1、药物对呼吸系统的影响实验一、对小鼠咳嗽的影响（氨水引咳法）【目的】掌握氨水引咳法的实验方法，了解的复方贝母氯化铵片镇咳作用【原理】浓氨水刺激呼吸道的感受器反射地引起咳嗽。【材料】动物：昆明种小鼠，18-22g,雌性各半药物：复方贝母氯化铵片、浓氨水、生理盐水主要器材：引咳仪、灌胃器、注射器、体重秤【方法】取1822g昆明种小鼠10只，雌雄各半，随机分成2组，每组,5只，分别为给药组、空白对照组，灌胃给药0.3ml/10g体重，于末次给药30min后，以引咳仪喷25%氨水3min引咳，停止给药后在观察2分钟，即从给药到观察结束共5分钟，观察记录小鼠的咳嗽潜伏期和5min内的咳嗽次数(小鼠的咳嗽判
2、断以其腹肌收缩，同时张大嘴为准，有时可有嗽声)。【结果】结果以均数加减标准差（ ±s）表示，统计学处理方法采用组间t检验。结果记入下表x表 复方贝母氯化铵片对小鼠咳嗽潜伏期和咳嗽次数的影响( ±s)x组 别 剂量（mg/kg） 动物数（只） 咳嗽潜伏期 （s） 咳嗽次数（次/5min）给药组空白对照组【注意事项】1.浓氨水现配现用（原液的 25%）2.放鼠前先充一会浓氨水喷雾再实验3.仪器会给据小鼠的咳嗽响声自动计数，但是只有动作，无声音就不会计数，所以观察计数次数，如果小鼠有明显咳嗽，但仪器没记录，就用计数器记录一次，这样结果更加准确4.浓氨水，每次加 10ml，下次再加
3、入时，先倒掉残夜，再加入新液，一定要注意密封浓氨水的所有容器。附：设定方法：设置给药时间 180（代表 180 秒）计数时间 05（代表 5 分钟）实验方法：在容器中注入 25%氨水开始显示反应时间（第一次按咳嗽计数按钮，此处显示是咳嗽潜伏期）计数次数（咳嗽次数）每只动物给药时间间隔 5 分钟二、对小鼠气管酚红排泌量的影响（小鼠酚红排泌法）【目的】掌握小鼠酚红排泌法的实验方法，了解的复方贝母氯化铵片对小鼠气管段酚红排泌量的影响。【原理】指示剂酚红自小鼠腹腔注射并经腹腔吸收后，可部分地由支气管粘液腺分泌入气道，有祛痰作用的药物在使支气管分泌液增加的同时，其由呼吸道粘膜排出的酚也随之增加。因而可从
4、药物对气管内酚红排泌量的影响来观察其祛痰作用。酚红在碱性溶液中呈红色，将从道中洗出的液体，用比色法（分光光度计）测出酚红的排泌量。从而得出药物的祛痰作用。【材料】动物：昆明种小鼠，18-22g,雌性各半药物：复方贝母氯化铵片、2.5%酚红溶液、生理盐水、5%碳酸氢钠溶液主要器材：灌胃器、注射器、体重秤、手术器械、分光光度计、离心机【方法】取 1822g 昆明种小鼠 10 只，雌雄各半，随机分成 2 组，每组 5 只，分别为空白对照组、给药组，灌胃给药 0.3ml/10g 体重，于末次给药 30min 后，每鼠腹腔注射 2.5%酚红生理盐水液（0.2ml/10g） ，注射酚红液后 30min，小
5、鼠脱颈椎处死，暴露气管，气管插管并与注射器相连，用 5%碳酸氢钠溶液 1ml 缓慢注入气管中，然后轻轻吸出，如此反复 3 次，合并 3 次冲洗液，放置一定时间使杂质沉淀，得到透明的红色上清液，以 5%碳酸氢纳溶液调零，用紫外可见分光光度计在 545 波长处测定吸光度值。【结果】结果以均数加减标准差（ ±s）表示，统计学处理方法采用组间 t 检验。x表复方贝母氯化铵片对小鼠气管酚红排泌量吸光度值的影响( ±s)x组 别 剂量（mg/kg） 动物数（只） 酚红排泌量 吸光度值给药组空白对照组附：此次试验只学习方法不写实验报告，但得写入预习报告可以使用镇咳实验的动物，再给药 40 分钟时注射酚红溶液
