1、在靶细胞表面形成攻膜复合物（MAC）补体系统激活后产生细胞毒作用导致靶细胞溶解攻膜复合物：C5b6789细胞毒作用形成膜攻击复合物（MAC）靶细胞表面抗原相应抗体(IgM或IgG类)细胞膜穿孔免疫复合物本实验由于抗原（红细胞）与抗体（溶血素）进行特异性结合形成的免疫复合物，可激活补体系统（豚鼠血清），而使红细胞在补体的作用下被溶解，产生了溶血现象。因此，补体介导的细胞毒性实验显示了抗体、补体共同的细胞毒性作用。靶 细 胞 ： 2%绵 羊 红 细 胞 抗 体 ： 溶 血 素 补 体 ： 豚 鼠 血 清稀 释 液 ：pH7.2的 磷 酸 盐 缓 冲 液 （ PBS）EP管 架EP管 微 量 加 样
2、 器离 心 机水 浴 箱 记 号 笔 废 物 桶吸 嘴 计 时 器1.提前开启水浴箱2.配液稀释抗体配置不同浓度的补体3.编号4.分组操作5.离心6.结果观察高浓度补体（C1）1:10中浓度补体（C2）1:20低浓度补体（C3）1:40分组1号管高浓度C1组2号管中浓度C2组3号管低浓度C3组4号管抗体对照组5号管补体对照组6号管空白对照组RBS( l) 100 100 100 100 100 100Ab( l) 100 100 100 100 / /PBC( l) / / / / 100 100颠倒混匀，37C水浴30min；1:10 C1( l) 200 / / / 200 /1:20 C
3、2( l) / 200 / / / /1:40 C3( l) / / 200 / / /PBS( l) / / / 200 / 2 0 0颠倒混匀，37C水浴30min；2000r/min离心5min；结果观察。1号管高浓度C1组2号管中浓度C2组3号管低浓度C3组4号管抗体对照组5号管补体对照组6号管空白对照组分组试剂不溶血溶血现象稍溶血全溶血分组1号管高浓度C1组2号管中浓度C2组3号管低浓度C3组4号管抗体对照组5号管补体对照组6号管空白对照组结果全溶血溶血较多溶血较少不溶血不溶血不溶血如果测定管不出现溶血，说明补体用量不够。肉眼观察：形成膜攻击复合物（MAC） 溶血素（作为抗体）作为抗
4、原的红细胞细胞溶解破裂免疫复合物RBC( l) 100 100 100 100 100 100Ab( l) 100 100 100 100 / /PBC( l) / / / / 100 1001:10 C1( l) 200 / / / 200 /1:20 C2( l) / 200 / / / /1:40 C3( l) / / 200 / / /PBS( l) / / / 200 / 2 0 01号管高浓度C1组2号管中浓度C2组3号管低浓度C3组4号管抗体对照组5号管补体对照组6号管空白对照组分组试剂 13号管所加的补体数量逐渐减少补体介导的细胞毒性作用减弱红细胞溶血现象也随之减轻RBC( l) 100 100 100 100 100 100Ab( l) 100 100 100 100 / /PBC( l) / / / / 100 1001:10 C1( l) 200 / / / 200 /1:20 C2( l) / 200 / / / /1:40 C3( l) / / 200 / / /PBS( l) / / / 200 / 2 0 01号管高浓度C1组2号管中浓度C2组3号管低浓度C3组4号管抗体对照组5号管补体对照组6号管空白对照组分组试剂 4号管未加入补体，不溶血 5号管未加入抗体，故不溶血 6号管，抗体和补体均缺乏，故也不溶血补体介导的细胞毒性实验显示了
