1、实验十植物缺水程度的鉴定 脯氨酸法 南京晓庄学院生命科学系 实验原理 当植物遭受渗透胁迫 造成生理性缺水 植物体内脯氨酸含量在一定程度上反映了植株内的水分状况 所以其含量可作为植物缺水的参考指标 在酸性条件下 茚三酮与脯氨酸反应生成红色化合物 其含量与色度成正比 故可用分光光度计测定 实验目的 了解植物体内水分亏缺与脯氨酸积累的关系 实验器材与试剂 1 实验仪器 722型分光光度计 水浴锅 烧杯 移液管 722型分光光度计2 实验试剂 冰醋酸 3 磺基水杨酸 标准脯氨酸溶液 酸性茚三酮试剂 实验步骤 1 取材料0 2g剪碎后放入试管中 加5ml3 磺基水杨酸 在沸水中提取10min 冷却至室温
2、后取提取液2ml 分别加蒸馏水2ml 冰醋酸2ml和2 5 茚三酮4ml 置于沸水浴显色1h 冷却后于520nm处比色 2 绘制标准曲线100ug ml脯氨酸溶液配制成2 4 6 8 10ug ml的标准液 按1的方法加入2ml3 磺基水杨酸 2ml冰醋酸和4ml茚三酮试剂比色 植物缺水程度鉴定图 实验结果 实验测得OD值为0 86代入公式得x 70 57ug ml所以植物体内的脯氨酸含量 70 57ug mlx5ml 0 2g 1764ug g Fw 注意事项 1 选取实验材料时 应选生长较好的叶片 不可选用已枯死的叶片 且应避免选取发黄 发红的叶片 以免影响实验结果 2 将叶片充分剪碎 提高实验准确性 3 茚三酮虽无色 但与脯氨酸会发生显色反应 故吸取时应小心避免与皮肤接触 4 制作标准曲线时 应用2ml蒸馏水 2ml3 磺基水杨酸 2ml冰醋酸 4ml茚三酮比色
