1、论文开题报告：基于 RAPD 的三角梅属种质资源遗传多样性研究论文开题报告：基于 RAPD 的三角梅属种质资源遗传多样性研究发表时间:2013-8-3 21:12:39大学本科毕业论文(设计)开题报告学院： 化工学院 专业班级： 08 园艺（观赏园艺） 课题名称基于 RAPD 的三角梅属种质资源遗传多样性研究1、本课题的的研究目的和意义：三角梅属（Bougainvillea）隶属于紫茉莉科 (Nyctaginaceae)，最早由法国大探险家 Louis-antoine de Bougainville 于 1766-1769 年在南美洲的巴西发现并以他的名字命名。该属仅有3 个种具有观赏价值，但
2、因其花色多样，在园林中广泛应用。全世界约有 300 个三角梅品种，我国保存的品种仅有 80 多个，且具有极高观赏价值的杂交三角梅品种较少。RAPD 作为一种分子标记，其操作简便、快速、费用少，在观赏植物上己被用于遗传多样性方面的研究。通过文献研究，发现过去和现在对三角梅的研究主要集中在栽培技术、组织培养等方面，分子生物学方面的研究几乎为空白，居群的遗传关系也不明了。对三角梅遗传演化、种质资源评价、遗传多样性等方面研究也较少。本实验通过对三角梅的初步研究，建立适合三角梅品种的 RAPD 分析体系，根据三角梅植物学形态特征和 RAPD 分析数据探讨三角梅品种的遗传多样性及亲缘关系，旨在能对品种分子
3、水平上的可查阅的有 Richa Srivastava 发表的一篇三角梅 RAPD 研究的文章。在国内的研究中，王芬芬根据厦门植物园收集保存的近 30 个品种，可分为三类，分别为三角梅 (Bougainvilleaspeetabilis)、光叶三角梅(Bougainvilleaglabra) 和杂交三角梅 (Bougainvilleabuttiana)。而洪项目认为我国自 1872 年引种栽培，现共有 4 个原生种，分别为光叶三角梅、红花三角、秘鲁三角梅和密节三角梅。综上所述，近年来我国学者对三角梅的研究多侧重于组织培养、快速繁殖和栽培技术方面，而对三角梅的品种分类及其遗传多样性却鲜有报道。3、
4、本课题的主要研究内容（提纲）和成果形式：本实验采用三角梅 48 个品种为研究对象，来探讨三角梅属植物的遗传多样性。目的在于通过对 48 个品种的三角梅的 RAPD 分析，探索不同品种三角梅间的遗传多样性，为三角梅属植物的分类和品种鉴定提供参考依据，同时也为三角梅属植物的引种及新品种选育提供理论依据和应用基础。主要内容如下：（1）建立三角梅属 48 个品种的 RAPD 分析体系，对 48 个品种的三角梅的核 DNA 遗传多态性、聚类树进行分析；（2）在分子标记的基础上，根据所得到的分子数据，并结合相关资料对三角梅的遗传多样性进行综合分析。成果形式：毕业论文4、拟解决的关键问题：（1）优化 CTA
5、B 法提取三角梅 48 个品的 DNA。（2）建立 RAPD 反应体系（3）优化 RAPD-PCR 反应体系（4）优化琼脂凝胶电泳系统5、研究思路、方法和步骤：思路：参考他人文献，根据查阅的资料设计适合三角梅的 RAPD 反应体系，接着进行预实验，检测实验的合理性，并进行适当调整，紧接着进行实验，并做实验补充，然后处理数据。方法：本实验采用随机扩增多态性 (RAPD)技术对三角梅遗传多样性进行研究， RAPD 分子标记建立在 PCR 基础之上。通过使用一系列具有 10 个碱基的单链随机引物，对基因组的全部 NDA 进行 PCR 扩增，然后经琼脂凝胶电泳分离，通过 EB 染色就可检测被扩增的 D
6、NA的多态性。为了使实验结果更准备，本实验采用单因素实验和正交实验相结合，对影响PCR 扩增效果的一些因素进行筛选和优化。步骤:三角梅属 48 个品种的嫩叶采集 核基因组的 DNA 的提取（CTAB 法） 基因组 DNA 组质量检测 引物的筛选 RAPD 扩增反应 PCR 产物的检测 实验数据统计及分析 RAPD 分析三角梅的遗传多样性6、本课题的进度安排：2011.09 查阅文献，确定方法并进行预实验以确定实验反应体系。提取三角梅属植物的 DNA2011.10 利用单因素和正交实验进一步优化实验体系。引物的初步筛选2011.11 对筛选后的引物进行 RAPD-PCR 扩增及产物检测。2012
7、.01 对实验效果较不佳的引物重新进行 RAPD-PCR 扩增及产物检测。2012.02 实验数据统计及分析2012.03-2012.05 写毕业论文和准备答辩材料7、参考文献：1刘晓宇.RAPD 分子标记技术概述及应用J.科学之友,2009,（03）2武晓燕，唐源江.三角梅属植物种质资源及其园林应用研究进展 J.南方农业,2010,4(10)3 徐夙侠，王亮生，舒庆艳，等三角梅属植物的生物学研究进展J 植物学通报,2008,25(4)：4834904 盖树鹏，盂祥椽.分子标记技术及其在作物育种中的应用J 农业生物技术科学，2003，19(6)：12155赵喜华，王曼莹杜鹃花 RAPD 条件的优化J生物技术，2005，15(1)：4l 一 436 谢运海，夏德安，姜静，等利用正交设计优化水曲柳 ISSRPCR 反应体系J 分子植物育种，2005，3(3)：4457范庆君，吕慧，范义荣，等.应用正交设计优化江南牡丹 RAPD-PCR 反应体系J.北方园艺,2011,(05):185-1878 徐夙侠，王亮生，舒庆艳，等 .三角梅属植物的生物学研究进展J. 植物学通报，2008，28(4).
