hsp90抑制剂17-aag对人肾癌细胞生物学行为影响的体外研究.doc

1、泌尿外科学专业毕业论文 精品论文 HSP90 抑制剂 17-AAG 对人肾癌细胞生物学行为影响的体外研究关键词：肾细胞癌 缺氧诱导因子-2 热休克蛋白 90 肿瘤细胞摘要：目的： 观察 HSP90 抑制剂 17-AAG 在缺氧状态下对人肾癌 Caki-1 细胞的增殖抑制作用和放射增敏作用，并初步探讨其产生增殖抑制作用和放射增敏作用的机制。 方法： (1)体外培养人肾癌 Caki-1 细胞株。 (2) MTT 比色法检测在缺氧状态下不同时间和不同浓度的 17-AAG 对人肾癌细胞株 Caki-1细胞的增殖抑制作用。 (3)将终浓度为 80nmol/L17-AAG 作用于人肾癌细胞株Caki-1(

2、实验组)，分别在常氧和缺氧状态下进行培养。同时设立阴性对照组和空白对照组。采用 MTT 比色法检测三组细胞不同时间 OD570 值；倒置显微镜观察细胞形态学变化；流式细胞仪检测细胞凋亡；Western blot 法检测 HIF-2蛋白表达。 (4)在缺氧状态下将终浓度为 10nmol/L17-AAG 作用于人肾癌细胞株 Caki-1，用不同剂量 6MV-X 射线照射，采用集落形成实验检测 17-AAG 对Caki-1 细胞的放射增敏效应。 结果： (1)在缺氧状态下，HSP90 抑制剂17-AAG 对人肾癌细胞株 Caki-1 具有增殖抑制作用，且具有时间剂量依赖性。 (2)在常氧状态下，三组

3、 Caki-1 细胞的 OD570 值之间差别无统计学意义(Pgt;0.05)。在缺氧状态下，48h 后缺氧实验组各时间点 OD570 值明显低于缺氧空白组和缺氧阴性对照组，差异有统计学意义(Plt;0.05)。 (3)流式细胞术检测常氧状态下，三组细胞凋亡率低，三者之间差别无统计学意义(Pgt;0.05)，而在缺氧状态下，实验组凋亡率高于缺氧空白组和缺氧阴性对照组(Plt;0.05)。 (4) Western blot 法检测显示：在常氧状态下，实验组细胞 HIF-2 蛋白表达受到抑制，低于阴性对照组和空白对照组(Plt;0.05)。在缺氧状态下，实验组 HIF-2 蛋白表达受到抑制，低于阴

4、性对照组和空白对照组(Plt;0.05)。缺氧阴性对照组和缺氧空白对照组的HIF-2 蛋白表达分别与常氧阴性对照组和常氧空白对照组相比较，表达明显增强(Plt;0.05)。而缺氧实验组 HIF-2 蛋白表达与常氧实验组比较，差别无统计学意义(Pgt;0.05)。 (5)集落形成实验结果及存活曲线相关参数显示出放射敏感性指标 D0、SF2、 Dq 均呈现不同程度的下降，D0 增敏比达到 1.3169。 结论： 在缺氧状态下，HSP90 抑制剂 17-AAG 对人肾癌细胞株Caki-1 具有明显的增殖抑制作用，促进肿瘤细胞发生凋亡。其诱导人肾癌细胞株 Caki-1 细胞凋亡的机制与其下调 HIF-

5、2 的表达有关。在缺氧状态下，17-AAG 可以提高人肾癌细胞株 Caki-1 细胞的放射敏感性。正文内容目的： 观察 HSP90 抑制剂 17-AAG 在缺氧状态下对人肾癌 Caki-1 细胞的增殖抑制作用和放射增敏作用，并初步探讨其产生增殖抑制作用和放射增敏作用的机制。 方法： (1)体外培养人肾癌 Caki-1 细胞株。 (2) MTT 比色法检测在缺氧状态下不同时间和不同浓度的 17-AAG 对人肾癌细胞株 Caki-1 细胞的增殖抑制作用。 (3)将终浓度为 80nmol/L17-AAG 作用于人肾癌细胞株Caki-1(实验组)，分别在常氧和缺氧状态下进行培养。同时设立阴性对照组和空

6、白对照组。采用 MTT 比色法检测三组细胞不同时间 OD570 值；倒置显微镜观察细胞形态学变化；流式细胞仪检测细胞凋亡；Western blot 法检测 HIF-2蛋白表达。 (4)在缺氧状态下将终浓度为 10nmol/L17-AAG 作用于人肾癌细胞株 Caki-1，用不同剂量 6MV-X 射线照射，采用集落形成实验检测 17-AAG 对Caki-1 细胞的放射增敏效应。 结果： (1)在缺氧状态下，HSP90 抑制剂17-AAG 对人肾癌细胞株 Caki-1 具有增殖抑制作用，且具有时间剂量依赖性。 (2)在常氧状态下，三组 Caki-1 细胞的 OD570 值之间差别无统计学意义(Pg

7、t;0.05)。在缺氧状态下，48h 后缺氧实验组各时间点 OD570 值明显低于缺氧空白组和缺氧阴性对照组，差异有统计学意义(Plt;0.05)。 (3)流式细胞术检测常氧状态下，三组细胞凋亡率低，三者之间差别无统计学意义(Pgt;0.05)，而在缺氧状态下，实验组凋亡率高于缺氧空白组和缺氧阴性对照组(Plt;0.05)。 (4) Western blot 法检测显示：在常氧状态下，实验组细胞 HIF-2 蛋白表达受到抑制，低于阴性对照组和空白对照组(Plt;0.05)。在缺氧状态下，实验组 HIF-2 蛋白表达受到抑制，低于阴性对照组和空白对照组(Plt;0.05)。缺氧阴性对照组和缺氧空

8、白对照组的HIF-2 蛋白表达分别与常氧阴性对照组和常氧空白对照组相比较，表达明显增强(Plt;0.05)。而缺氧实验组 HIF-2 蛋白表达与常氧实验组比较，差别无统计学意义(Pgt;0.05)。 (5)集落形成实验结果及存活曲线相关参数显示出放射敏感性指标 D0、SF2、 Dq 均呈现不同程度的下降，D0 增敏比达到 1.3169。 结论： 在缺氧状态下，HSP90 抑制剂 17-AAG 对人肾癌细胞株Caki-1 具有明显的增殖抑制作用，促进肿瘤细胞发生凋亡。其诱导人肾癌细胞株 Caki-1 细胞凋亡的机制与其下调 HIF-2 的表达有关。在缺氧状态下，17-AAG 可以提高人肾癌细胞株

9、 Caki-1 细胞的放射敏感性。目的： 观察 HSP90 抑制剂 17-AAG 在缺氧状态下对人肾癌 Caki-1 细胞的增殖抑制作用和放射增敏作用，并初步探讨其产生增殖抑制作用和放射增敏作用的机制。 方法： (1)体外培养人肾癌 Caki-1 细胞株。 (2) MTT 比色法检测在缺氧状态下不同时间和不同浓度的 17-AAG 对人肾癌细胞株 Caki-1 细胞的增殖抑制作用。 (3)将终浓度为 80nmol/L17-AAG 作用于人肾癌细胞株 Caki-1(实验组)，分别在常氧和缺氧状态下进行培养。同时设立阴性对照组和空白对照组。采用 MTT 比色法检测三组细胞不同时间 OD570 值；倒

10、置显微镜观察细胞形态学变化；流式细胞仪检测细胞凋亡；Western blot 法检测 HIF-2 蛋白表达。 (4)在缺氧状态下将终浓度为 10nmol/L17-AAG 作用于人肾癌细胞株Caki-1，用不同剂量 6MV-X 射线照射，采用集落形成实验检测 17-AAG 对 Caki-1 细胞的放射增敏效应。 结果： (1)在缺氧状态下，HSP90 抑制剂 17-AAG对人肾癌细胞株 Caki-1 具有增殖抑制作用，且具有时间剂量依赖性。 (2)在常氧状态下，三组 Caki-1 细胞的 OD570 值之间差别无统计学意义(Pgt;0.05)。在缺氧状态下，48h 后缺氧实验组各时间点 OD57

11、0 值明显低于缺氧空白组和缺氧阴性对照组，差异有统计学意义(Plt;0.05)。 (3)流式细胞术检测常氧状态下，三组细胞凋亡率低，三者之间差别无统计学意义(Pgt;0.05)，而在缺氧状态下，实验组凋亡率高于缺氧空白组和缺氧阴性对照组(Plt;0.05)。 (4) Western blot 法检测显示：在常氧状态下，实验组细胞 HIF-2 蛋白表达受到抑制，低于阴性对照组和空白对照组(Plt;0.05)。在缺氧状态下，实验组 HIF-2 蛋白表达受到抑制，低于阴性对照组和空白对照组(Plt;0.05)。缺氧阴性对照组和缺氧空白对照组的HIF-2 蛋白表达分别与常氧阴性对照组和常氧空白对照组相

12、比较，表达明显增强(Plt;0.05)。而缺氧实验组 HIF-2 蛋白表达与常氧实验组比较，差别无统计学意义(Pgt;0.05)。 (5)集落形成实验结果及存活曲线相关参数显示出放射敏感性指标 D0、SF2、 Dq 均呈现不同程度的下降，D0 增敏比达到 1.3169。 结论： 在缺氧状态下，HSP90 抑制剂 17-AAG 对人肾癌细胞株Caki-1 具有明显的增殖抑制作用，促进肿瘤细胞发生凋亡。其诱导人肾癌细胞株 Caki-1 细胞凋亡的机制与其下调 HIF-2 的表达有关。在缺氧状态下，17-AAG 可以提高人肾癌细胞株 Caki-1 细胞的放射敏感性。目的： 观察 HSP90 抑制剂

13、17-AAG 在缺氧状态下对人肾癌 Caki-1 细胞的增殖抑制作用和放射增敏作用，并初步探讨其产生增殖抑制作用和放射增敏作用的机制。 方法： (1)体外培养人肾癌 Caki-1 细胞株。 (2) MTT 比色法检测在缺氧状态下不同时间和不同浓度的 17-AAG 对人肾癌细胞株 Caki-1 细胞的增殖抑制作用。 (3)将终浓度为 80nmol/L17-AAG 作用于人肾癌细胞株 Caki-1(实验组)，分别在常氧和缺氧状态下进行培养。同时设立阴性对照组和空白对照组。采用 MTT 比色法检测三组细胞不同时间 OD570 值；倒置显微镜观察细胞形态学变化；流式细胞仪检测细胞凋亡；Western

14、blot 法检测 HIF-2 蛋白表达。 (4)在缺氧状态下将终浓度为 10nmol/L17-AAG 作用于人肾癌细胞株Caki-1，用不同剂量 6MV-X 射线照射，采用集落形成实验检测 17-AAG 对 Caki-1 细胞的放射增敏效应。 结果： (1)在缺氧状态下，HSP90 抑制剂 17-AAG对人肾癌细胞株 Caki-1 具有增殖抑制作用，且具有时间剂量依赖性。 (2)在常氧状态下，三组 Caki-1 细胞的 OD570 值之间差别无统计学意义(Pgt;0.05)。在缺氧状态下，48h 后缺氧实验组各时间点 OD570 值明显低于缺氧空白组和缺氧阴性对照组，差异有统计学意义(Plt;

15、0.05)。 (3)流式细胞术检测常氧状态下，三组细胞凋亡率低，三者之间差别无统计学意义(Pgt;0.05)，而在缺氧状态下，实验组凋亡率高于缺氧空白组和缺氧阴性对照组(Plt;0.05)。 (4) Western blot 法检测显示：在常氧状态下，实验组细胞 HIF-2 蛋白表达受到抑制，低于阴性对照组和空白对照组(Plt;0.05)。在缺氧状态下，实验组 HIF-2 蛋白表达受到抑制，低于阴性对照组和空白对照组(Plt;0.05)。缺氧阴性对照组和缺氧空白对照组的HIF-2 蛋白表达分别与常氧阴性对照组和常氧空白对照组相比较，表达明显增强(Plt;0.05)。而缺氧实验组 HIF-2 蛋

16、白表达与常氧实验组比较，差别无统计学意义(Pgt;0.05)。 (5)集落形成实验结果及存活曲线相关参数显示出放射敏感性指标 D0、SF2、 Dq 均呈现不同程度的下降，D0 增敏比达到 1.3169。 结论： 在缺氧状态下，HSP90 抑制剂 17-AAG 对人肾癌细胞株Caki-1 具有明显的增殖抑制作用，促进肿瘤细胞发生凋亡。其诱导人肾癌细胞株 Caki-1 细胞凋亡的机制与其下调 HIF-2 的表达有关。在缺氧状态下，17-AAG 可以提高人肾癌细胞株 Caki-1 细胞的放射敏感性。目的： 观察 HSP90 抑制剂 17-AAG 在缺氧状态下对人肾癌 Caki-1 细胞的增殖抑制作用

17、和放射增敏作用，并初步探讨其产生增殖抑制作用和放射增敏作用的机制。 方法： (1)体外培养人肾癌 Caki-1 细胞株。 (2) MTT 比色法检测在缺氧状态下不同时间和不同浓度的 17-AAG 对人肾癌细胞株 Caki-1 细胞的增殖抑制作用。 (3)将终浓度为 80nmol/L17-AAG 作用于人肾癌细胞株 Caki-1(实验组)，分别在常氧和缺氧状态下进行培养。同时设立阴性对照组和空白对照组。采用 MTT 比色法检测三组细胞不同时间 OD570 值；倒置显微镜观察细胞形态学变化；流式细胞仪检测细胞凋亡；Western blot 法检测 HIF-2 蛋白表达。 (4)在缺氧状态下将终浓度

18、为 10nmol/L17-AAG 作用于人肾癌细胞株Caki-1，用不同剂量 6MV-X 射线照射，采用集落形成实验检测 17-AAG 对 Caki-1 细胞的放射增敏效应。 结果： (1)在缺氧状态下，HSP90 抑制剂 17-AAG对人肾癌细胞株 Caki-1 具有增殖抑制作用，且具有时间剂量依赖性。 (2)在常氧状态下，三组 Caki-1 细胞的 OD570 值之间差别无统计学意义(Pgt;0.05)。在缺氧状态下，48h 后缺氧实验组各时间点 OD570 值明显低于缺氧空白组和缺氧阴性对照组，差异有统计学意义(Plt;0.05)。 (3)流式细胞术检测常氧状态下，三组细胞凋亡率低，三者

19、之间差别无统计学意义(Pgt;0.05)，而在缺氧状态下，实验组凋亡率高于缺氧空白组和缺氧阴性对照组(Plt;0.05)。 (4) Western blot 法检测显示：在常氧状态下，实验组细胞 HIF-2 蛋白表达受到抑制，低于阴性对照组和空白对照组(Plt;0.05)。在缺氧状态下，实验组 HIF-2 蛋白表达受到抑制，低于阴性对照组和空白对照组(Plt;0.05)。缺氧阴性对照组和缺氧空白对照组的HIF-2 蛋白表达分别与常氧阴性对照组和常氧空白对照组相比较，表达明显增强(Plt;0.05)。而缺氧实验组 HIF-2 蛋白表达与常氧实验组比较，差别无统计学意义(Pgt;0.05)。 (5

20、)集落形成实验结果及存活曲线相关参数显示出放射敏感性指标 D0、SF2、 Dq 均呈现不同程度的下降，D0 增敏比达到 1.3169。 结论： 在缺氧状态下，HSP90 抑制剂 17-AAG 对人肾癌细胞株Caki-1 具有明显的增殖抑制作用，促进肿瘤细胞发生凋亡。其诱导人肾癌细胞株 Caki-1 细胞凋亡的机制与其下调 HIF-2 的表达有关。在缺氧状态下，17-AAG 可以提高人肾癌细胞株 Caki-1 细胞的放射敏感性。目的： 观察 HSP90 抑制剂 17-AAG 在缺氧状态下对人肾癌 Caki-1 细胞的增殖抑制作用和放射增敏作用，并初步探讨其产生增殖抑制作用和放射增敏作用的机制。

21、方法： (1)体外培养人肾癌 Caki-1 细胞株。 (2) MTT 比色法检测在缺氧状态下不同时间和不同浓度的 17-AAG 对人肾癌细胞株 Caki-1 细胞的增殖抑制作用。 (3)将终浓度为 80nmol/L17-AAG 作用于人肾癌细胞株 Caki-1(实验组)，分别在常氧和缺氧状态下进行培养。同时设立阴性对照组和空白对照组。采用 MTT 比色法检测三组细胞不同时间 OD570 值；倒置显微镜观察细胞形态学变化；流式细胞仪检测细胞凋亡；Western blot 法检测 HIF-2 蛋白表达。 (4)在缺氧状态下将终浓度为 10nmol/L17-AAG 作用于人肾癌细胞株Caki-1，用

22、不同剂量 6MV-X 射线照射，采用集落形成实验检测 17-AAG 对 Caki-1 细胞的放射增敏效应。 结果： (1)在缺氧状态下，HSP90 抑制剂 17-AAG对人肾癌细胞株 Caki-1 具有增殖抑制作用，且具有时间剂量依赖性。 (2)在常氧状态下，三组 Caki-1 细胞的 OD570 值之间差别无统计学意义(Pgt;0.05)。在缺氧状态下，48h 后缺氧实验组各时间点 OD570 值明显低于缺氧空白组和缺氧阴性对照组，差异有统计学意义(Plt;0.05)。 (3)流式细胞术检测常氧状态下，三组细胞凋亡率低，三者之间差别无统计学意义(Pgt;0.05)，而在缺氧状态下，实验组凋亡

23、率高于缺氧空白组和缺氧阴性对照组(Plt;0.05)。 (4) Western blot 法检测显示：在常氧状态下，实验组细胞 HIF-2 蛋白表达受到抑制，低于阴性对照组和空白对照组(Plt;0.05)。在缺氧状态下，实验组 HIF-2 蛋白表达受到抑制，低于阴性对照组和空白对照组(Plt;0.05)。缺氧阴性对照组和缺氧空白对照组的HIF-2 蛋白表达分别与常氧阴性对照组和常氧空白对照组相比较，表达明显增强(Plt;0.05)。而缺氧实验组 HIF-2 蛋白表达与常氧实验组比较，差别无统计学意义(Pgt;0.05)。 (5)集落形成实验结果及存活曲线相关参数显示出放射敏感性指标 D0、SF

24、2、 Dq 均呈现不同程度的下降，D0 增敏比达到 1.3169。 结论： 在缺氧状态下，HSP90 抑制剂 17-AAG 对人肾癌细胞株Caki-1 具有明显的增殖抑制作用，促进肿瘤细胞发生凋亡。其诱导人肾癌细胞株 Caki-1 细胞凋亡的机制与其下调 HIF-2 的表达有关。在缺氧状态下，17-AAG 可以提高人肾癌细胞株 Caki-1 细胞的放射敏感性。目的： 观察 HSP90 抑制剂 17-AAG 在缺氧状态下对人肾癌 Caki-1 细胞的增殖抑制作用和放射增敏作用，并初步探讨其产生增殖抑制作用和放射增敏作用的机制。 方法： (1)体外培养人肾癌 Caki-1 细胞株。 (2) MTT

25、 比色法检测在缺氧状态下不同时间和不同浓度的 17-AAG 对人肾癌细胞株 Caki-1 细胞的增殖抑制作用。 (3)将终浓度为 80nmol/L17-AAG 作用于人肾癌细胞株 Caki-1(实验组)，分别在常氧和缺氧状态下进行培养。同时设立阴性对照组和空白对照组。采用 MTT 比色法检测三组细胞不同时间 OD570 值；倒置显微镜观察细胞形态学变化；流式细胞仪检测细胞凋亡；Western blot 法检测 HIF-2 蛋白表达。 (4)在缺氧状态下将终浓度为 10nmol/L17-AAG 作用于人肾癌细胞株Caki-1，用不同剂量 6MV-X 射线照射，采用集落形成实验检测 17-AAG

26、对 Caki-1 细胞的放射增敏效应。 结果： (1)在缺氧状态下，HSP90 抑制剂 17-AAG对人肾癌细胞株 Caki-1 具有增殖抑制作用，且具有时间剂量依赖性。 (2)在常氧状态下，三组 Caki-1 细胞的 OD570 值之间差别无统计学意义(Pgt;0.05)。在缺氧状态下，48h 后缺氧实验组各时间点 OD570 值明显低于缺氧空白组和缺氧阴性对照组，差异有统计学意义(Plt;0.05)。 (3)流式细胞术检测常氧状态下，三组细胞凋亡率低，三者之间差别无统计学意义(Pgt;0.05)，而在缺氧状态下，实验组凋亡率高于缺氧空白组和缺氧阴性对照组(Plt;0.05)。 (4) We

27、stern blot 法检测显示：在常氧状态下，实验组细胞 HIF-2 蛋白表达受到抑制，低于阴性对照组和空白对照组(Plt;0.05)。在缺氧状态下，实验组 HIF-2 蛋白表达受到抑制，低于阴性对照组和空白对照组(Plt;0.05)。缺氧阴性对照组和缺氧空白对照组的HIF-2 蛋白表达分别与常氧阴性对照组和常氧空白对照组相比较，表达明显增强(Plt;0.05)。而缺氧实验组 HIF-2 蛋白表达与常氧实验组比较，差别无统计学意义(Pgt;0.05)。 (5)集落形成实验结果及存活曲线相关参数显示出放射敏感性指标 D0、SF2、 Dq 均呈现不同程度的下降，D0 增敏比达到 1.3169。

28、结论： 在缺氧状态下，HSP90 抑制剂 17-AAG 对人肾癌细胞株Caki-1 具有明显的增殖抑制作用，促进肿瘤细胞发生凋亡。其诱导人肾癌细胞株 Caki-1 细胞凋亡的机制与其下调 HIF-2 的表达有关。在缺氧状态下，17-AAG 可以提高人肾癌细胞株 Caki-1 细胞的放射敏感性。目的： 观察 HSP90 抑制剂 17-AAG 在缺氧状态下对人肾癌 Caki-1 细胞的增殖抑制作用和放射增敏作用，并初步探讨其产生增殖抑制作用和放射增敏作用的机制。 方法： (1)体外培养人肾癌 Caki-1 细胞株。 (2) MTT 比色法检测在缺氧状态下不同时间和不同浓度的 17-AAG 对人肾癌

29、细胞株 Caki-1 细胞的增殖抑制作用。 (3)将终浓度为 80nmol/L17-AAG 作用于人肾癌细胞株 Caki-1(实验组)，分别在常氧和缺氧状态下进行培养。同时设立阴性对照组和空白对照组。采用 MTT 比色法检测三组细胞不同时间 OD570 值；倒置显微镜观察细胞形态学变化；流式细胞仪检测细胞凋亡；Western blot 法检测 HIF-2 蛋白表达。 (4)在缺氧状态下将终浓度为 10nmol/L17-AAG 作用于人肾癌细胞株Caki-1，用不同剂量 6MV-X 射线照射，采用集落形成实验检测 17-AAG 对 Caki-1 细胞的放射增敏效应。 结果： (1)在缺氧状态下，

30、HSP90 抑制剂 17-AAG对人肾癌细胞株 Caki-1 具有增殖抑制作用，且具有时间剂量依赖性。 (2)在常氧状态下，三组 Caki-1 细胞的 OD570 值之间差别无统计学意义(Pgt;0.05)。在缺氧状态下，48h 后缺氧实验组各时间点 OD570 值明显低于缺氧空白组和缺氧阴性对照组，差异有统计学意义(Plt;0.05)。 (3)流式细胞术检测常氧状态下，三组细胞凋亡率低，三者之间差别无统计学意义(Pgt;0.05)，而在缺氧状态下，实验组凋亡率高于缺氧空白组和缺氧阴性对照组(Plt;0.05)。 (4) Western blot 法检测显示：在常氧状态下，实验组细胞 HIF-

31、2 蛋白表达受到抑制，低于阴性对照组和空白对照组(Plt;0.05)。在缺氧状态下，实验组 HIF-2 蛋白表达受到抑制，低于阴性对照组和空白对照组(Plt;0.05)。缺氧阴性对照组和缺氧空白对照组的HIF-2 蛋白表达分别与常氧阴性对照组和常氧空白对照组相比较，表达明显增强(Plt;0.05)。而缺氧实验组 HIF-2 蛋白表达与常氧实验组比较，差别无统计学意义(Pgt;0.05)。 (5)集落形成实验结果及存活曲线相关参数显示出放射敏感性指标 D0、SF2、 Dq 均呈现不同程度的下降，D0 增敏比达到 1.3169。 结论： 在缺氧状态下，HSP90 抑制剂 17-AAG 对人肾癌细胞

32、株Caki-1 具有明显的增殖抑制作用，促进肿瘤细胞发生凋亡。其诱导人肾癌细胞株 Caki-1 细胞凋亡的机制与其下调 HIF-2 的表达有关。在缺氧状态下，17-AAG 可以提高人肾癌细胞株 Caki-1 细胞的放射敏感性。目的： 观察 HSP90 抑制剂 17-AAG 在缺氧状态下对人肾癌 Caki-1 细胞的增殖抑制作用和放射增敏作用，并初步探讨其产生增殖抑制作用和放射增敏作用的机制。 方法： (1)体外培养人肾癌 Caki-1 细胞株。 (2) MTT 比色法检测在缺氧状态下不同时间和不同浓度的 17-AAG 对人肾癌细胞株 Caki-1 细胞的增殖抑制作用。 (3)将终浓度为 80n

33、mol/L17-AAG 作用于人肾癌细胞株 Caki-1(实验组)，分别在常氧和缺氧状态下进行培养。同时设立阴性对照组和空白对照组。采用 MTT 比色法检测三组细胞不同时间 OD570 值；倒置显微镜观察细胞形态学变化；流式细胞仪检测细胞凋亡；Western blot 法检测 HIF-2 蛋白表达。 (4)在缺氧状态下将终浓度为 10nmol/L17-AAG 作用于人肾癌细胞株Caki-1，用不同剂量 6MV-X 射线照射，采用集落形成实验检测 17-AAG 对 Caki-1 细胞的放射增敏效应。 结果： (1)在缺氧状态下，HSP90 抑制剂 17-AAG对人肾癌细胞株 Caki-1 具有增

34、殖抑制作用，且具有时间剂量依赖性。 (2)在常氧状态下，三组 Caki-1 细胞的 OD570 值之间差别无统计学意义(Pgt;0.05)。在缺氧状态下，48h 后缺氧实验组各时间点 OD570 值明显低于缺氧空白组和缺氧阴性对照组，差异有统计学意义(Plt;0.05)。 (3)流式细胞术检测常氧状态下，三组细胞凋亡率低，三者之间差别无统计学意义(Pgt;0.05)，而在缺氧状态下，实验组凋亡率高于缺氧空白组和缺氧阴性对照组(Plt;0.05)。 (4) Western blot 法检测显示：在常氧状态下，实验组细胞 HIF-2 蛋白表达受到抑制，低于阴性对照组和空白对照组(Plt;0.05)

35、。在缺氧状态下，实验组 HIF-2 蛋白表达受到抑制，低于阴性对照组和空白对照组(Plt;0.05)。缺氧阴性对照组和缺氧空白对照组的HIF-2 蛋白表达分别与常氧阴性对照组和常氧空白对照组相比较，表达明显增强(Plt;0.05)。而缺氧实验组 HIF-2 蛋白表达与常氧实验组比较，差别无统计学意义(Pgt;0.05)。 (5)集落形成实验结果及存活曲线相关参数显示出放射敏感性指标 D0、SF2、 Dq 均呈现不同程度的下降，D0 增敏比达到 1.3169。 结论： 在缺氧状态下，HSP90 抑制剂 17-AAG 对人肾癌细胞株Caki-1 具有明显的增殖抑制作用，促进肿瘤细胞发生凋亡。其诱导

36、人肾癌细胞株 Caki-1 细胞凋亡的机制与其下调 HIF-2 的表达有关。在缺氧状态下，17-AAG 可以提高人肾癌细胞株 Caki-1 细胞的放射敏感性。目的： 观察 HSP90 抑制剂 17-AAG 在缺氧状态下对人肾癌 Caki-1 细胞的增殖抑制作用和放射增敏作用，并初步探讨其产生增殖抑制作用和放射增敏作用的机制。 方法： (1)体外培养人肾癌 Caki-1 细胞株。 (2) MTT 比色法检测在缺氧状态下不同时间和不同浓度的 17-AAG 对人肾癌细胞株 Caki-1 细胞的增殖抑制作用。 (3)将终浓度为 80nmol/L17-AAG 作用于人肾癌细胞株 Caki-1(实验组)，

37、分别在常氧和缺氧状态下进行培养。同时设立阴性对照组和空白对照组。采用 MTT 比色法检测三组细胞不同时间 OD570 值；倒置显微镜观察细胞形态学变化；流式细胞仪检测细胞凋亡；Western blot 法检测 HIF-2 蛋白表达。 (4)在缺氧状态下将终浓度为 10nmol/L17-AAG 作用于人肾癌细胞株Caki-1，用不同剂量 6MV-X 射线照射，采用集落形成实验检测 17-AAG 对 Caki-1 细胞的放射增敏效应。 结果： (1)在缺氧状态下，HSP90 抑制剂 17-AAG对人肾癌细胞株 Caki-1 具有增殖抑制作用，且具有时间剂量依赖性。 (2)在常氧状态下，三组 Cak

38、i-1 细胞的 OD570 值之间差别无统计学意义(Pgt;0.05)。在缺氧状态下，48h 后缺氧实验组各时间点 OD570 值明显低于缺氧空白组和缺氧阴性对照组，差异有统计学意义(Plt;0.05)。 (3)流式细胞术检测常氧状态下，三组细胞凋亡率低，三者之间差别无统计学意义(Pgt;0.05)，而在缺氧状态下，实验组凋亡率高于缺氧空白组和缺氧阴性对照组(Plt;0.05)。 (4) Western blot 法检测显示：在常氧状态下，实验组细胞 HIF-2 蛋白表达受到抑制，低于阴性对照组和空白对照组(Plt;0.05)。在缺氧状态下，实验组 HIF-2 蛋白表达受到抑制，低于阴性对照组

39、和空白对照组(Plt;0.05)。缺氧阴性对照组和缺氧空白对照组的HIF-2 蛋白表达分别与常氧阴性对照组和常氧空白对照组相比较，表达明显增强(Plt;0.05)。而缺氧实验组 HIF-2 蛋白表达与常氧实验组比较，差别无统计学意义(Pgt;0.05)。 (5)集落形成实验结果及存活曲线相关参数显示出放射敏感性指标 D0、SF2、 Dq 均呈现不同程度的下降，D0 增敏比达到 1.3169。 结论： 在缺氧状态下，HSP90 抑制剂 17-AAG 对人肾癌细胞株Caki-1 具有明显的增殖抑制作用，促进肿瘤细胞发生凋亡。其诱导人肾癌细胞株 Caki-1 细胞凋亡的机制与其下调 HIF-2 的表

40、达有关。在缺氧状态下，17-AAG 可以提高人肾癌细胞株 Caki-1 细胞的放射敏感性。目的： 观察 HSP90 抑制剂 17-AAG 在缺氧状态下对人肾癌 Caki-1 细胞的增殖抑制作用和放射增敏作用，并初步探讨其产生增殖抑制作用和放射增敏作用的机制。 方法： (1)体外培养人肾癌 Caki-1 细胞株。 (2) MTT 比色法检测在缺氧状态下不同时间和不同浓度的 17-AAG 对人肾癌细胞株 Caki-1 细胞的增殖抑制作用。 (3)将终浓度为 80nmol/L17-AAG 作用于人肾癌细胞株 Caki-1(实验组)，分别在常氧和缺氧状态下进行培养。同时设立阴性对照组和空白对照组。采用

41、 MTT 比色法检测三组细胞不同时间 OD570 值；倒置显微镜观察细胞形态学变化；流式细胞仪检测细胞凋亡；Western blot 法检测 HIF-2 蛋白表达。 (4)在缺氧状态下将终浓度为 10nmol/L17-AAG 作用于人肾癌细胞株Caki-1，用不同剂量 6MV-X 射线照射，采用集落形成实验检测 17-AAG 对 Caki-1 细胞的放射增敏效应。 结果： (1)在缺氧状态下，HSP90 抑制剂 17-AAG对人肾癌细胞株 Caki-1 具有增殖抑制作用，且具有时间剂量依赖性。 (2)在常氧状态下，三组 Caki-1 细胞的 OD570 值之间差别无统计学意义(Pgt;0.05

42、)。在缺氧状态下，48h 后缺氧实验组各时间点 OD570 值明显低于缺氧空白组和缺氧阴性对照组，差异有统计学意义(Plt;0.05)。 (3)流式细胞术检测常氧状态下，三组细胞凋亡率低，三者之间差别无统计学意义(Pgt;0.05)，而在缺氧状态下，实验组凋亡率高于缺氧空白组和缺氧阴性对照组(Plt;0.05)。 (4) Western blot 法检测显示：在常氧状态下，实验组细胞 HIF-2 蛋白表达受到抑制，低于阴性对照组和空白对照组(Plt;0.05)。在缺氧状态下，实验组 HIF-2 蛋白表达受到抑制，低于阴性对照组和空白对照组(Plt;0.05)。缺氧阴性对照组和缺氧空白对照组的H

43、IF-2 蛋白表达分别与常氧阴性对照组和常氧空白对照组相比较，表达明显增强(Plt;0.05)。而缺氧实验组 HIF-2 蛋白表达与常氧实验组比较，差别无统计学意义(Pgt;0.05)。 (5)集落形成实验结果及存活曲线相关参数显示出放射敏感性指标 D0、SF2、 Dq 均呈现不同程度的下降，D0 增敏比达到 1.3169。 结论： 在缺氧状态下，HSP90 抑制剂 17-AAG 对人肾癌细胞株Caki-1 具有明显的增殖抑制作用，促进肿瘤细胞发生凋亡。其诱导人肾癌细胞株 Caki-1 细胞凋亡的机制与其下调 HIF-2 的表达有关。在缺氧状态下，17-AAG 可以提高人肾癌细胞株 Caki-

44、1 细胞的放射敏感性。特别提醒 ：正文内容由 PDF 文件转码生成，如您电脑未有相应转换码，则无法显示正文内容，请您下载相应软件，下载地址为 http:/ 。如还不能显示，可以联系我 q q 1627550258 ，提供原格式文档。“垐垯櫃 换烫梯葺铑?endstreamendobj2x 滌?U 閩 AZ箾 FTP 鈦X 飼?狛P? 燚?琯嫼 b?袍*甒?颙嫯?4)=r 宵?i?j 彺帖 B3 锝檡骹笪 yLrQ#?0 鯖 l 壛枒l 壛枒 l 壛枒 l 壛枒 l 壛枒 l 壛枒 l 壛枒 l 壛枒 l 壛枒 l 壛枒 l 壛枒 l 壛渓?擗#?“?# 綫 G 刿#K 芿$?7. 耟?Wa 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 皗 E|?pDb 癳$Fb 癳$Fb癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$F?責鯻 0 橔 C,f 薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵秾腵薍秾腵%?秾腵薍秾腵薍