1、免疫学专业毕业论文 精品论文 人天然 Fab 噬菌体抗体库的构建关键词：噬菌体抗体库 Fab 抗体 分子生物学 人源抗体摘要：目的： 采用噬菌体抗体库这一新兴生物学技术，构建天然人源 Fab 抗体库。 方法： 收集未免疫的健康人外周血分离淋巴细胞，提取总 RNA 后逆转录获得 cDNA，通过 PCR 扩增抗体重链和轻链基因片段，回收 700bp 左右的目的基因片段，将基因片段连接到噬菌体 pComb3 中，将构建的重组噬菌体载体pComb3 电穿孔转化感受态细胞 XL1-Blue 构建轻链文库，随后将重链基因经XhoI 和 SpeI 双酶切后连到轻链质粒文库中，将构建的重组噬菌体载体电转化XL
2、1-Blue，经辅助噬菌体 VCSM13 超感染，构建非免疫人源 Fab 噬菌体抗体库。 结果： 经过轻链和重链基因的重组和转化，获得库容量为1.261011pfu/ml 的 Fab 噬菌体抗体库。 结论： 本研究构建的人天然噬菌体抗体库为进一步筛选特异性抗体提供基础，也是分子生物学实验方法的-个探索与尝试。为今后筛选制备抗体提供了技术平台和思路，有望为后续获得多种有高潜在中和活性的人源抗体打下一定的基础。正文内容目的： 采用噬菌体抗体库这一新兴生物学技术，构建天然人源 Fab 抗体库。 方法： 收集未免疫的健康人外周血分离淋巴细胞，提取总 RNA 后逆转录获得 cDNA，通过 PCR 扩增抗
3、体重链和轻链基因片段，回收 700bp 左右的目的基因片段，将基因片段连接到噬菌体 pComb3 中，将构建的重组噬菌体载体pComb3 电穿孔转化感受态细胞 XL1-Blue 构建轻链文库，随后将重链基因经XhoI 和 SpeI 双酶切后连到轻链质粒文库中，将构建的重组噬菌体载体电转化XL1-Blue，经辅助噬菌体 VCSM13 超感染，构建非免疫人源 Fab 噬菌体抗体库。 结果： 经过轻链和重链基因的重组和转化，获得库容量为1.261011pfu/ml 的 Fab 噬菌体抗体库。 结论： 本研究构建的人天然噬菌体抗体库为进一步筛选特异性抗体提供基础，也是分子生物学实验方法的-个探索与尝试
4、。为今后筛选制备抗体提供了技术平台和思路，有望为后续获得多种有高潜在中和活性的人源抗体打下一定的基础。目的： 采用噬菌体抗体库这一新兴生物学技术，构建天然人源 Fab 抗体库。 方法： 收集未免疫的健康人外周血分离淋巴细胞，提取总 RNA 后逆转录获得cDNA，通过 PCR 扩增抗体重链和轻链基因片段，回收 700bp 左右的目的基因片段，将基因片段连接到噬菌体 pComb3 中，将构建的重组噬菌体载体 pComb3 电穿孔转化感受态细胞 XL1-Blue 构建轻链文库，随后将重链基因经 XhoI 和 SpeI双酶切后连到轻链质粒文库中，将构建的重组噬菌体载体电转化 XL1-Blue，经辅助噬
5、菌体 VCSM13 超感染，构建非免疫人源 Fab 噬菌体抗体库。 结果： 经过轻链和重链基因的重组和转化，获得库容量为 1.261011pfu/ml 的 Fab 噬菌体抗体库。 结论： 本研究构建的人天然噬菌体抗体库为进一步筛选特异性抗体提供基础，也是分子生物学实验方法的-个探索与尝试。为今后筛选制备抗体提供了技术平台和思路，有望为后续获得多种有高潜在中和活性的人源抗体打下一定的基础。目的： 采用噬菌体抗体库这一新兴生物学技术，构建天然人源 Fab 抗体库。 方法： 收集未免疫的健康人外周血分离淋巴细胞，提取总 RNA 后逆转录获得cDNA，通过 PCR 扩增抗体重链和轻链基因片段，回收 7
6、00bp 左右的目的基因片段，将基因片段连接到噬菌体 pComb3 中，将构建的重组噬菌体载体 pComb3 电穿孔转化感受态细胞 XL1-Blue 构建轻链文库，随后将重链基因经 XhoI 和 SpeI双酶切后连到轻链质粒文库中，将构建的重组噬菌体载体电转化 XL1-Blue，经辅助噬菌体 VCSM13 超感染，构建非免疫人源 Fab 噬菌体抗体库。 结果： 经过轻链和重链基因的重组和转化，获得库容量为 1.261011pfu/ml 的 Fab 噬菌体抗体库。 结论： 本研究构建的人天然噬菌体抗体库为进一步筛选特异性抗体提供基础，也是分子生物学实验方法的-个探索与尝试。为今后筛选制备抗体提供
7、了技术平台和思路，有望为后续获得多种有高潜在中和活性的人源抗体打下一定的基础。目的： 采用噬菌体抗体库这一新兴生物学技术，构建天然人源 Fab 抗体库。 方法： 收集未免疫的健康人外周血分离淋巴细胞，提取总 RNA 后逆转录获得cDNA，通过 PCR 扩增抗体重链和轻链基因片段，回收 700bp 左右的目的基因片段，将基因片段连接到噬菌体 pComb3 中，将构建的重组噬菌体载体 pComb3 电穿孔转化感受态细胞 XL1-Blue 构建轻链文库，随后将重链基因经 XhoI 和 SpeI双酶切后连到轻链质粒文库中，将构建的重组噬菌体载体电转化 XL1-Blue，经辅助噬菌体 VCSM13 超感
8、染，构建非免疫人源 Fab 噬菌体抗体库。 结果： 经过轻链和重链基因的重组和转化，获得库容量为 1.261011pfu/ml 的 Fab 噬菌体抗体库。 结论： 本研究构建的人天然噬菌体抗体库为进一步筛选特异性抗体提供基础，也是分子生物学实验方法的-个探索与尝试。为今后筛选制备抗体提供了技术平台和思路，有望为后续获得多种有高潜在中和活性的人源抗体打下一定的基础。目的： 采用噬菌体抗体库这一新兴生物学技术，构建天然人源 Fab 抗体库。 方法： 收集未免疫的健康人外周血分离淋巴细胞，提取总 RNA 后逆转录获得cDNA，通过 PCR 扩增抗体重链和轻链基因片段，回收 700bp 左右的目的基因
9、片段，将基因片段连接到噬菌体 pComb3 中，将构建的重组噬菌体载体 pComb3 电穿孔转化感受态细胞 XL1-Blue 构建轻链文库，随后将重链基因经 XhoI 和 SpeI双酶切后连到轻链质粒文库中，将构建的重组噬菌体载体电转化 XL1-Blue，经辅助噬菌体 VCSM13 超感染，构建非免疫人源 Fab 噬菌体抗体库。 结果： 经过轻链和重链基因的重组和转化，获得库容量为 1.261011pfu/ml 的 Fab 噬菌体抗体库。 结论： 本研究构建的人天然噬菌体抗体库为进一步筛选特异性抗体提供基础，也是分子生物学实验方法的-个探索与尝试。为今后筛选制备抗体提供了技术平台和思路，有望为
10、后续获得多种有高潜在中和活性的人源抗体打下一定的基础。目的： 采用噬菌体抗体库这一新兴生物学技术，构建天然人源 Fab 抗体库。 方法： 收集未免疫的健康人外周血分离淋巴细胞，提取总 RNA 后逆转录获得cDNA，通过 PCR 扩增抗体重链和轻链基因片段，回收 700bp 左右的目的基因片段，将基因片段连接到噬菌体 pComb3 中，将构建的重组噬菌体载体 pComb3 电穿孔转化感受态细胞 XL1-Blue 构建轻链文库，随后将重链基因经 XhoI 和 SpeI双酶切后连到轻链质粒文库中，将构建的重组噬菌体载体电转化 XL1-Blue，经辅助噬菌体 VCSM13 超感染，构建非免疫人源 Fa
11、b 噬菌体抗体库。 结果： 经过轻链和重链基因的重组和转化，获得库容量为 1.261011pfu/ml 的 Fab 噬菌体抗体库。 结论： 本研究构建的人天然噬菌体抗体库为进一步筛选特异性抗体提供基础，也是分子生物学实验方法的-个探索与尝试。为今后筛选制备抗体提供了技术平台和思路，有望为后续获得多种有高潜在中和活性的人源抗体打下一定的基础。目的： 采用噬菌体抗体库这一新兴生物学技术，构建天然人源 Fab 抗体库。 方法： 收集未免疫的健康人外周血分离淋巴细胞，提取总 RNA 后逆转录获得cDNA，通过 PCR 扩增抗体重链和轻链基因片段，回收 700bp 左右的目的基因片段，将基因片段连接到噬
12、菌体 pComb3 中，将构建的重组噬菌体载体 pComb3 电穿孔转化感受态细胞 XL1-Blue 构建轻链文库，随后将重链基因经 XhoI 和 SpeI双酶切后连到轻链质粒文库中，将构建的重组噬菌体载体电转化 XL1-Blue，经辅助噬菌体 VCSM13 超感染，构建非免疫人源 Fab 噬菌体抗体库。 结果： 经过轻链和重链基因的重组和转化，获得库容量为 1.261011pfu/ml 的 Fab 噬菌体抗体库。 结论： 本研究构建的人天然噬菌体抗体库为进一步筛选特异性抗体提供基础，也是分子生物学实验方法的-个探索与尝试。为今后筛选制备抗体提供了技术平台和思路，有望为后续获得多种有高潜在中和
13、活性的人源抗体打下一定的基础。目的： 采用噬菌体抗体库这一新兴生物学技术，构建天然人源 Fab 抗体库。 方法： 收集未免疫的健康人外周血分离淋巴细胞，提取总 RNA 后逆转录获得cDNA，通过 PCR 扩增抗体重链和轻链基因片段，回收 700bp 左右的目的基因片段，将基因片段连接到噬菌体 pComb3 中，将构建的重组噬菌体载体 pComb3 电穿孔转化感受态细胞 XL1-Blue 构建轻链文库，随后将重链基因经 XhoI 和 SpeI双酶切后连到轻链质粒文库中，将构建的重组噬菌体载体电转化 XL1-Blue，经辅助噬菌体 VCSM13 超感染，构建非免疫人源 Fab 噬菌体抗体库。 结果
14、： 经过轻链和重链基因的重组和转化，获得库容量为 1.261011pfu/ml 的 Fab 噬菌体抗体库。 结论： 本研究构建的人天然噬菌体抗体库为进一步筛选特异性抗体提供基础，也是分子生物学实验方法的-个探索与尝试。为今后筛选制备抗体提供了技术平台和思路，有望为后续获得多种有高潜在中和活性的人源抗体打下一定的基础。目的： 采用噬菌体抗体库这一新兴生物学技术，构建天然人源 Fab 抗体库。 方法： 收集未免疫的健康人外周血分离淋巴细胞，提取总 RNA 后逆转录获得cDNA，通过 PCR 扩增抗体重链和轻链基因片段，回收 700bp 左右的目的基因片段，将基因片段连接到噬菌体 pComb3 中，
15、将构建的重组噬菌体载体 pComb3 电穿孔转化感受态细胞 XL1-Blue 构建轻链文库，随后将重链基因经 XhoI 和 SpeI双酶切后连到轻链质粒文库中，将构建的重组噬菌体载体电转化 XL1-Blue，经辅助噬菌体 VCSM13 超感染，构建非免疫人源 Fab 噬菌体抗体库。 结果： 经过轻链和重链基因的重组和转化，获得库容量为 1.261011pfu/ml 的 Fab 噬菌体抗体库。 结论： 本研究构建的人天然噬菌体抗体库为进一步筛选特异性抗体提供基础，也是分子生物学实验方法的-个探索与尝试。为今后筛选制备抗体提供了技术平台和思路，有望为后续获得多种有高潜在中和活性的人源抗体打下一定的
16、基础。目的： 采用噬菌体抗体库这一新兴生物学技术，构建天然人源 Fab 抗体库。 方法： 收集未免疫的健康人外周血分离淋巴细胞，提取总 RNA 后逆转录获得cDNA，通过 PCR 扩增抗体重链和轻链基因片段，回收 700bp 左右的目的基因片段，将基因片段连接到噬菌体 pComb3 中，将构建的重组噬菌体载体 pComb3 电穿孔转化感受态细胞 XL1-Blue 构建轻链文库，随后将重链基因经 XhoI 和 SpeI双酶切后连到轻链质粒文库中，将构建的重组噬菌体载体电转化 XL1-Blue，经辅助噬菌体 VCSM13 超感染，构建非免疫人源 Fab 噬菌体抗体库。 结果： 经过轻链和重链基因的
17、重组和转化，获得库容量为 1.261011pfu/ml 的 Fab 噬菌体抗体库。 结论： 本研究构建的人天然噬菌体抗体库为进一步筛选特异性抗体提供基础，也是分子生物学实验方法的-个探索与尝试。为今后筛选制备抗体提供了技术平台和思路，有望为后续获得多种有高潜在中和活性的人源抗体打下一定的基础。特别提醒 ：正文内容由 PDF 文件转码生成，如您电脑未有相应转换码，则无法显示正文内容，请您下载相应软件，下载地址为 http:/ 。如还不能显示，可以联系我 q q 1627550258 ，提供原格式文档。“垐垯櫃 换烫梯葺铑?endstreamendobj2x 滌?U 閩 AZ箾 FTP 鈦X 飼?
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