1、植物病理学专业毕业论文 精品论文 人参锈腐病颉颃放线菌的筛选及鉴定关键词：人参锈腐病 土壤微生物 颉颃试验 链霉菌属 发酵液摘要：本研究于 2006 年至 2007 年，从吉林省的通化市、靖宇县和长白县三地采集人参根际土样 126 份，从中分离出真菌 39 株、细菌 68 株、放线菌 232 株，对人参根际的放线菌、真菌、细菌数量的变化进行了研究。 研究结果表明，随着栽参年限的增加，人参根际土壤中微生物数量呈下降的趋势，其中新林土中的微生物数量最多，老参地中最少；新林土到 1 年与 5 年到老参地这两个时间段根际土壤中微生物数量降低幅度较大。随着深度的增加，土壤微生物数量呈下降的趋势，其中 0
2、5cm 与 510cm 土层间的降低幅度要高于 510cm 与1015cm 土层间；不同年限同一土层的土壤中，微生物数量不完全遵循下降的趋势。 对分离出的 39 株真菌、68 株细菌、232 株放线菌与人参锈腐病菌进行了颉颃试验，结果表明，39 株真菌对人参锈腐病菌完全没有颉颃作用；68 株细菌中仅有 3 株有颉颃作用，但是作用不大且效果很不稳定；232 株放线菌中筛选出颉颃效果较好的有 9 株，据此对这 9 株放线菌进行再次筛选。对这 9 株放线菌进行液体培养，取其发酵液对锈腐病菌进行颉颃试验，计算抑菌率，从中选出颉颃效果最好的菌株 MS32，颉颃带宽度为 11mm，抑菌率为 76.45。
3、对菌株 MS32 的液体培养条件进行了初步研究，主要研究培养基、温度、pH 和培养时间对其发酵液抑菌效果的影响；并在此基础上对培养条件进行 4 因素 3水平正交试验，最终确定了 MS32 的最适液体培养条件：培养基为玉米粉大豆粉培养基、温度为 29，pH8，培养时间为 120h。 对该株放线菌进行了形态学观察和部分生理生化反应的测定，并对 16S rDNA 序列进行了测定。形态学观察得出此株放线菌具有典型的链霉菌属的特征，证实其为链霉菌属。 生理生化反应测定结果为：菌株 MS32 使明胶液化，不产生 H2S，牛奶不凝固胨化，淀粉水解，纤维素水解；可以利用 D葡萄糖、D-木糖、D-果糖、蔗糖、棉
4、子糖、肌醇作为碳源。 对 MS32 的 16S rDNA 序列测定，其核苷酸序列长度为1250bp，将所测序列与从 GenBank 数据库中的同源性较高的 32 个链霉菌属放线菌序列进行比较，在系统进化树上菌株 MS32 与 1 个已知种 Streptomyces naraensis（AB184691）部分 16S rDNA 序列 98相似，与另外 2 个菌株的的同源性也为 98，说明这 4 个菌株可能属于同一个种。正文内容本研究于 2006 年至 2007 年，从吉林省的通化市、靖宇县和长白县三地采集人参根际土样 126 份，从中分离出真菌 39 株、细菌 68 株、放线菌 232 株，对人
5、参根际的放线菌、真菌、细菌数量的变化进行了研究。 研究结果表明，随着栽参年限的增加，人参根际土壤中微生物数量呈下降的趋势，其中新林土中的微生物数量最多，老参地中最少；新林土到 1 年与 5 年到老参地这两个时间段根际土壤中微生物数量降低幅度较大。随着深度的增加，土壤微生物数量呈下降的趋势，其中 05cm 与 510cm 土层间的降低幅度要高于 510cm 与1015cm 土层间；不同年限同一土层的土壤中，微生物数量不完全遵循下降的趋势。 对分离出的 39 株真菌、68 株细菌、232 株放线菌与人参锈腐病菌进行了颉颃试验，结果表明，39 株真菌对人参锈腐病菌完全没有颉颃作用；68 株细菌中仅有
6、 3 株有颉颃作用，但是作用不大且效果很不稳定；232 株放线菌中筛选出颉颃效果较好的有 9 株，据此对这 9 株放线菌进行再次筛选。对这 9 株放线菌进行液体培养，取其发酵液对锈腐病菌进行颉颃试验，计算抑菌率，从中选出颉颃效果最好的菌株 MS32，颉颃带宽度为 11mm，抑菌率为 76.45。 对菌株 MS32 的液体培养条件进行了初步研究，主要研究培养基、温度、pH 和培养时间对其发酵液抑菌效果的影响；并在此基础上对培养条件进行 4 因素 3水平正交试验，最终确定了 MS32 的最适液体培养条件：培养基为玉米粉大豆粉培养基、温度为 29，pH8，培养时间为 120h。 对该株放线菌进行了形
7、态学观察和部分生理生化反应的测定，并对 16S rDNA 序列进行了测定。形态学观察得出此株放线菌具有典型的链霉菌属的特征，证实其为链霉菌属。 生理生化反应测定结果为：菌株 MS32 使明胶液化，不产生 H2S，牛奶不凝固胨化，淀粉水解，纤维素水解；可以利用 D葡萄糖、D-木糖、D-果糖、蔗糖、棉子糖、肌醇作为碳源。 对 MS32 的 16S rDNA 序列测定，其核苷酸序列长度为1250bp，将所测序列与从 GenBank 数据库中的同源性较高的 32 个链霉菌属放线菌序列进行比较，在系统进化树上菌株 MS32 与 1 个已知种 Streptomyces naraensis（AB184691
8、）部分 16S rDNA 序列 98相似，与另外 2 个菌株的的同源性也为 98，说明这 4 个菌株可能属于同一个种。本研究于 2006 年至 2007 年，从吉林省的通化市、靖宇县和长白县三地采集人参根际土样 126 份，从中分离出真菌 39 株、细菌 68 株、放线菌 232 株，对人参根际的放线菌、真菌、细菌数量的变化进行了研究。 研究结果表明，随着栽参年限的增加，人参根际土壤中微生物数量呈下降的趋势，其中新林土中的微生物数量最多，老参地中最少；新林土到 1 年与 5 年到老参地这两个时间段根际土壤中微生物数量降低幅度较大。随着深度的增加，土壤微生物数量呈下降的趋势，其中 05cm 与
9、510cm 土层间的降低幅度要高于 510cm 与1015cm 土层间；不同年限同一土层的土壤中，微生物数量不完全遵循下降的趋势。 对分离出的 39 株真菌、68 株细菌、232 株放线菌与人参锈腐病菌进行了颉颃试验，结果表明，39 株真菌对人参锈腐病菌完全没有颉颃作用；68 株细菌中仅有 3 株有颉颃作用，但是作用不大且效果很不稳定；232 株放线菌中筛选出颉颃效果较好的有 9 株，据此对这 9 株放线菌进行再次筛选。对这 9 株放线菌进行液体培养，取其发酵液对锈腐病菌进行颉颃试验，计算抑菌率，从中选出颉颃效果最好的菌株 MS32，颉颃带宽度为 11mm，抑菌率为 76.45。 对菌株 MS
10、32 的液体培养条件进行了初步研究，主要研究培养基、温度、pH 和培养时间对其发酵液抑菌效果的影响；并在此基础上对培养条件进行 4 因素 3水平正交试验，最终确定了 MS32 的最适液体培养条件：培养基为玉米粉大豆粉培养基、温度为 29，pH8，培养时间为 120h。 对该株放线菌进行了形态学观察和部分生理生化反应的测定，并对 16S rDNA 序列进行了测定。形态学观察得出此株放线菌具有典型的链霉菌属的特征，证实其为链霉菌属。 生理生化反应测定结果为：菌株 MS32 使明胶液化，不产生 H2S，牛奶不凝固胨化，淀粉水解，纤维素水解；可以利用 D葡萄糖、D-木糖、D-果糖、蔗糖、棉子糖、肌醇作
11、为碳源。 对 MS32 的 16S rDNA 序列测定，其核苷酸序列长度为1250bp，将所测序列与从 GenBank 数据库中的同源性较高的 32 个链霉菌属放线菌序列进行比较，在系统进化树上菌株 MS32 与 1 个已知种 Streptomyces naraensis（AB184691）部分 16S rDNA 序列 98相似，与另外 2 个菌株的的同源性也为 98，说明这 4 个菌株可能属于同一个种。本研究于 2006 年至 2007 年，从吉林省的通化市、靖宇县和长白县三地采集人参根际土样 126 份，从中分离出真菌 39 株、细菌 68 株、放线菌 232 株，对人参根际的放线菌、真菌
12、、细菌数量的变化进行了研究。 研究结果表明，随着栽参年限的增加，人参根际土壤中微生物数量呈下降的趋势，其中新林土中的微生物数量最多，老参地中最少；新林土到 1 年与 5 年到老参地这两个时间段根际土壤中微生物数量降低幅度较大。随着深度的增加，土壤微生物数量呈下降的趋势，其中 05cm 与 510cm 土层间的降低幅度要高于 510cm 与1015cm 土层间；不同年限同一土层的土壤中，微生物数量不完全遵循下降的趋势。 对分离出的 39 株真菌、68 株细菌、232 株放线菌与人参锈腐病菌进行了颉颃试验，结果表明，39 株真菌对人参锈腐病菌完全没有颉颃作用；68 株细菌中仅有 3 株有颉颃作用，
13、但是作用不大且效果很不稳定；232 株放线菌中筛选出颉颃效果较好的有 9 株，据此对这 9 株放线菌进行再次筛选。对这 9 株放线菌进行液体培养，取其发酵液对锈腐病菌进行颉颃试验，计算抑菌率，从中选出颉颃效果最好的菌株 MS32，颉颃带宽度为 11mm，抑菌率为 76.45。 对菌株 MS32 的液体培养条件进行了初步研究，主要研究培养基、温度、pH 和培养时间对其发酵液抑菌效果的影响；并在此基础上对培养条件进行 4 因素 3水平正交试验，最终确定了 MS32 的最适液体培养条件：培养基为玉米粉大豆粉培养基、温度为 29，pH8，培养时间为 120h。 对该株放线菌进行了形态学观察和部分生理生
14、化反应的测定，并对 16S rDNA 序列进行了测定。形态学观察得出此株放线菌具有典型的链霉菌属的特征，证实其为链霉菌属。 生理生化反应测定结果为：菌株 MS32 使明胶液化，不产生 H2S，牛奶不凝固胨化，淀粉水解，纤维素水解；可以利用 D葡萄糖、D-木糖、D-果糖、蔗糖、棉子糖、肌醇作为碳源。 对 MS32 的 16S rDNA 序列测定，其核苷酸序列长度为1250bp，将所测序列与从 GenBank 数据库中的同源性较高的 32 个链霉菌属放线菌序列进行比较，在系统进化树上菌株 MS32 与 1 个已知种 Streptomyces naraensis（AB184691）部分 16S rD
15、NA 序列 98相似，与另外 2 个菌株的的同源性也为 98，说明这 4 个菌株可能属于同一个种。本研究于 2006 年至 2007 年，从吉林省的通化市、靖宇县和长白县三地采集人参根际土样 126 份，从中分离出真菌 39 株、细菌 68 株、放线菌 232 株，对人参根际的放线菌、真菌、细菌数量的变化进行了研究。 研究结果表明，随着栽参年限的增加，人参根际土壤中微生物数量呈下降的趋势，其中新林土中的微生物数量最多，老参地中最少；新林土到 1 年与 5 年到老参地这两个时间段根际土壤中微生物数量降低幅度较大。随着深度的增加，土壤微生物数量呈下降的趋势，其中 05cm 与 510cm 土层间的
16、降低幅度要高于 510cm 与1015cm 土层间；不同年限同一土层的土壤中，微生物数量不完全遵循下降的趋势。 对分离出的 39 株真菌、68 株细菌、232 株放线菌与人参锈腐病菌进行了颉颃试验，结果表明，39 株真菌对人参锈腐病菌完全没有颉颃作用；68 株细菌中仅有 3 株有颉颃作用，但是作用不大且效果很不稳定；232 株放线菌中筛选出颉颃效果较好的有 9 株，据此对这 9 株放线菌进行再次筛选。对这 9 株放线菌进行液体培养，取其发酵液对锈腐病菌进行颉颃试验，计算抑菌率，从中选出颉颃效果最好的菌株 MS32，颉颃带宽度为 11mm，抑菌率为 76.45。 对菌株 MS32 的液体培养条件
17、进行了初步研究，主要研究培养基、温度、pH 和培养时间对其发酵液抑菌效果的影响；并在此基础上对培养条件进行 4 因素 3水平正交试验，最终确定了 MS32 的最适液体培养条件：培养基为玉米粉大豆粉培养基、温度为 29，pH8，培养时间为 120h。 对该株放线菌进行了形态学观察和部分生理生化反应的测定，并对 16S rDNA 序列进行了测定。形态学观察得出此株放线菌具有典型的链霉菌属的特征，证实其为链霉菌属。 生理生化反应测定结果为：菌株 MS32 使明胶液化，不产生 H2S，牛奶不凝固胨化，淀粉水解，纤维素水解；可以利用 D葡萄糖、D-木糖、D-果糖、蔗糖、棉子糖、肌醇作为碳源。 对 MS3
18、2 的 16S rDNA 序列测定，其核苷酸序列长度为1250bp，将所测序列与从 GenBank 数据库中的同源性较高的 32 个链霉菌属放线菌序列进行比较，在系统进化树上菌株 MS32 与 1 个已知种 Streptomyces naraensis（AB184691）部分 16S rDNA 序列 98相似，与另外 2 个菌株的的同源性也为 98，说明这 4 个菌株可能属于同一个种。本研究于 2006 年至 2007 年，从吉林省的通化市、靖宇县和长白县三地采集人参根际土样 126 份，从中分离出真菌 39 株、细菌 68 株、放线菌 232 株，对人参根际的放线菌、真菌、细菌数量的变化进行
19、了研究。 研究结果表明，随着栽参年限的增加，人参根际土壤中微生物数量呈下降的趋势，其中新林土中的微生物数量最多，老参地中最少；新林土到 1 年与 5 年到老参地这两个时间段根际土壤中微生物数量降低幅度较大。随着深度的增加，土壤微生物数量呈下降的趋势，其中 05cm 与 510cm 土层间的降低幅度要高于 510cm 与1015cm 土层间；不同年限同一土层的土壤中，微生物数量不完全遵循下降的趋势。 对分离出的 39 株真菌、68 株细菌、232 株放线菌与人参锈腐病菌进行了颉颃试验，结果表明，39 株真菌对人参锈腐病菌完全没有颉颃作用；68 株细菌中仅有 3 株有颉颃作用，但是作用不大且效果很
20、不稳定；232 株放线菌中筛选出颉颃效果较好的有 9 株，据此对这 9 株放线菌进行再次筛选。对这 9 株放线菌进行液体培养，取其发酵液对锈腐病菌进行颉颃试验，计算抑菌率，从中选出颉颃效果最好的菌株 MS32，颉颃带宽度为 11mm，抑菌率为 76.45。 对菌株 MS32 的液体培养条件进行了初步研究，主要研究培养基、温度、pH 和培养时间对其发酵液抑菌效果的影响；并在此基础上对培养条件进行 4 因素 3水平正交试验，最终确定了 MS32 的最适液体培养条件：培养基为玉米粉大豆粉培养基、温度为 29，pH8，培养时间为 120h。 对该株放线菌进行了形态学观察和部分生理生化反应的测定，并对
21、16S rDNA 序列进行了测定。形态学观察得出此株放线菌具有典型的链霉菌属的特征，证实其为链霉菌属。 生理生化反应测定结果为：菌株 MS32 使明胶液化，不产生 H2S，牛奶不凝固胨化，淀粉水解，纤维素水解；可以利用 D葡萄糖、D-木糖、D-果糖、蔗糖、棉子糖、肌醇作为碳源。 对 MS32 的 16S rDNA 序列测定，其核苷酸序列长度为1250bp，将所测序列与从 GenBank 数据库中的同源性较高的 32 个链霉菌属放线菌序列进行比较，在系统进化树上菌株 MS32 与 1 个已知种 Streptomyces naraensis（AB184691）部分 16S rDNA 序列 98相似
22、，与另外 2 个菌株的的同源性也为 98，说明这 4 个菌株可能属于同一个种。本研究于 2006 年至 2007 年，从吉林省的通化市、靖宇县和长白县三地采集人参根际土样 126 份，从中分离出真菌 39 株、细菌 68 株、放线菌 232 株，对人参根际的放线菌、真菌、细菌数量的变化进行了研究。 研究结果表明，随着栽参年限的增加，人参根际土壤中微生物数量呈下降的趋势，其中新林土中的微生物数量最多，老参地中最少；新林土到 1 年与 5 年到老参地这两个时间段根际土壤中微生物数量降低幅度较大。随着深度的增加，土壤微生物数量呈下降的趋势，其中 05cm 与 510cm 土层间的降低幅度要高于 51
23、0cm 与1015cm 土层间；不同年限同一土层的土壤中，微生物数量不完全遵循下降的趋势。 对分离出的 39 株真菌、68 株细菌、232 株放线菌与人参锈腐病菌进行了颉颃试验，结果表明，39 株真菌对人参锈腐病菌完全没有颉颃作用；68 株细菌中仅有 3 株有颉颃作用，但是作用不大且效果很不稳定；232 株放线菌中筛选出颉颃效果较好的有 9 株，据此对这 9 株放线菌进行再次筛选。对这 9 株放线菌进行液体培养，取其发酵液对锈腐病菌进行颉颃试验，计算抑菌率，从中选出颉颃效果最好的菌株 MS32，颉颃带宽度为 11mm，抑菌率为 76.45。 对菌株 MS32 的液体培养条件进行了初步研究，主要
24、研究培养基、温度、pH 和培养时间对其发酵液抑菌效果的影响；并在此基础上对培养条件进行 4 因素 3水平正交试验，最终确定了 MS32 的最适液体培养条件：培养基为玉米粉大豆粉培养基、温度为 29，pH8，培养时间为 120h。 对该株放线菌进行了形态学观察和部分生理生化反应的测定，并对 16S rDNA 序列进行了测定。形态学观察得出此株放线菌具有典型的链霉菌属的特征，证实其为链霉菌属。 生理生化反应测定结果为：菌株 MS32 使明胶液化，不产生 H2S，牛奶不凝固胨化，淀粉水解，纤维素水解；可以利用 D葡萄糖、D-木糖、D-果糖、蔗糖、棉子糖、肌醇作为碳源。 对 MS32 的 16S rD
25、NA 序列测定，其核苷酸序列长度为1250bp，将所测序列与从 GenBank 数据库中的同源性较高的 32 个链霉菌属放线菌序列进行比较，在系统进化树上菌株 MS32 与 1 个已知种 Streptomyces naraensis（AB184691）部分 16S rDNA 序列 98相似，与另外 2 个菌株的的同源性也为 98，说明这 4 个菌株可能属于同一个种。本研究于 2006 年至 2007 年，从吉林省的通化市、靖宇县和长白县三地采集人参根际土样 126 份，从中分离出真菌 39 株、细菌 68 株、放线菌 232 株，对人参根际的放线菌、真菌、细菌数量的变化进行了研究。 研究结果表
26、明，随着栽参年限的增加，人参根际土壤中微生物数量呈下降的趋势，其中新林土中的微生物数量最多，老参地中最少；新林土到 1 年与 5 年到老参地这两个时间段根际土壤中微生物数量降低幅度较大。随着深度的增加，土壤微生物数量呈下降的趋势，其中 05cm 与 510cm 土层间的降低幅度要高于 510cm 与1015cm 土层间；不同年限同一土层的土壤中，微生物数量不完全遵循下降的趋势。 对分离出的 39 株真菌、68 株细菌、232 株放线菌与人参锈腐病菌进行了颉颃试验，结果表明，39 株真菌对人参锈腐病菌完全没有颉颃作用；68 株细菌中仅有 3 株有颉颃作用，但是作用不大且效果很不稳定；232 株放
27、线菌中筛选出颉颃效果较好的有 9 株，据此对这 9 株放线菌进行再次筛选。对这 9 株放线菌进行液体培养，取其发酵液对锈腐病菌进行颉颃试验，计算抑菌率，从中选出颉颃效果最好的菌株 MS32，颉颃带宽度为 11mm，抑菌率为 76.45。 对菌株 MS32 的液体培养条件进行了初步研究，主要研究培养基、温度、pH 和培养时间对其发酵液抑菌效果的影响；并在此基础上对培养条件进行 4 因素 3水平正交试验，最终确定了 MS32 的最适液体培养条件：培养基为玉米粉大豆粉培养基、温度为 29，pH8，培养时间为 120h。 对该株放线菌进行了形态学观察和部分生理生化反应的测定，并对 16S rDNA 序
28、列进行了测定。形态学观察得出此株放线菌具有典型的链霉菌属的特征，证实其为链霉菌属。 生理生化反应测定结果为：菌株 MS32 使明胶液化，不产生 H2S，牛奶不凝固胨化，淀粉水解，纤维素水解；可以利用 D葡萄糖、D-木糖、D-果糖、蔗糖、棉子糖、肌醇作为碳源。 对 MS32 的 16S rDNA 序列测定，其核苷酸序列长度为1250bp，将所测序列与从 GenBank 数据库中的同源性较高的 32 个链霉菌属放线菌序列进行比较，在系统进化树上菌株 MS32 与 1 个已知种 Streptomyces naraensis（AB184691）部分 16S rDNA 序列 98相似，与另外 2 个菌株
29、的的同源性也为 98，说明这 4 个菌株可能属于同一个种。本研究于 2006 年至 2007 年，从吉林省的通化市、靖宇县和长白县三地采集人参根际土样 126 份，从中分离出真菌 39 株、细菌 68 株、放线菌 232 株，对人参根际的放线菌、真菌、细菌数量的变化进行了研究。 研究结果表明，随着栽参年限的增加，人参根际土壤中微生物数量呈下降的趋势，其中新林土中的微生物数量最多，老参地中最少；新林土到 1 年与 5 年到老参地这两个时间段根际土壤中微生物数量降低幅度较大。随着深度的增加，土壤微生物数量呈下降的趋势，其中 05cm 与 510cm 土层间的降低幅度要高于 510cm 与1015c
30、m 土层间；不同年限同一土层的土壤中，微生物数量不完全遵循下降的趋势。 对分离出的 39 株真菌、68 株细菌、232 株放线菌与人参锈腐病菌进行了颉颃试验，结果表明，39 株真菌对人参锈腐病菌完全没有颉颃作用；68 株细菌中仅有 3 株有颉颃作用，但是作用不大且效果很不稳定；232 株放线菌中筛选出颉颃效果较好的有 9 株，据此对这 9 株放线菌进行再次筛选。对这 9 株放线菌进行液体培养，取其发酵液对锈腐病菌进行颉颃试验，计算抑菌率，从中选出颉颃效果最好的菌株 MS32，颉颃带宽度为 11mm，抑菌率为 76.45。 对菌株 MS32 的液体培养条件进行了初步研究，主要研究培养基、温度、p
31、H 和培养时间对其发酵液抑菌效果的影响；并在此基础上对培养条件进行 4 因素 3水平正交试验，最终确定了 MS32 的最适液体培养条件：培养基为玉米粉大豆粉培养基、温度为 29，pH8，培养时间为 120h。 对该株放线菌进行了形态学观察和部分生理生化反应的测定，并对 16S rDNA 序列进行了测定。形态学观察得出此株放线菌具有典型的链霉菌属的特征，证实其为链霉菌属。 生理生化反应测定结果为：菌株 MS32 使明胶液化，不产生 H2S，牛奶不凝固胨化，淀粉水解，纤维素水解；可以利用 D葡萄糖、D-木糖、D-果糖、蔗糖、棉子糖、肌醇作为碳源。 对 MS32 的 16S rDNA 序列测定，其核
32、苷酸序列长度为1250bp，将所测序列与从 GenBank 数据库中的同源性较高的 32 个链霉菌属放线菌序列进行比较，在系统进化树上菌株 MS32 与 1 个已知种 Streptomyces naraensis（AB184691）部分 16S rDNA 序列 98相似，与另外 2 个菌株的的同源性也为 98，说明这 4 个菌株可能属于同一个种。本研究于 2006 年至 2007 年，从吉林省的通化市、靖宇县和长白县三地采集人参根际土样 126 份，从中分离出真菌 39 株、细菌 68 株、放线菌 232 株，对人参根际的放线菌、真菌、细菌数量的变化进行了研究。 研究结果表明，随着栽参年限的增
33、加，人参根际土壤中微生物数量呈下降的趋势，其中新林土中的微生物数量最多，老参地中最少；新林土到 1 年与 5 年到老参地这两个时间段根际土壤中微生物数量降低幅度较大。随着深度的增加，土壤微生物数量呈下降的趋势，其中 05cm 与 510cm 土层间的降低幅度要高于 510cm 与1015cm 土层间；不同年限同一土层的土壤中，微生物数量不完全遵循下降的趋势。 对分离出的 39 株真菌、68 株细菌、232 株放线菌与人参锈腐病菌进行了颉颃试验，结果表明，39 株真菌对人参锈腐病菌完全没有颉颃作用；68 株细菌中仅有 3 株有颉颃作用，但是作用不大且效果很不稳定；232 株放线菌中筛选出颉颃效果
34、较好的有 9 株，据此对这 9 株放线菌进行再次筛选。对这 9 株放线菌进行液体培养，取其发酵液对锈腐病菌进行颉颃试验，计算抑菌率，从中选出颉颃效果最好的菌株 MS32，颉颃带宽度为 11mm，抑菌率为 76.45。 对菌株 MS32 的液体培养条件进行了初步研究，主要研究培养基、温度、pH 和培养时间对其发酵液抑菌效果的影响；并在此基础上对培养条件进行 4 因素 3水平正交试验，最终确定了 MS32 的最适液体培养条件：培养基为玉米粉大豆粉培养基、温度为 29，pH8，培养时间为 120h。 对该株放线菌进行了形态学观察和部分生理生化反应的测定，并对 16S rDNA 序列进行了测定。形态学
35、观察得出此株放线菌具有典型的链霉菌属的特征，证实其为链霉菌属。 生理生化反应测定结果为：菌株 MS32 使明胶液化，不产生 H2S，牛奶不凝固胨化，淀粉水解，纤维素水解；可以利用 D葡萄糖、D-木糖、D-果糖、蔗糖、棉子糖、肌醇作为碳源。 对 MS32 的 16S rDNA 序列测定，其核苷酸序列长度为1250bp，将所测序列与从 GenBank 数据库中的同源性较高的 32 个链霉菌属放线菌序列进行比较，在系统进化树上菌株 MS32 与 1 个已知种 Streptomyces naraensis（AB184691）部分 16S rDNA 序列 98相似，与另外 2 个菌株的的同源性也为 98
36、，说明这 4 个菌株可能属于同一个种。本研究于 2006 年至 2007 年，从吉林省的通化市、靖宇县和长白县三地采集人参根际土样 126 份，从中分离出真菌 39 株、细菌 68 株、放线菌 232 株，对人参根际的放线菌、真菌、细菌数量的变化进行了研究。 研究结果表明，随着栽参年限的增加，人参根际土壤中微生物数量呈下降的趋势，其中新林土中的微生物数量最多，老参地中最少；新林土到 1 年与 5 年到老参地这两个时间段根际土壤中微生物数量降低幅度较大。随着深度的增加，土壤微生物数量呈下降的趋势，其中 05cm 与 510cm 土层间的降低幅度要高于 510cm 与1015cm 土层间；不同年限
37、同一土层的土壤中，微生物数量不完全遵循下降的趋势。 对分离出的 39 株真菌、68 株细菌、232 株放线菌与人参锈腐病菌进行了颉颃试验，结果表明，39 株真菌对人参锈腐病菌完全没有颉颃作用；68 株细菌中仅有 3 株有颉颃作用，但是作用不大且效果很不稳定；232 株放线菌中筛选出颉颃效果较好的有 9 株，据此对这 9 株放线菌进行再次筛选。对这 9 株放线菌进行液体培养，取其发酵液对锈腐病菌进行颉颃试验，计算抑菌率，从中选出颉颃效果最好的菌株 MS32，颉颃带宽度为 11mm，抑菌率为 76.45。 对菌株 MS32 的液体培养条件进行了初步研究，主要研究培养基、温度、pH 和培养时间对其发
38、酵液抑菌效果的影响；并在此基础上对培养条件进行 4 因素 3水平正交试验，最终确定了 MS32 的最适液体培养条件：培养基为玉米粉大豆粉培养基、温度为 29，pH8，培养时间为 120h。 对该株放线菌进行了形态学观察和部分生理生化反应的测定，并对 16S rDNA 序列进行了测定。形态学观察得出此株放线菌具有典型的链霉菌属的特征，证实其为链霉菌属。 生理生化反应测定结果为：菌株 MS32 使明胶液化，不产生 H2S，牛奶不凝固胨化，淀粉水解，纤维素水解；可以利用 D葡萄糖、D-木糖、D-果糖、蔗糖、棉子糖、肌醇作为碳源。 对 MS32 的 16S rDNA 序列测定，其核苷酸序列长度为125
39、0bp，将所测序列与从 GenBank 数据库中的同源性较高的 32 个链霉菌属放线菌序列进行比较，在系统进化树上菌株 MS32 与 1 个已知种 Streptomyces naraensis（AB184691）部分 16S rDNA 序列 98相似，与另外 2 个菌株的的同源性也为 98，说明这 4 个菌株可能属于同一个种。特别提醒 ：正文内容由 PDF 文件转码生成，如您电脑未有相应转换码，则无法显示正文内容，请您下载相应软件，下载地址为 http:/ 。如还不能显示，可以联系我 q q 1627550258 ，提供原格式文档。“垐垯櫃 换烫梯葺铑?endstreamendobj2x 滌?
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