1、生态学专业毕业论文 精品论文 儿茶素类蛋白酶体抑制剂的设计合成和初步活性评价关键词：蛋白酶体抑制剂 高效液相 含氟 EGCG 甲基化 EGCG 合成工艺摘要：大部分真核生物细胞内的蛋白降解由泛素一蛋白酶体途径(UPP)所调控。有文献报道细胞内超过 80的蛋白都在蛋白酶体降解，这其中不仅包括短半寿期和长半寿期蛋白，而且包括肿瘤抑制因子、转录因子和细胞周期蛋白。蛋白酶体(proteasome)是一个广泛分布于真核细胞细胞质和细胞核中的多亚基大分子复合物，是一种具有多种蛋白水解功能的大分子复合物，它在承担细胞内蛋白质降解的泛素一蛋白酶体通路中起催化作用。蛋白酶体不仅可以催化异常蛋白质的降解，而且在许
2、多关键蛋白质的调控方面发挥着重要作用，这些蛋白质涉及到癌症和免疫性疾病等人类疾病的发病机制，是细胞代谢的一个重要组成部分1。而且，proteasome 抑制剂对多种肿瘤有抑制效果2，如含硼酸基的三肽蛋白酶体抑制剂万珂(Velcade)于 2005 年 11 月获得美国 FDA 批准上市，用于治疗骨髓瘤。因此，蛋白酶体已成为一个理想的药物开发的靶点，应用蛋白酶体抑制剂改变其酶切位点活性已成为目前抗肿瘤研究的热点。 分子生物学研究发现表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对蛋白酶体(proteasome)有很强的抑制活性，体外活性 IC50=86nM，体内活性 18M。EGCG 是茶叶中最主要的活性
3、成分。然而，作为先导化合物 EGCG 众多的酚羟基导致化学性质不稳定，极易氧化变质；其极性过大不利穿透细胞膜，生物利用度降低。小鼠口服 56 mg EGCG，仅能吸收 0.012。EGCG 在碱性或中性环境中不稳定性，所以 EGCG 在人体内不稳定，生物利用度降低。为了提高 EGCG 的稳定性，用氟代苯甲酸替换没食子酸，设计和半合成了 16 个全新的 EGCG 类似物，减少了分子中易被氧化的酚羟基的数目，同时合成了 6 个 EGCG 甲基化衍生物。初步活性测试显示，其中4 个 G 环氟取代的化合物 5，6，7，8 对 proteasome 抑制活性稍强于 EGCG;全乙酰化的含氟 EGCG 类
4、似物(5b，6b，7b，8b)对白血病 Jurkat T 细胞抑制活性明显高于全乙酰化的 EGCG。 本论文共半合成了 30 个全新化合物，包括 22 个目标化合物，目标化合物及部分重要中间化合物的结构都经过核磁共振氢谱和质谱验证。 本论文的具体内容包括：第一在实验室已建立的对茶多酚粗提物衍生化再提取的方法基础上，以较理想的收率和较简便的操作方法，得到了纯的中间体即苄基保护的 EGC(Bn-EGC)、甲氧基保护的 EGC(Me-EGC)，这些是合成EGCG 类似物的最关键中间体；利用半合成方法合成 EGCG 类似物。第二，HPLC跟踪乙酰化 EGCG 水解过程，确定水解时间，有效地避免了 EG
5、CG 多种副反应的发生，优化乙酰化水解条件。第三，本研究首次合成全甲基化的黄烷醇分子，建立合成方法，丰富黄烷醇类活性化合物，并提高了 EGCG 的稳定性。第四，部分 EGCG 衍生物做了初步蛋白酶体、体外人白血病细胞及体内人乳腺癌细胞活性。进一步活性测试有待进行。正文内容大部分真核生物细胞内的蛋白降解由泛素一蛋白酶体途径(UPP)所调控。有文献报道细胞内超过 80的蛋白都在蛋白酶体降解，这其中不仅包括短半寿期和长半寿期蛋白，而且包括肿瘤抑制因子、转录因子和细胞周期蛋白。蛋白酶体(proteasome)是一个广泛分布于真核细胞细胞质和细胞核中的多亚基大分子复合物，是一种具有多种蛋白水解功能的大分
6、子复合物，它在承担细胞内蛋白质降解的泛素一蛋白酶体通路中起催化作用。蛋白酶体不仅可以催化异常蛋白质的降解，而且在许多关键蛋白质的调控方面发挥着重要作用，这些蛋白质涉及到癌症和免疫性疾病等人类疾病的发病机制，是细胞代谢的一个重要组成部分1。而且，proteasome 抑制剂对多种肿瘤有抑制效果2，如含硼酸基的三肽蛋白酶体抑制剂万珂(Velcade)于 2005 年 11 月获得美国 FDA 批准上市，用于治疗骨髓瘤。因此，蛋白酶体已成为一个理想的药物开发的靶点，应用蛋白酶体抑制剂改变其酶切位点活性已成为目前抗肿瘤研究的热点。 分子生物学研究发现表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对蛋白酶体(pr
7、oteasome)有很强的抑制活性，体外活性 IC50=86nM，体内活性 18M。EGCG 是茶叶中最主要的活性成分。然而，作为先导化合物 EGCG 众多的酚羟基导致化学性质不稳定，极易氧化变质；其极性过大不利穿透细胞膜，生物利用度降低。小鼠口服 56 mg EGCG，仅能吸收 0.012。EGCG 在碱性或中性环境中不稳定性，所以 EGCG 在人体内不稳定，生物利用度降低。为了提高 EGCG 的稳定性，用氟代苯甲酸替换没食子酸，设计和半合成了 16 个全新的 EGCG 类似物，减少了分子中易被氧化的酚羟基的数目，同时合成了 6 个 EGCG 甲基化衍生物。初步活性测试显示，其中4 个 G
8、环氟取代的化合物 5，6，7，8 对 proteasome 抑制活性稍强于 EGCG;全乙酰化的含氟 EGCG 类似物(5b，6b，7b，8b)对白血病 Jurkat T 细胞抑制活性明显高于全乙酰化的 EGCG。 本论文共半合成了 30 个全新化合物，包括 22 个目标化合物，目标化合物及部分重要中间化合物的结构都经过核磁共振氢谱和质谱验证。 本论文的具体内容包括：第一在实验室已建立的对茶多酚粗提物衍生化再提取的方法基础上，以较理想的收率和较简便的操作方法，得到了纯的中间体即苄基保护的 EGC(Bn-EGC)、甲氧基保护的 EGC(Me-EGC)，这些是合成EGCG 类似物的最关键中间体；利
9、用半合成方法合成 EGCG 类似物。第二，HPLC跟踪乙酰化 EGCG 水解过程，确定水解时间，有效地避免了 EGCG 多种副反应的发生，优化乙酰化水解条件。第三，本研究首次合成全甲基化的黄烷醇分子，建立合成方法，丰富黄烷醇类活性化合物，并提高了 EGCG 的稳定性。第四，部分 EGCG 衍生物做了初步蛋白酶体、体外人白血病细胞及体内人乳腺癌细胞活性。进一步活性测试有待进行。大部分真核生物细胞内的蛋白降解由泛素一蛋白酶体途径(UPP)所调控。有文献报道细胞内超过 80的蛋白都在蛋白酶体降解，这其中不仅包括短半寿期和长半寿期蛋白，而且包括肿瘤抑制因子、转录因子和细胞周期蛋白。蛋白酶体(prote
10、asome)是一个广泛分布于真核细胞细胞质和细胞核中的多亚基大分子复合物，是一种具有多种蛋白水解功能的大分子复合物，它在承担细胞内蛋白质降解的泛素一蛋白酶体通路中起催化作用。蛋白酶体不仅可以催化异常蛋白质的降解，而且在许多关键蛋白质的调控方面发挥着重要作用，这些蛋白质涉及到癌症和免疫性疾病等人类疾病的发病机制，是细胞代谢的一个重要组成部分1。而且，proteasome 抑制剂对多种肿瘤有抑制效果2，如含硼酸基的三肽蛋白酶体抑制剂万珂(Velcade)于 2005 年 11 月获得美国 FDA 批准上市，用于治疗骨髓瘤。因此，蛋白酶体已成为一个理想的药物开发的靶点，应用蛋白酶体抑制剂改变其酶切位
11、点活性已成为目前抗肿瘤研究的热点。 分子生物学研究发现表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对蛋白酶体(proteasome)有很强的抑制活性，体外活性 IC50=86nM，体内活性 18M。EGCG 是茶叶中最主要的活性成分。然而，作为先导化合物 EGCG 众多的酚羟基导致化学性质不稳定，极易氧化变质；其极性过大不利穿透细胞膜，生物利用度降低。小鼠口服 56 mg EGCG，仅能吸收 0.012。EGCG 在碱性或中性环境中不稳定性，所以 EGCG 在人体内不稳定，生物利用度降低。为了提高 EGCG 的稳定性，用氟代苯甲酸替换没食子酸，设计和半合成了 16 个全新的 EGCG 类似物，减少了分
12、子中易被氧化的酚羟基的数目，同时合成了 6 个 EGCG 甲基化衍生物。初步活性测试显示，其中 4 个 G 环氟取代的化合物 5，6，7，8 对 proteasome 抑制活性稍强于 EGCG;全乙酰化的含氟 EGCG 类似物(5b，6b，7b，8b)对白血病 Jurkat T 细胞抑制活性明显高于全乙酰化的 EGCG。 本论文共半合成了 30 个全新化合物，包括 22 个目标化合物，目标化合物及部分重要中间化合物的结构都经过核磁共振氢谱和质谱验证。 本论文的具体内容包括：第一在实验室已建立的对茶多酚粗提物衍生化再提取的方法基础上，以较理想的收率和较简便的操作方法，得到了纯的中间体即苄基保护的
13、 EGC(Bn-EGC)、甲氧基保护的 EGC(Me-EGC)，这些是合成 EGCG类似物的最关键中间体；利用半合成方法合成 EGCG 类似物。第二，HPLC 跟踪乙酰化 EGCG 水解过程，确定水解时间，有效地避免了 EGCG 多种副反应的发生，优化乙酰化水解条件。第三，本研究首次合成全甲基化的黄烷醇分子，建立合成方法，丰富黄烷醇类活性化合物，并提高了 EGCG 的稳定性。第四，部分EGCG 衍生物做了初步蛋白酶体、体外人白血病细胞及体内人乳腺癌细胞活性。进一步活性测试有待进行。大部分真核生物细胞内的蛋白降解由泛素一蛋白酶体途径(UPP)所调控。有文献报道细胞内超过 80的蛋白都在蛋白酶体降
14、解，这其中不仅包括短半寿期和长半寿期蛋白，而且包括肿瘤抑制因子、转录因子和细胞周期蛋白。蛋白酶体(proteasome)是一个广泛分布于真核细胞细胞质和细胞核中的多亚基大分子复合物，是一种具有多种蛋白水解功能的大分子复合物，它在承担细胞内蛋白质降解的泛素一蛋白酶体通路中起催化作用。蛋白酶体不仅可以催化异常蛋白质的降解，而且在许多关键蛋白质的调控方面发挥着重要作用，这些蛋白质涉及到癌症和免疫性疾病等人类疾病的发病机制，是细胞代谢的一个重要组成部分1。而且，proteasome 抑制剂对多种肿瘤有抑制效果2，如含硼酸基的三肽蛋白酶体抑制剂万珂(Velcade)于 2005 年 11 月获得美国 F
15、DA 批准上市，用于治疗骨髓瘤。因此，蛋白酶体已成为一个理想的药物开发的靶点，应用蛋白酶体抑制剂改变其酶切位点活性已成为目前抗肿瘤研究的热点。 分子生物学研究发现表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对蛋白酶体(proteasome)有很强的抑制活性，体外活性 IC50=86nM，体内活性 18M。EGCG 是茶叶中最主要的活性成分。然而，作为先导化合物 EGCG 众多的酚羟基导致化学性质不稳定，极易氧化变质；其极性过大不利穿透细胞膜，生物利用度降低。小鼠口服 56 mg EGCG，仅能吸收 0.012。EGCG 在碱性或中性环境中不稳定性，所以 EGCG 在人体内不稳定，生物利用度降低。为了提
16、高 EGCG 的稳定性，用氟代苯甲酸替换没食子酸，设计和半合成了 16 个全新的 EGCG 类似物，减少了分子中易被氧化的酚羟基的数目，同时合成了 6 个 EGCG 甲基化衍生物。初步活性测试显示，其中 4 个 G 环氟取代的化合物 5，6，7，8 对 proteasome 抑制活性稍强于 EGCG;全乙酰化的含氟 EGCG 类似物(5b，6b，7b，8b)对白血病 Jurkat T 细胞抑制活性明显高于全乙酰化的 EGCG。 本论文共半合成了 30 个全新化合物，包括 22 个目标化合物，目标化合物及部分重要中间化合物的结构都经过核磁共振氢谱和质谱验证。 本论文的具体内容包括：第一在实验室已
17、建立的对茶多酚粗提物衍生化再提取的方法基础上，以较理想的收率和较简便的操作方法，得到了纯的中间体即苄基保护的 EGC(Bn-EGC)、甲氧基保护的 EGC(Me-EGC)，这些是合成 EGCG类似物的最关键中间体；利用半合成方法合成 EGCG 类似物。第二，HPLC 跟踪乙酰化 EGCG 水解过程，确定水解时间，有效地避免了 EGCG 多种副反应的发生，优化乙酰化水解条件。第三，本研究首次合成全甲基化的黄烷醇分子，建立合成方法，丰富黄烷醇类活性化合物，并提高了 EGCG 的稳定性。第四，部分EGCG 衍生物做了初步蛋白酶体、体外人白血病细胞及体内人乳腺癌细胞活性。进一步活性测试有待进行。大部分
18、真核生物细胞内的蛋白降解由泛素一蛋白酶体途径(UPP)所调控。有文献报道细胞内超过 80的蛋白都在蛋白酶体降解，这其中不仅包括短半寿期和长半寿期蛋白，而且包括肿瘤抑制因子、转录因子和细胞周期蛋白。蛋白酶体(proteasome)是一个广泛分布于真核细胞细胞质和细胞核中的多亚基大分子复合物，是一种具有多种蛋白水解功能的大分子复合物，它在承担细胞内蛋白质降解的泛素一蛋白酶体通路中起催化作用。蛋白酶体不仅可以催化异常蛋白质的降解，而且在许多关键蛋白质的调控方面发挥着重要作用，这些蛋白质涉及到癌症和免疫性疾病等人类疾病的发病机制，是细胞代谢的一个重要组成部分1。而且，proteasome 抑制剂对多种
19、肿瘤有抑制效果2，如含硼酸基的三肽蛋白酶体抑制剂万珂(Velcade)于 2005 年 11 月获得美国 FDA 批准上市，用于治疗骨髓瘤。因此，蛋白酶体已成为一个理想的药物开发的靶点，应用蛋白酶体抑制剂改变其酶切位点活性已成为目前抗肿瘤研究的热点。 分子生物学研究发现表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对蛋白酶体(proteasome)有很强的抑制活性，体外活性 IC50=86nM，体内活性 18M。EGCG 是茶叶中最主要的活性成分。然而，作为先导化合物 EGCG 众多的酚羟基导致化学性质不稳定，极易氧化变质；其极性过大不利穿透细胞膜，生物利用度降低。小鼠口服 56 mg EGCG，仅能吸
20、收 0.012。EGCG 在碱性或中性环境中不稳定性，所以 EGCG 在人体内不稳定，生物利用度降低。为了提高 EGCG 的稳定性，用氟代苯甲酸替换没食子酸，设计和半合成了 16 个全新的 EGCG 类似物，减少了分子中易被氧化的酚羟基的数目，同时合成了 6 个 EGCG 甲基化衍生物。初步活性测试显示，其中 4 个 G 环氟取代的化合物 5，6，7，8 对 proteasome 抑制活性稍强于 EGCG;全乙酰化的含氟 EGCG 类似物(5b，6b，7b，8b)对白血病 Jurkat T 细胞抑制活性明显高于全乙酰化的 EGCG。 本论文共半合成了 30 个全新化合物，包括 22 个目标化合
21、物，目标化合物及部分重要中间化合物的结构都经过核磁共振氢谱和质谱验证。 本论文的具体内容包括：第一在实验室已建立的对茶多酚粗提物衍生化再提取的方法基础上，以较理想的收率和较简便的操作方法，得到了纯的中间体即苄基保护的 EGC(Bn-EGC)、甲氧基保护的 EGC(Me-EGC)，这些是合成 EGCG类似物的最关键中间体；利用半合成方法合成 EGCG 类似物。第二，HPLC 跟踪乙酰化 EGCG 水解过程，确定水解时间，有效地避免了 EGCG 多种副反应的发生，优化乙酰化水解条件。第三，本研究首次合成全甲基化的黄烷醇分子，建立合成方法，丰富黄烷醇类活性化合物，并提高了 EGCG 的稳定性。第四，
22、部分EGCG 衍生物做了初步蛋白酶体、体外人白血病细胞及体内人乳腺癌细胞活性。进一步活性测试有待进行。大部分真核生物细胞内的蛋白降解由泛素一蛋白酶体途径(UPP)所调控。有文献报道细胞内超过 80的蛋白都在蛋白酶体降解，这其中不仅包括短半寿期和长半寿期蛋白，而且包括肿瘤抑制因子、转录因子和细胞周期蛋白。蛋白酶体(proteasome)是一个广泛分布于真核细胞细胞质和细胞核中的多亚基大分子复合物，是一种具有多种蛋白水解功能的大分子复合物，它在承担细胞内蛋白质降解的泛素一蛋白酶体通路中起催化作用。蛋白酶体不仅可以催化异常蛋白质的降解，而且在许多关键蛋白质的调控方面发挥着重要作用，这些蛋白质涉及到癌
23、症和免疫性疾病等人类疾病的发病机制，是细胞代谢的一个重要组成部分1。而且，proteasome 抑制剂对多种肿瘤有抑制效果2，如含硼酸基的三肽蛋白酶体抑制剂万珂(Velcade)于 2005 年 11 月获得美国 FDA 批准上市，用于治疗骨髓瘤。因此，蛋白酶体已成为一个理想的药物开发的靶点，应用蛋白酶体抑制剂改变其酶切位点活性已成为目前抗肿瘤研究的热点。 分子生物学研究发现表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对蛋白酶体(proteasome)有很强的抑制活性，体外活性 IC50=86nM，体内活性 18M。EGCG 是茶叶中最主要的活性成分。然而，作为先导化合物 EGCG 众多的酚羟基导致化
24、学性质不稳定，极易氧化变质；其极性过大不利穿透细胞膜，生物利用度降低。小鼠口服 56 mg EGCG，仅能吸收 0.012。EGCG 在碱性或中性环境中不稳定性，所以 EGCG 在人体内不稳定，生物利用度降低。为了提高 EGCG 的稳定性，用氟代苯甲酸替换没食子酸，设计和半合成了 16 个全新的 EGCG 类似物，减少了分子中易被氧化的酚羟基的数目，同时合成了 6 个 EGCG 甲基化衍生物。初步活性测试显示，其中 4 个 G 环氟取代的化合物 5，6，7，8 对 proteasome 抑制活性稍强于 EGCG;全乙酰化的含氟 EGCG 类似物(5b，6b，7b，8b)对白血病 Jurkat
25、T 细胞抑制活性明显高于全乙酰化的 EGCG。 本论文共半合成了 30 个全新化合物，包括 22 个目标化合物，目标化合物及部分重要中间化合物的结构都经过核磁共振氢谱和质谱验证。 本论文的具体内容包括：第一在实验室已建立的对茶多酚粗提物衍生化再提取的方法基础上，以较理想的收率和较简便的操作方法，得到了纯的中间体即苄基保护的 EGC(Bn-EGC)、甲氧基保护的 EGC(Me-EGC)，这些是合成 EGCG类似物的最关键中间体；利用半合成方法合成 EGCG 类似物。第二，HPLC 跟踪乙酰化 EGCG 水解过程，确定水解时间，有效地避免了 EGCG 多种副反应的发生，优化乙酰化水解条件。第三，本
26、研究首次合成全甲基化的黄烷醇分子，建立合成方法，丰富黄烷醇类活性化合物，并提高了 EGCG 的稳定性。第四，部分EGCG 衍生物做了初步蛋白酶体、体外人白血病细胞及体内人乳腺癌细胞活性。进一步活性测试有待进行。大部分真核生物细胞内的蛋白降解由泛素一蛋白酶体途径(UPP)所调控。有文献报道细胞内超过 80的蛋白都在蛋白酶体降解，这其中不仅包括短半寿期和长半寿期蛋白，而且包括肿瘤抑制因子、转录因子和细胞周期蛋白。蛋白酶体(proteasome)是一个广泛分布于真核细胞细胞质和细胞核中的多亚基大分子复合物，是一种具有多种蛋白水解功能的大分子复合物，它在承担细胞内蛋白质降解的泛素一蛋白酶体通路中起催化
27、作用。蛋白酶体不仅可以催化异常蛋白质的降解，而且在许多关键蛋白质的调控方面发挥着重要作用，这些蛋白质涉及到癌症和免疫性疾病等人类疾病的发病机制，是细胞代谢的一个重要组成部分1。而且，proteasome 抑制剂对多种肿瘤有抑制效果2，如含硼酸基的三肽蛋白酶体抑制剂万珂(Velcade)于 2005 年 11 月获得美国 FDA 批准上市，用于治疗骨髓瘤。因此，蛋白酶体已成为一个理想的药物开发的靶点，应用蛋白酶体抑制剂改变其酶切位点活性已成为目前抗肿瘤研究的热点。 分子生物学研究发现表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对蛋白酶体(proteasome)有很强的抑制活性，体外活性 IC50=86n
28、M，体内活性 18M。EGCG 是茶叶中最主要的活性成分。然而，作为先导化合物 EGCG 众多的酚羟基导致化学性质不稳定，极易氧化变质；其极性过大不利穿透细胞膜，生物利用度降低。小鼠口服 56 mg EGCG，仅能吸收 0.012。EGCG 在碱性或中性环境中不稳定性，所以 EGCG 在人体内不稳定，生物利用度降低。为了提高 EGCG 的稳定性，用氟代苯甲酸替换没食子酸，设计和半合成了 16 个全新的 EGCG 类似物，减少了分子中易被氧化的酚羟基的数目，同时合成了 6 个 EGCG 甲基化衍生物。初步活性测试显示，其中 4 个 G 环氟取代的化合物 5，6，7，8 对 proteasome
29、抑制活性稍强于 EGCG;全乙酰化的含氟 EGCG 类似物(5b，6b，7b，8b)对白血病 Jurkat T 细胞抑制活性明显高于全乙酰化的 EGCG。 本论文共半合成了 30 个全新化合物，包括 22 个目标化合物，目标化合物及部分重要中间化合物的结构都经过核磁共振氢谱和质谱验证。 本论文的具体内容包括：第一在实验室已建立的对茶多酚粗提物衍生化再提取的方法基础上，以较理想的收率和较简便的操作方法，得到了纯的中间体即苄基保护的 EGC(Bn-EGC)、甲氧基保护的 EGC(Me-EGC)，这些是合成 EGCG类似物的最关键中间体；利用半合成方法合成 EGCG 类似物。第二，HPLC 跟踪乙酰
30、化 EGCG 水解过程，确定水解时间，有效地避免了 EGCG 多种副反应的发生，优化乙酰化水解条件。第三，本研究首次合成全甲基化的黄烷醇分子，建立合成方法，丰富黄烷醇类活性化合物，并提高了 EGCG 的稳定性。第四，部分EGCG 衍生物做了初步蛋白酶体、体外人白血病细胞及体内人乳腺癌细胞活性。进一步活性测试有待进行。大部分真核生物细胞内的蛋白降解由泛素一蛋白酶体途径(UPP)所调控。有文献报道细胞内超过 80的蛋白都在蛋白酶体降解，这其中不仅包括短半寿期和长半寿期蛋白，而且包括肿瘤抑制因子、转录因子和细胞周期蛋白。蛋白酶体(proteasome)是一个广泛分布于真核细胞细胞质和细胞核中的多亚基
31、大分子复合物，是一种具有多种蛋白水解功能的大分子复合物，它在承担细胞内蛋白质降解的泛素一蛋白酶体通路中起催化作用。蛋白酶体不仅可以催化异常蛋白质的降解，而且在许多关键蛋白质的调控方面发挥着重要作用，这些蛋白质涉及到癌症和免疫性疾病等人类疾病的发病机制，是细胞代谢的一个重要组成部分1。而且，proteasome 抑制剂对多种肿瘤有抑制效果2，如含硼酸基的三肽蛋白酶体抑制剂万珂(Velcade)于 2005 年 11 月获得美国 FDA 批准上市，用于治疗骨髓瘤。因此，蛋白酶体已成为一个理想的药物开发的靶点，应用蛋白酶体抑制剂改变其酶切位点活性已成为目前抗肿瘤研究的热点。 分子生物学研究发现表没食
32、子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对蛋白酶体(proteasome)有很强的抑制活性，体外活性 IC50=86nM，体内活性 18M。EGCG 是茶叶中最主要的活性成分。然而，作为先导化合物 EGCG 众多的酚羟基导致化学性质不稳定，极易氧化变质；其极性过大不利穿透细胞膜，生物利用度降低。小鼠口服 56 mg EGCG，仅能吸收 0.012。EGCG 在碱性或中性环境中不稳定性，所以 EGCG 在人体内不稳定，生物利用度降低。为了提高 EGCG 的稳定性，用氟代苯甲酸替换没食子酸，设计和半合成了 16 个全新的 EGCG 类似物，减少了分子中易被氧化的酚羟基的数目，同时合成了 6 个 EGCG 甲
33、基化衍生物。初步活性测试显示，其中 4 个 G 环氟取代的化合物 5，6，7，8 对 proteasome 抑制活性稍强于 EGCG;全乙酰化的含氟 EGCG 类似物(5b，6b，7b，8b)对白血病 Jurkat T 细胞抑制活性明显高于全乙酰化的 EGCG。 本论文共半合成了 30 个全新化合物，包括 22 个目标化合物，目标化合物及部分重要中间化合物的结构都经过核磁共振氢谱和质谱验证。 本论文的具体内容包括：第一在实验室已建立的对茶多酚粗提物衍生化再提取的方法基础上，以较理想的收率和较简便的操作方法，得到了纯的中间体即苄基保护的 EGC(Bn-EGC)、甲氧基保护的 EGC(Me-EGC
34、)，这些是合成 EGCG类似物的最关键中间体；利用半合成方法合成 EGCG 类似物。第二，HPLC 跟踪乙酰化 EGCG 水解过程，确定水解时间，有效地避免了 EGCG 多种副反应的发生，优化乙酰化水解条件。第三，本研究首次合成全甲基化的黄烷醇分子，建立合成方法，丰富黄烷醇类活性化合物，并提高了 EGCG 的稳定性。第四，部分EGCG 衍生物做了初步蛋白酶体、体外人白血病细胞及体内人乳腺癌细胞活性。进一步活性测试有待进行。大部分真核生物细胞内的蛋白降解由泛素一蛋白酶体途径(UPP)所调控。有文献报道细胞内超过 80的蛋白都在蛋白酶体降解，这其中不仅包括短半寿期和长半寿期蛋白，而且包括肿瘤抑制因
35、子、转录因子和细胞周期蛋白。蛋白酶体(proteasome)是一个广泛分布于真核细胞细胞质和细胞核中的多亚基大分子复合物，是一种具有多种蛋白水解功能的大分子复合物，它在承担细胞内蛋白质降解的泛素一蛋白酶体通路中起催化作用。蛋白酶体不仅可以催化异常蛋白质的降解，而且在许多关键蛋白质的调控方面发挥着重要作用，这些蛋白质涉及到癌症和免疫性疾病等人类疾病的发病机制，是细胞代谢的一个重要组成部分1。而且，proteasome 抑制剂对多种肿瘤有抑制效果2，如含硼酸基的三肽蛋白酶体抑制剂万珂(Velcade)于 2005 年 11 月获得美国 FDA 批准上市，用于治疗骨髓瘤。因此，蛋白酶体已成为一个理想
36、的药物开发的靶点，应用蛋白酶体抑制剂改变其酶切位点活性已成为目前抗肿瘤研究的热点。 分子生物学研究发现表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对蛋白酶体(proteasome)有很强的抑制活性，体外活性 IC50=86nM，体内活性 18M。EGCG 是茶叶中最主要的活性成分。然而，作为先导化合物 EGCG 众多的酚羟基导致化学性质不稳定，极易氧化变质；其极性过大不利穿透细胞膜，生物利用度降低。小鼠口服 56 mg EGCG，仅能吸收 0.012。EGCG 在碱性或中性环境中不稳定性，所以 EGCG 在人体内不稳定，生物利用度降低。为了提高 EGCG 的稳定性，用氟代苯甲酸替换没食子酸，设计和半合
37、成了 16 个全新的 EGCG 类似物，减少了分子中易被氧化的酚羟基的数目，同时合成了 6 个 EGCG 甲基化衍生物。初步活性测试显示，其中 4 个 G 环氟取代的化合物 5，6，7，8 对 proteasome 抑制活性稍强于 EGCG;全乙酰化的含氟 EGCG 类似物(5b，6b，7b，8b)对白血病 Jurkat T 细胞抑制活性明显高于全乙酰化的 EGCG。 本论文共半合成了 30 个全新化合物，包括 22 个目标化合物，目标化合物及部分重要中间化合物的结构都经过核磁共振氢谱和质谱验证。 本论文的具体内容包括：第一在实验室已建立的对茶多酚粗提物衍生化再提取的方法基础上，以较理想的收率
38、和较简便的操作方法，得到了纯的中间体即苄基保护的 EGC(Bn-EGC)、甲氧基保护的 EGC(Me-EGC)，这些是合成 EGCG类似物的最关键中间体；利用半合成方法合成 EGCG 类似物。第二，HPLC 跟踪乙酰化 EGCG 水解过程，确定水解时间，有效地避免了 EGCG 多种副反应的发生，优化乙酰化水解条件。第三，本研究首次合成全甲基化的黄烷醇分子，建立合成方法，丰富黄烷醇类活性化合物，并提高了 EGCG 的稳定性。第四，部分EGCG 衍生物做了初步蛋白酶体、体外人白血病细胞及体内人乳腺癌细胞活性。进一步活性测试有待进行。大部分真核生物细胞内的蛋白降解由泛素一蛋白酶体途径(UPP)所调控
39、。有文献报道细胞内超过 80的蛋白都在蛋白酶体降解，这其中不仅包括短半寿期和长半寿期蛋白，而且包括肿瘤抑制因子、转录因子和细胞周期蛋白。蛋白酶体(proteasome)是一个广泛分布于真核细胞细胞质和细胞核中的多亚基大分子复合物，是一种具有多种蛋白水解功能的大分子复合物，它在承担细胞内蛋白质降解的泛素一蛋白酶体通路中起催化作用。蛋白酶体不仅可以催化异常蛋白质的降解，而且在许多关键蛋白质的调控方面发挥着重要作用，这些蛋白质涉及到癌症和免疫性疾病等人类疾病的发病机制，是细胞代谢的一个重要组成部分1。而且，proteasome 抑制剂对多种肿瘤有抑制效果2，如含硼酸基的三肽蛋白酶体抑制剂万珂(Vel
40、cade)于 2005 年 11 月获得美国 FDA 批准上市，用于治疗骨髓瘤。因此，蛋白酶体已成为一个理想的药物开发的靶点，应用蛋白酶体抑制剂改变其酶切位点活性已成为目前抗肿瘤研究的热点。 分子生物学研究发现表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对蛋白酶体(proteasome)有很强的抑制活性，体外活性 IC50=86nM，体内活性 18M。EGCG 是茶叶中最主要的活性成分。然而，作为先导化合物 EGCG 众多的酚羟基导致化学性质不稳定，极易氧化变质；其极性过大不利穿透细胞膜，生物利用度降低。小鼠口服 56 mg EGCG，仅能吸收 0.012。EGCG 在碱性或中性环境中不稳定性，所以
41、EGCG 在人体内不稳定，生物利用度降低。为了提高 EGCG 的稳定性，用氟代苯甲酸替换没食子酸，设计和半合成了 16 个全新的 EGCG 类似物，减少了分子中易被氧化的酚羟基的数目，同时合成了 6 个 EGCG 甲基化衍生物。初步活性测试显示，其中 4 个 G 环氟取代的化合物 5，6，7，8 对 proteasome 抑制活性稍强于 EGCG;全乙酰化的含氟 EGCG 类似物(5b，6b，7b，8b)对白血病 Jurkat T 细胞抑制活性明显高于全乙酰化的 EGCG。 本论文共半合成了 30 个全新化合物，包括 22 个目标化合物，目标化合物及部分重要中间化合物的结构都经过核磁共振氢谱和
42、质谱验证。 本论文的具体内容包括：第一在实验室已建立的对茶多酚粗提物衍生化再提取的方法基础上，以较理想的收率和较简便的操作方法，得到了纯的中间体即苄基保护的 EGC(Bn-EGC)、甲氧基保护的 EGC(Me-EGC)，这些是合成 EGCG类似物的最关键中间体；利用半合成方法合成 EGCG 类似物。第二，HPLC 跟踪乙酰化 EGCG 水解过程，确定水解时间，有效地避免了 EGCG 多种副反应的发生，优化乙酰化水解条件。第三，本研究首次合成全甲基化的黄烷醇分子，建立合成方法，丰富黄烷醇类活性化合物，并提高了 EGCG 的稳定性。第四，部分EGCG 衍生物做了初步蛋白酶体、体外人白血病细胞及体内
43、人乳腺癌细胞活性。进一步活性测试有待进行。大部分真核生物细胞内的蛋白降解由泛素一蛋白酶体途径(UPP)所调控。有文献报道细胞内超过 80的蛋白都在蛋白酶体降解，这其中不仅包括短半寿期和长半寿期蛋白，而且包括肿瘤抑制因子、转录因子和细胞周期蛋白。蛋白酶体(proteasome)是一个广泛分布于真核细胞细胞质和细胞核中的多亚基大分子复合物，是一种具有多种蛋白水解功能的大分子复合物，它在承担细胞内蛋白质降解的泛素一蛋白酶体通路中起催化作用。蛋白酶体不仅可以催化异常蛋白质的降解，而且在许多关键蛋白质的调控方面发挥着重要作用，这些蛋白质涉及到癌症和免疫性疾病等人类疾病的发病机制，是细胞代谢的一个重要组成
44、部分1。而且，proteasome 抑制剂对多种肿瘤有抑制效果2，如含硼酸基的三肽蛋白酶体抑制剂万珂(Velcade)于 2005 年 11 月获得美国 FDA 批准上市，用于治疗骨髓瘤。因此，蛋白酶体已成为一个理想的药物开发的靶点，应用蛋白酶体抑制剂改变其酶切位点活性已成为目前抗肿瘤研究的热点。 分子生物学研究发现表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对蛋白酶体(proteasome)有很强的抑制活性，体外活性 IC50=86nM，体内活性 18M。EGCG 是茶叶中最主要的活性成分。然而，作为先导化合物 EGCG 众多的酚羟基导致化学性质不稳定，极易氧化变质；其极性过大不利穿透细胞膜，生物利
45、用度降低。小鼠口服 56 mg EGCG，仅能吸收 0.012。EGCG 在碱性或中性环境中不稳定性，所以 EGCG 在人体内不稳定，生物利用度降低。为了提高 EGCG 的稳定性，用氟代苯甲酸替换没食子酸，设计和半合成了 16 个全新的 EGCG 类似物，减少了分子中易被氧化的酚羟基的数目，同时合成了 6 个 EGCG 甲基化衍生物。初步活性测试显示，其中 4 个 G 环氟取代的化合物 5，6，7，8 对 proteasome 抑制活性稍强于 EGCG;全乙酰化的含氟 EGCG 类似物(5b，6b，7b，8b)对白血病 Jurkat T 细胞抑制活性明显高于全乙酰化的 EGCG。 本论文共半合
46、成了 30 个全新化合物，包括 22 个目标化合物，目标化合物及部分重要中间化合物的结构都经过核磁共振氢谱和质谱验证。 本论文的具体内容包括：第一在实验室已建立的对茶多酚粗提物衍生化再提取的方法基础上，以较理想的收率和较简便的操作方法，得到了纯的中间体即苄基保护的 EGC(Bn-EGC)、甲氧基保护的 EGC(Me-EGC)，这些是合成 EGCG类似物的最关键中间体；利用半合成方法合成 EGCG 类似物。第二，HPLC 跟踪乙酰化 EGCG 水解过程，确定水解时间，有效地避免了 EGCG 多种副反应的发生，优化乙酰化水解条件。第三，本研究首次合成全甲基化的黄烷醇分子，建立合成方法，丰富黄烷醇类
47、活性化合物，并提高了 EGCG 的稳定性。第四，部分EGCG 衍生物做了初步蛋白酶体、体外人白血病细胞及体内人乳腺癌细胞活性。进一步活性测试有待进行。特别提醒 ：正文内容由 PDF 文件转码生成，如您电脑未有相应转换码，则无法显示正文内容，请您下载相应软件，下载地址为 http:/ 。如还不能显示，可以联系我 q q 1627550258 ，提供原格式文档。“垐垯櫃 换烫梯葺铑?endstreamendobj2x 滌?U 閩 AZ箾 FTP 鈦X 飼?狛P? 燚?琯嫼 b?袍*甒?颙嫯?4)=r 宵?i?j 彺帖 B3 锝檡骹笪 yLrQ#?0 鯖 l 壛枒l 壛枒 l 壛枒 l 壛枒 l 壛枒 l 壛枒 l 壛枒 l 壛枒 l 壛枒 l 壛枒 l 壛枒 l 壛渓?擗#?“?# 綫 G 刿#K 芿$?7. 耟?Wa 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 皗 E|?pDb 癳$Fb 癳$Fb癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$F?責鯻 0 橔 C,f 薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵秾腵薍秾腵%?秾腵薍
