1、二、核酸酶的作用特点 1、外切核酸酶 外切核酸酶作用于核酸链的一段,逐个水解下核苷酸。 它们是非特异性的磷酸二酯酶。 如蛇青磷酸二酯酶是从 DNA 的有力 3-羟基端开始,逐个水解下 5-核苷酸(3 段外切 3 得 5) 牛脾磷酸二酯是从游离 5羟基端开始,逐个水解下 3-核苷酸。(5 端外切 5 得 3) 2、内切核酸酶 内切核酸酶则特异性地水解核算分为内磷酸二酯键。 他们是特异性很强的磷酸二酯酶。 如牛胰 RnaseI(牛胰核苷酸酶 I)作用于嘧啶(Py)核苷酸的磷酸二酯键。 生成嘧啶核苷-3-磷酸或末端为嘧啶核苷 -3-磷酸的寡核苷酸。 又如 RnaseT(核糖核酸酯 T)作用于鸟苷酸二
2、酯键,生成 3-GMP或以 3为末端的寡核苷酸。 3、脱氧核糖核酸酶:专水解 DNA如 Dnase(牛胰脱氧核糖核酸酶),可切割双链或单链 DNA,产物为 5-磷酸为末端的寡核苷酸。DNAase(牛脾脱氧核糖核苷酸酶),从 DNA 的游离 5端开始逐个水解下 3-核苷酸。 4、限制性内切酶(也叫限制酶) 是 1979 年由 WArber、HSmith 和 DNathan 等人在细菌细胞内发现的。 它的特点是具有极高的转移性,能够识别 DNA 双链上的特定位点。这些位点的长度一般在 48 个碱基对范围内,通常具有回文结构。切割后形成粘性末端或平齐末端。链的一段具有特定位点中的几个互补碱基,这样的末端称为粘性末端。