胞中表达上调或新出现的蛋白有 8个：Ran-binding protein3-like、Mitochondrial28S ribosomal protein S30、
8、Rho guanine nucleotide exchange factor19、Rap1 GTPase-activating protein2、Hsp70-binding protein1、2-5A-dependent ribonuclease、Adseverin、TATA element modulatory factor；表达下调的蛋白质有 4 个：Probable peptidyl-tRNA hydrolase、ATP synthase mitochondrial F1 complex assembly factor1、Serine protease hepsin、Cell divis
9、ion protein kinase6。其中除 Adseverin 外，其它蛋白质均首次在核基质中发现。 研究结果表明，8g/mL 姜黄素对人食管癌 EC9706细胞的凋亡具有显著诱导作用，在 EC9706 细胞凋亡过程中，不仅其核基质-中间纤维系统构型产生了明显的凋亡特征性变化，而且其核基质蛋白组成也相应发生了明显改变。由此证实了与食管癌细胞凋亡相关的特异核基质蛋白的存在及其对食管癌细胞凋亡诱导的调控作用。本文在鉴定姜黄素(curcumin，Cur)诱导人食管癌 EC9706 细胞凋亡的基础上，应用选择性抽提整装透射电镜和蛋白质组学分析技术，对 EC9706 细胞凋亡诱导过程中核基质-中间纤
10、维系统的构型变化和核基质蛋白组成变化进行系统研究。分析鉴定与食管癌细胞凋亡相关的特异核基质蛋白，并探索它们在食管癌细胞凋亡过程中的调控作用，以期能够从较为整体的水平上进一步认识食管癌细胞凋亡及其机理，从而找出食管癌细胞凋亡研究的新方向。 实验结果显示，经8g/mL，姜黄素处理之后，EC9706 细胞增殖受到明显抑制，细胞生长抑制率达 69.9；细胞周期检测出现亚二倍体(亚 G1 期)细胞峰值，细胞凋亡率达23.0，并发生 G2/M 期阻滞；光镜和透射电镜观察结果显示，经姜黄素诱导处理后的 EC9706 细胞出现了细胞体积缩小、核质比例减小、细胞核固缩、核内染色质凝聚、线粒体肿胀、内质网网腔扩大
11、、形成凋亡小体等显著的细胞凋亡特征；而且与凋亡相关的原癌基因 bcl-2 表达下调，促凋亡基因 p53、fas、bax等表达上调。选择性抽提整装光镜和电镜观察显示，经姜黄素处理的 EC9706 细胞，其核基质-中间纤维系统虽然还能保持较为完整的网状结构，但纤维的数量和密度明显比对照组稀疏，且分布更加不均匀，并有局部的纤维断裂存在，核基质-中间纤维系统整体构型趋向于崩解；双向凝胶电泳分析显示在姜黄素诱导EC9706 细胞凋亡前后存在 31 个差异表达的核基质蛋白，经质谱分析，鉴定了其中的 12 个蛋白，其中在凋亡的 EC9706 细胞中表达上调或新出现的蛋白有 8个：Ran-binding pr
12、otein3-like、Mitochondrial28S ribosomal protein S30、Rho guanine nucleotide exchange factor19、Rap1 GTPase-activating protein2、Hsp70-binding protein1、2-5A-dependent ribonuclease、Adseverin、TATA element modulatory factor；表达下调的蛋白质有 4 个：Probable peptidyl-tRNA hydrolase、ATP synthase mitochondrial F1 complex
13、 assembly factor1、Serine protease hepsin、Cell division protein kinase6。其中除 Adseverin 外，其它蛋白质均首次在核基质中发现。 研究结果表明，8g/mL 姜黄素对人食管癌 EC9706细胞的凋亡具有显著诱导作用，在 EC9706 细胞凋亡过程中，不仅其核基质-中间纤维系统构型产生了明显的凋亡特征性变化，而且其核基质蛋白组成也相应发生了明显改变。由此证实了与食管癌细胞凋亡相关的特异核基质蛋白的存在及其对食管癌细胞凋亡诱导的调控作用。本文在鉴定姜黄素(curcumin，Cur)诱导人食管癌 EC9706 细胞凋亡的基础
14、上，应用选择性抽提整装透射电镜和蛋白质组学分析技术，对 EC9706 细胞凋亡诱导过程中核基质-中间纤维系统的构型变化和核基质蛋白组成变化进行系统研究。分析鉴定与食管癌细胞凋亡相关的特异核基质蛋白，并探索它们在食管癌细胞凋亡过程中的调控作用，以期能够从较为整体的水平上进一步认识食管癌细胞凋亡及其机理，从而找出食管癌细胞凋亡研究的新方向。 实验结果显示，经8g/mL，姜黄素处理之后，EC9706 细胞增殖受到明显抑制，细胞生长抑制率达 69.9；细胞周期检测出现亚二倍体(亚 G1 期)细胞峰值，细胞凋亡率达23.0，并发生 G2/M 期阻滞；光镜和透射电镜观察结果显示，经姜黄素诱导处理后的 EC
15、9706 细胞出现了细胞体积缩小、核质比例减小、细胞核固缩、核内染色质凝聚、线粒体肿胀、内质网网腔扩大、形成凋亡小体等显著的细胞凋亡特征；而且与凋亡相关的原癌基因 bcl-2 表达下调，促凋亡基因 p53、fas、bax等表达上调。选择性抽提整装光镜和电镜观察显示，经姜黄素处理的 EC9706 细胞，其核基质-中间纤维系统虽然还能保持较为完整的网状结构，但纤维的数量和密度明显比对照组稀疏，且分布更加不均匀，并有局部的纤维断裂存在，核基质-中间纤维系统整体构型趋向于崩解；双向凝胶电泳分析显示在姜黄素诱导EC9706 细胞凋亡前后存在 31 个差异表达的核基质蛋白，经质谱分析，鉴定了其中的 12
16、个蛋白，其中在凋亡的 EC9706 细胞中表达上调或新出现的蛋白有 8个：Ran-binding protein3-like、Mitochondrial28S ribosomal protein S30、Rho guanine nucleotide exchange factor19、Rap1 GTPase-activating protein2、Hsp70-binding protein1、2-5A-dependent ribonuclease、Adseverin、TATA element modulatory factor；表达下调的蛋白质有 4 个：Probable peptidyl-t
17、RNA hydrolase、ATP synthase mitochondrial F1 complex assembly factor1、Serine protease hepsin、Cell division protein kinase6。其中除 Adseverin 外，其它蛋白质均首次在核基质中发现。 研究结果表明，8g/mL 姜黄素对人食管癌 EC9706细胞的凋亡具有显著诱导作用，在 EC9706 细胞凋亡过程中，不仅其核基质-中间纤维系统构型产生了明显的凋亡特征性变化，而且其核基质蛋白组成也相应发生了明显改变。由此证实了与食管癌细胞凋亡相关的特异核基质蛋白的存在及其对食管癌细胞凋亡
18、诱导的调控作用。本文在鉴定姜黄素(curcumin，Cur)诱导人食管癌 EC9706 细胞凋亡的基础上，应用选择性抽提整装透射电镜和蛋白质组学分析技术，对 EC9706 细胞凋亡诱导过程中核基质-中间纤维系统的构型变化和核基质蛋白组成变化进行系统研究。分析鉴定与食管癌细胞凋亡相关的特异核基质蛋白，并探索它们在食管癌细胞凋亡过程中的调控作用，以期能够从较为整体的水平上进一步认识食管癌细胞凋亡及其机理，从而找出食管癌细胞凋亡研究的新方向。 实验结果显示，经8g/mL，姜黄素处理之后，EC9706 细胞增殖受到明显抑制，细胞生长抑制率达 69.9；细胞周期检测出现亚二倍体(亚 G1 期)细胞峰值，
19、细胞凋亡率达23.0，并发生 G2/M 期阻滞；光镜和透射电镜观察结果显示，经姜黄素诱导处理后的 EC9706 细胞出现了细胞体积缩小、核质比例减小、细胞核固缩、核内染色质凝聚、线粒体肿胀、内质网网腔扩大、形成凋亡小体等显著的细胞凋亡特征；而且与凋亡相关的原癌基因 bcl-2 表达下调，促凋亡基因 p53、fas、bax等表达上调。选择性抽提整装光镜和电镜观察显示，经姜黄素处理的 EC9706 细胞，其核基质-中间纤维系统虽然还能保持较为完整的网状结构，但纤维的数量和密度明显比对照组稀疏，且分布更加不均匀，并有局部的纤维断裂存在，核基质-中间纤维系统整体构型趋向于崩解；双向凝胶电泳分析显示在姜
20、黄素诱导EC9706 细胞凋亡前后存在 31 个差异表达的核基质蛋白，经质谱分析，鉴定了其中的 12 个蛋白，其中在凋亡的 EC9706 细胞中表达上调或新出现的蛋白有 8个：Ran-binding protein3-like、Mitochondrial28S ribosomal protein S30、Rho guanine nucleotide exchange factor19、Rap1 GTPase-activating protein2、Hsp70-binding protein1、2-5A-dependent ribonuclease、Adseverin、TATA element
21、modulatory factor；表达下调的蛋白质有 4 个：Probable peptidyl-tRNA hydrolase、ATP synthase mitochondrial F1 complex assembly factor1、Serine protease hepsin、Cell division protein kinase6。其中除 Adseverin 外，其它蛋白质均首次在核基质中发现。 研究结果表明，8g/mL 姜黄素对人食管癌 EC9706细胞的凋亡具有显著诱导作用，在 EC9706 细胞凋亡过程中，不仅其核基质-中间纤维系统构型产生了明显的凋亡特征性变化，而且其核基质
22、蛋白组成也相应发生了明显改变。由此证实了与食管癌细胞凋亡相关的特异核基质蛋白的存在及其对食管癌细胞凋亡诱导的调控作用。本文在鉴定姜黄素(curcumin，Cur)诱导人食管癌 EC9706 细胞凋亡的基础上，应用选择性抽提整装透射电镜和蛋白质组学分析技术，对 EC9706 细胞凋亡诱导过程中核基质-中间纤维系统的构型变化和核基质蛋白组成变化进行系统研究。分析鉴定与食管癌细胞凋亡相关的特异核基质蛋白，并探索它们在食管癌细胞凋亡过程中的调控作用，以期能够从较为整体的水平上进一步认识食管癌细胞凋亡及其机理，从而找出食管癌细胞凋亡研究的新方向。 实验结果显示，经8g/mL，姜黄素处理之后，EC9706
23、 细胞增殖受到明显抑制，细胞生长抑制率达 69.9；细胞周期检测出现亚二倍体(亚 G1 期)细胞峰值，细胞凋亡率达23.0，并发生 G2/M 期阻滞；光镜和透射电镜观察结果显示，经姜黄素诱导处理后的 EC9706 细胞出现了细胞体积缩小、核质比例减小、细胞核固缩、核内染色质凝聚、线粒体肿胀、内质网网腔扩大、形成凋亡小体等显著的细胞凋亡特征；而且与凋亡相关的原癌基因 bcl-2 表达下调，促凋亡基因 p53、fas、bax等表达上调。选择性抽提整装光镜和电镜观察显示，经姜黄素处理的 EC9706 细胞，其核基质-中间纤维系统虽然还能保持较为完整的网状结构，但纤维的数量和密度明显比对照组稀疏，且分
24、布更加不均匀，并有局部的纤维断裂存在，核基质-中间纤维系统整体构型趋向于崩解；双向凝胶电泳分析显示在姜黄素诱导EC9706 细胞凋亡前后存在 31 个差异表达的核基质蛋白，经质谱分析，鉴定了其中的 12 个蛋白，其中在凋亡的 EC9706 细胞中表达上调或新出现的蛋白有 8个：Ran-binding protein3-like、Mitochondrial28S ribosomal protein S30、Rho guanine nucleotide exchange factor19、Rap1 GTPase-activating protein2、Hsp70-binding protein1、
25、2-5A-dependent ribonuclease、Adseverin、TATA element modulatory factor；表达下调的蛋白质有 4 个：Probable peptidyl-tRNA hydrolase、ATP synthase mitochondrial F1 complex assembly factor1、Serine protease hepsin、Cell division protein kinase6。其中除 Adseverin 外，其它蛋白质均首次在核基质中发现。 研究结果表明，8g/mL 姜黄素对人食管癌 EC9706细胞的凋亡具有显著诱导作用，在
26、 EC9706 细胞凋亡过程中，不仅其核基质-中间纤维系统构型产生了明显的凋亡特征性变化，而且其核基质蛋白组成也相应发生了明显改变。由此证实了与食管癌细胞凋亡相关的特异核基质蛋白的存在及其对食管癌细胞凋亡诱导的调控作用。本文在鉴定姜黄素(curcumin，Cur)诱导人食管癌 EC9706 细胞凋亡的基础上，应用选择性抽提整装透射电镜和蛋白质组学分析技术，对 EC9706 细胞凋亡诱导过程中核基质-中间纤维系统的构型变化和核基质蛋白组成变化进行系统研究。分析鉴定与食管癌细胞凋亡相关的特异核基质蛋白，并探索它们在食管癌细胞凋亡过程中的调控作用，以期能够从较为整体的水平上进一步认识食管癌细胞凋亡及
27、其机理，从而找出食管癌细胞凋亡研究的新方向。 实验结果显示，经8g/mL，姜黄素处理之后，EC9706 细胞增殖受到明显抑制，细胞生长抑制率达 69.9；细胞周期检测出现亚二倍体(亚 G1 期)细胞峰值，细胞凋亡率达23.0，并发生 G2/M 期阻滞；光镜和透射电镜观察结果显示，经姜黄素诱导处理后的 EC9706 细胞出现了细胞体积缩小、核质比例减小、细胞核固缩、核内染色质凝聚、线粒体肿胀、内质网网腔扩大、形成凋亡小体等显著的细胞凋亡特征；而且与凋亡相关的原癌基因 bcl-2 表达下调，促凋亡基因 p53、fas、bax等表达上调。选择性抽提整装光镜和电镜观察显示，经姜黄素处理的 EC9706
28、 细胞，其核基质-中间纤维系统虽然还能保持较为完整的网状结构，但纤维的数量和密度明显比对照组稀疏，且分布更加不均匀，并有局部的纤维断裂存在，核基质-中间纤维系统整体构型趋向于崩解；双向凝胶电泳分析显示在姜黄素诱导EC9706 细胞凋亡前后存在 31 个差异表达的核基质蛋白，经质谱分析，鉴定了其中的 12 个蛋白，其中在凋亡的 EC9706 细胞中表达上调或新出现的蛋白有 8个：Ran-binding protein3-like、Mitochondrial28S ribosomal protein S30、Rho guanine nucleotide exchange factor19、Rap1
29、 GTPase-activating protein2、Hsp70-binding protein1、2-5A-dependent ribonuclease、Adseverin、TATA element modulatory factor；表达下调的蛋白质有 4 个：Probable peptidyl-tRNA hydrolase、ATP synthase mitochondrial F1 complex assembly factor1、Serine protease hepsin、Cell division protein kinase6。其中除 Adseverin 外，其它蛋白质均首次在
30、核基质中发现。 研究结果表明，8g/mL 姜黄素对人食管癌 EC9706细胞的凋亡具有显著诱导作用，在 EC9706 细胞凋亡过程中，不仅其核基质-中间纤维系统构型产生了明显的凋亡特征性变化，而且其核基质蛋白组成也相应发生了明显改变。由此证实了与食管癌细胞凋亡相关的特异核基质蛋白的存在及其对食管癌细胞凋亡诱导的调控作用。本文在鉴定姜黄素(curcumin，Cur)诱导人食管癌 EC9706 细胞凋亡的基础上，应用选择性抽提整装透射电镜和蛋白质组学分析技术，对 EC9706 细胞凋亡诱导过程中核基质-中间纤维系统的构型变化和核基质蛋白组成变化进行系统研究。分析鉴定与食管癌细胞凋亡相关的特异核基质
31、蛋白，并探索它们在食管癌细胞凋亡过程中的调控作用，以期能够从较为整体的水平上进一步认识食管癌细胞凋亡及其机理，从而找出食管癌细胞凋亡研究的新方向。 实验结果显示，经8g/mL，姜黄素处理之后，EC9706 细胞增殖受到明显抑制，细胞生长抑制率达 69.9；细胞周期检测出现亚二倍体(亚 G1 期)细胞峰值，细胞凋亡率达23.0，并发生 G2/M 期阻滞；光镜和透射电镜观察结果显示，经姜黄素诱导处理后的 EC9706 细胞出现了细胞体积缩小、核质比例减小、细胞核固缩、核内染色质凝聚、线粒体肿胀、内质网网腔扩大、形成凋亡小体等显著的细胞凋亡特征；而且与凋亡相关的原癌基因 bcl-2 表达下调，促凋亡
32、基因 p53、fas、bax等表达上调。选择性抽提整装光镜和电镜观察显示，经姜黄素处理的 EC9706 细胞，其核基质-中间纤维系统虽然还能保持较为完整的网状结构，但纤维的数量和密度明显比对照组稀疏，且分布更加不均匀，并有局部的纤维断裂存在，核基质-中间纤维系统整体构型趋向于崩解；双向凝胶电泳分析显示在姜黄素诱导EC9706 细胞凋亡前后存在 31 个差异表达的核基质蛋白，经质谱分析，鉴定了其中的 12 个蛋白，其中在凋亡的 EC9706 细胞中表达上调或新出现的蛋白有 8个：Ran-binding protein3-like、Mitochondrial28S ribosomal protei
33、n S30、Rho guanine nucleotide exchange factor19、Rap1 GTPase-activating protein2、Hsp70-binding protein1、2-5A-dependent ribonuclease、Adseverin、TATA element modulatory factor；表达下调的蛋白质有 4 个：Probable peptidyl-tRNA hydrolase、ATP synthase mitochondrial F1 complex assembly factor1、Serine protease hepsin、Cell
34、 division protein kinase6。其中除 Adseverin 外，其它蛋白质均首次在核基质中发现。 研究结果表明，8g/mL 姜黄素对人食管癌 EC9706细胞的凋亡具有显著诱导作用，在 EC9706 细胞凋亡过程中，不仅其核基质-中间纤维系统构型产生了明显的凋亡特征性变化，而且其核基质蛋白组成也相应发生了明显改变。由此证实了与食管癌细胞凋亡相关的特异核基质蛋白的存在及其对食管癌细胞凋亡诱导的调控作用。本文在鉴定姜黄素(curcumin，Cur)诱导人食管癌 EC9706 细胞凋亡的基础上，应用选择性抽提整装透射电镜和蛋白质组学分析技术，对 EC9706 细胞凋亡诱导过程中核
35、基质-中间纤维系统的构型变化和核基质蛋白组成变化进行系统研究。分析鉴定与食管癌细胞凋亡相关的特异核基质蛋白，并探索它们在食管癌细胞凋亡过程中的调控作用，以期能够从较为整体的水平上进一步认识食管癌细胞凋亡及其机理，从而找出食管癌细胞凋亡研究的新方向。 实验结果显示，经8g/mL，姜黄素处理之后，EC9706 细胞增殖受到明显抑制，细胞生长抑制率达 69.9；细胞周期检测出现亚二倍体(亚 G1 期)细胞峰值，细胞凋亡率达23.0，并发生 G2/M 期阻滞；光镜和透射电镜观察结果显示，经姜黄素诱导处理后的 EC9706 细胞出现了细胞体积缩小、核质比例减小、细胞核固缩、核内染色质凝聚、线粒体肿胀、内
36、质网网腔扩大、形成凋亡小体等显著的细胞凋亡特征；而且与凋亡相关的原癌基因 bcl-2 表达下调，促凋亡基因 p53、fas、bax等表达上调。选择性抽提整装光镜和电镜观察显示，经姜黄素处理的 EC9706 细胞，其核基质-中间纤维系统虽然还能保持较为完整的网状结构，但纤维的数量和密度明显比对照组稀疏，且分布更加不均匀，并有局部的纤维断裂存在，核基质-中间纤维系统整体构型趋向于崩解；双向凝胶电泳分析显示在姜黄素诱导EC9706 细胞凋亡前后存在 31 个差异表达的核基质蛋白，经质谱分析，鉴定了其中的 12 个蛋白，其中在凋亡的 EC9706 细胞中表达上调或新出现的蛋白有 8个：Ran-bind
37、ing protein3-like、Mitochondrial28S ribosomal protein S30、Rho guanine nucleotide exchange factor19、Rap1 GTPase-activating protein2、Hsp70-binding protein1、2-5A-dependent ribonuclease、Adseverin、TATA element modulatory factor；表达下调的蛋白质有 4 个：Probable peptidyl-tRNA hydrolase、ATP synthase mitochondrial F1 c
38、omplex assembly factor1、Serine protease hepsin、Cell division protein kinase6。其中除 Adseverin 外，其它蛋白质均首次在核基质中发现。 研究结果表明，8g/mL 姜黄素对人食管癌 EC9706细胞的凋亡具有显著诱导作用，在 EC9706 细胞凋亡过程中，不仅其核基质-中间纤维系统构型产生了明显的凋亡特征性变化，而且其核基质蛋白组成也相应发生了明显改变。由此证实了与食管癌细胞凋亡相关的特异核基质蛋白的存在及其对食管癌细胞凋亡诱导的调控作用。本文在鉴定姜黄素(curcumin，Cur)诱导人食管癌 EC9706 细
39、胞凋亡的基础上，应用选择性抽提整装透射电镜和蛋白质组学分析技术，对 EC9706 细胞凋亡诱导过程中核基质-中间纤维系统的构型变化和核基质蛋白组成变化进行系统研究。分析鉴定与食管癌细胞凋亡相关的特异核基质蛋白，并探索它们在食管癌细胞凋亡过程中的调控作用，以期能够从较为整体的水平上进一步认识食管癌细胞凋亡及其机理，从而找出食管癌细胞凋亡研究的新方向。 实验结果显示，经8g/mL，姜黄素处理之后，EC9706 细胞增殖受到明显抑制，细胞生长抑制率达 69.9；细胞周期检测出现亚二倍体(亚 G1 期)细胞峰值，细胞凋亡率达23.0，并发生 G2/M 期阻滞；光镜和透射电镜观察结果显示，经姜黄素诱导处
40、理后的 EC9706 细胞出现了细胞体积缩小、核质比例减小、细胞核固缩、核内染色质凝聚、线粒体肿胀、内质网网腔扩大、形成凋亡小体等显著的细胞凋亡特征；而且与凋亡相关的原癌基因 bcl-2 表达下调，促凋亡基因 p53、fas、bax等表达上调。选择性抽提整装光镜和电镜观察显示，经姜黄素处理的 EC9706 细胞，其核基质-中间纤维系统虽然还能保持较为完整的网状结构，但纤维的数量和密度明显比对照组稀疏，且分布更加不均匀，并有局部的纤维断裂存在，核基质-中间纤维系统整体构型趋向于崩解；双向凝胶电泳分析显示在姜黄素诱导EC9706 细胞凋亡前后存在 31 个差异表达的核基质蛋白，经质谱分析，鉴定了其
41、中的 12 个蛋白，其中在凋亡的 EC9706 细胞中表达上调或新出现的蛋白有 8个：Ran-binding protein3-like、Mitochondrial28S ribosomal protein S30、Rho guanine nucleotide exchange factor19、Rap1 GTPase-activating protein2、Hsp70-binding protein1、2-5A-dependent ribonuclease、Adseverin、TATA element modulatory factor；表达下调的蛋白质有 4 个：Probable pept
42、idyl-tRNA hydrolase、ATP synthase mitochondrial F1 complex assembly factor1、Serine protease hepsin、Cell division protein kinase6。其中除 Adseverin 外，其它蛋白质均首次在核基质中发现。 研究结果表明，8g/mL 姜黄素对人食管癌 EC9706细胞的凋亡具有显著诱导作用，在 EC9706 细胞凋亡过程中，不仅其核基质-中间纤维系统构型产生了明显的凋亡特征性变化，而且其核基质蛋白组成也相应发生了明显改变。由此证实了与食管癌细胞凋亡相关的特异核基质蛋白的存在及其对食
43、管癌细胞凋亡诱导的调控作用。本文在鉴定姜黄素(curcumin，Cur)诱导人食管癌 EC9706 细胞凋亡的基础上，应用选择性抽提整装透射电镜和蛋白质组学分析技术，对 EC9706 细胞凋亡诱导过程中核基质-中间纤维系统的构型变化和核基质蛋白组成变化进行系统研究。分析鉴定与食管癌细胞凋亡相关的特异核基质蛋白，并探索它们在食管癌细胞凋亡过程中的调控作用，以期能够从较为整体的水平上进一步认识食管癌细胞凋亡及其机理，从而找出食管癌细胞凋亡研究的新方向。 实验结果显示，经8g/mL，姜黄素处理之后，EC9706 细胞增殖受到明显抑制，细胞生长抑制率达 69.9；细胞周期检测出现亚二倍体(亚 G1 期
44、)细胞峰值，细胞凋亡率达23.0，并发生 G2/M 期阻滞；光镜和透射电镜观察结果显示，经姜黄素诱导处理后的 EC9706 细胞出现了细胞体积缩小、核质比例减小、细胞核固缩、核内染色质凝聚、线粒体肿胀、内质网网腔扩大、形成凋亡小体等显著的细胞凋亡特征；而且与凋亡相关的原癌基因 bcl-2 表达下调，促凋亡基因 p53、fas、bax等表达上调。选择性抽提整装光镜和电镜观察显示，经姜黄素处理的 EC9706 细胞，其核基质-中间纤维系统虽然还能保持较为完整的网状结构，但纤维的数量和密度明显比对照组稀疏，且分布更加不均匀，并有局部的纤维断裂存在，核基质-中间纤维系统整体构型趋向于崩解；双向凝胶电泳
45、分析显示在姜黄素诱导EC9706 细胞凋亡前后存在 31 个差异表达的核基质蛋白，经质谱分析，鉴定了其中的 12 个蛋白，其中在凋亡的 EC9706 细胞中表达上调或新出现的蛋白有 8个：Ran-binding protein3-like、Mitochondrial28S ribosomal protein S30、Rho guanine nucleotide exchange factor19、Rap1 GTPase-activating protein2、Hsp70-binding protein1、2-5A-dependent ribonuclease、Adseverin、TATA el
46、ement modulatory factor；表达下调的蛋白质有 4 个：Probable peptidyl-tRNA hydrolase、ATP synthase mitochondrial F1 complex assembly factor1、Serine protease hepsin、Cell division protein kinase6。其中除 Adseverin 外，其它蛋白质均首次在核基质中发现。 研究结果表明，8g/mL 姜黄素对人食管癌 EC9706细胞的凋亡具有显著诱导作用，在 EC9706 细胞凋亡过程中，不仅其核基质-中间纤维系统构型产生了明显的凋亡特征性变化，
47、而且其核基质蛋白组成也相应发生了明显改变。由此证实了与食管癌细胞凋亡相关的特异核基质蛋白的存在及其对食管癌细胞凋亡诱导的调控作用。特别提醒 ：正文内容由 PDF 文件转码生成，如您电脑未有相应转换码，则无法显示正文内容，请您下载相应软件，下载地址为 http:/ 。如还不能显示，可以联系我 q q 1627550258 ，提供原格式文档。“垐垯櫃 换烫梯葺铑?endstreamendobj2x 滌?U 閩 AZ箾 FTP 鈦X 飼?狛P? 燚?琯嫼 b?袍*甒?颙嫯?4)=r 宵?i?j 彺帖 B3 锝檡骹笪 yLrQ#?0 鯖 l 壛枒l 壛枒 l 壛枒 l 壛枒 l 壛枒 l 壛枒 l 壛枒 l 壛枒 l 壛枒 l 壛枒 l 壛枒 l 壛渓?擗#?“?# 綫 G 刿#K 芿$?7. 耟?Wa 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 皗 E|?pDb 癳$Fb 癳$Fb癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$F?責鯻 0 橔 C,f 薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵秾腵薍秾腵%?秾腵薍秾腵薍
