1、 结核抗体检测在小儿结核病诊断中的应用普 毅 1 白圆圆 2 雷 金 1 孙 立 11.个旧市疾病预防控制中心，云南个旧 661000；2.个旧市第三人民医院，云南个旧 661000摘要 目的 分析结核抗体检测在小儿结核病诊断中的应用效果。方法 选择本地区 20122013 年收治的结核病患儿患 48 例为观察组，并以同期入院的非结核病患儿 35 例为对照组，并对两组患儿的体液标本涂片、卡介菌纯化蛋白衍生物（PPD）和结核抗体检测结果进行比较。结果 三种方法组间差异具有统计学意义，其中以 PPD 法阳性率最高达 68.8%，涂片法最低（27.0%）；不同类型结核检测结果方面：涂片法肺结核的阳性
2、率显著高于肺外结核（P0.05），而PPD 法和结核抗体法在肺结核和肺外结核的阳性率方面差异均不显著（P0.05）。结论 结核抗体检测、涂片法和 PPD 检测在结核病诊断中各有特色，其中结核抗体检测尤其适于作为儿童、肺外结核及无痰患者的快速辅助诊断手段。教育期刊 关键词 儿童；结核病；结核抗体中图分类号 R446.6 文献标识码 A 文章编号 1672-5654（2014）07（a）-0024-02 结核感染仍是威胁全世界人类健康的重要疾病，虽然我国公共卫生发展迅速，疫苗接种率较高，但近年来发生率又呈现反弹趋势1，每年新增病例约占世界的15%，位居第二，其中儿童仍是结核病（TB）的主体人群2。
3、目前，儿童结核发病初期诊断仍存在一定的困难，痰菌阳性率较低，肺外结核细菌检查的阳性率更低3。本文通过对结核抗体检测在小儿结核病诊断中的应用效果进行分析，旨在探讨其在小儿肺结核诊断中的应用价值及优势。1 资料与方法 1.1 一般资料 选择本地区 2012年 3 月2013 年 3 月收治的疑似结核病患儿患 48 例为观察组，其中男 21 例，女 27 例，年龄 6 个月11 岁，平均 5.7 岁，肺结核 29例，肺外结核 19 例。所有患儿的临床表现和影像学检查均符合结核感染的标准4。另以同期入院的非结核病患儿 35 例为对照组，男18 例，女 17 例，年龄 8 至 14 岁，平均 6.2 岁
4、，两组间基本资料具有可比性（P0.05）。1.2 方法 所有患儿入院后均接受体液标本涂片、卡介菌纯化蛋白衍生物和结核抗体检测，体液涂片参照结核病诊断细菌学检验规格完成：采集患者 5 mL 痰液加入 5 mL 消化液，充分混匀后消化 58 min，转移至试管内并加入蒸馏水 10 mL，以转速为 3000 r/min 条件下离心 10 min（Anke TDL-5-A 型低速离心机，上海安亭科学仪器厂），弃上清，留沉渣 0.2ml 混匀后完成涂片，并以萋-尼（Ziehl-Neelsen）染色。 PPD 试验：采用左前臂掌侧中下 1/3 处皮内注射 PPD 0.1 mL（成都生物制品研究所），含 P
5、PD 5IU，于 72h 后观察，阳性标准：硬结直径大于 10 mm；结核抗体检测：按照结核分枝杆菌胶体金法原理，采用结核抗体试剂盒（上海奥普生物医药有限公司，规格：20 人/盒）进行检测，操作方法：在反应板中各孔内加入 2 mL 封闭液，等待薄膜吸入；取患者 40 mL 采集受试者血清，加入反应孔中，等待薄膜吸入； 在反应孔中加入 6 滴洗活液，等待薄膜吸入；加入 2 滴金标液，等待薄膜吸入；加入 6 滴洗涤液，等待薄膜吸收，并目测结果。1.3 统计学方法所有数据分析采用 SPSS 13.0 进行统计学分析，计数资料采用 2检验，以 =0.05为检验水准。2 结果 2.1 检测结果比较三种方
6、法在两组间差异均具有统计学意义（P0.05），结核病患儿诊断方面，三种方法间比较，以 PPD 法阳性率最高，涂片法最低，PPD 法和结核抗体法阳性率差异不显著（2=3.49，P0.05），但均显著高于涂片法（2=13.81 和 5.32，P0.05 ），非结核病患儿中，涂片法和结核抗体法的特异度均为 100%，而 PPD 特异度仅为77.1%，差异具有显著性（P0.01），见表 1。22 不同类型结核检测结果比较涂片法肺结核的阳性率显著高于肺外结核（P0.05），而 PPD 法和结核抗体法在肺结核和肺外结核的阳性率方面差异均不显著（P0.05），见表 2。3 讨论近年来，结核病的发病率呈抬头趋
7、势，尤其是儿童免疫力较低，更易感染。传统的结核感染诊断金标准主要依赖于体液涂片中结核杆菌的发现，辅以影像学等检查确诊，可用于结核病的早期诊断。但由于儿童呼吸系统发育不完善，结核肺内感染多见于肺内通气较好，且膨胀度高的部位，加之咳痰困难，因而痰液中排菌率低3，均不利于诊断的早期完成。近年来，小儿结核感染的早期诊断困难已经受到学界的普遍关注，相关的生物工程技术也陆续引入该领域，但均存在着一定的阳性率低，或假阳性率高的问题。PPD 技术不仅可用于卡介苗免疫效果的评价，也逐渐应用于儿童潜伏感染的诊断，其阴性可在排除免疫因素外，作为机体未受到人工或自然感染的佐证，多用于潜伏感染的排查5，本研究也发现结核
8、患儿 PPD 阳性率高达 68.8%，与国内报道相近，但与结核抗体比较，差异不显著（P0.05 ）但均高于涂片法，可能与儿童体液中结核活菌少有关。同时也有报道表明虽然 PPD 方法灵敏，但影响因素较多， 10%的患儿对其无应答5，且操作过程中部分患儿对其易产生不良反应，这也抑制了其使用。结核抗体研究始于 1898 年，作为结核感染的辅助诊断手段至今已有上百年的历史，人感染结核菌后，即会有免疫应答，T 淋巴细胞识别后，特异性的表达抗原，因而不受感染部位和活菌排出的影响，而且用于抗体检测的新方法也不断涌现3-4。黄绍梅等3报道表明与 PPD 法相比，结核抗体检测可有效区分结核菌感染与、卡介苗注射以
9、及其他分枝杆菌引发的特异性抗体表达，因而假阳性率较低。本组结果也表明在非结核病患者诊断时，结核抗体法特异度高达 100%，显著高于 PPD 法 77.1%，这与国内报道相近 6，提示结核抗体法可作为可靠的诊断依据。此外，结核感染部位也是限制诊断的重要因素，虽然涂片法和影像学诊断更为直接，但由于小儿肺外结核的体液获取更为困难，也限制了诊断的完成，本研究结果表明，涂片法在肺结核的阳性率显著高于肺外结核，而结核抗体法和PPD 法在肺结核和肺外结核的诊断方面则无差别，提示体液应答不受感染部位的影响，因而结核抗体法具有较为稳定的诊断效果，更适于肺外结核的无创诊断，这与李晓非等2报道基本一致。总之，结核抗体检测、涂片法和 PPD 检测在结核病诊断中各有特色，其中结核抗体检测尤其适于作为儿童、肺外结核及无痰患者的快速辅助诊断手段。教育期刊
