1、受控状态：象 山 县 疾 病 预 防 控 制 中 心 密 级：发放编号：作 业 指 导 书（WORK INSTRUCTOR）文件名称 丙氨酸氨基转移酶（ALT/GPT）检测细则（北京瑞尔达）文件编号 XS-CDC/ 版本号 第 I 版编 制审 核批 准王南红林 朝叶 众编制日期审核日期批准日期年 月 日年 月 日年 月 日修改记录序号 修改页码 条款号 修改内容 修改人 批准人 生效日期文件编号：XSCDC/象山县疾病预防控制中心 第 1 页 共 1 页第 1 版 第 0 次修订丙氨酸氨基转移酶（ALT/GPT）检测细则（北京瑞尔达） 颁布日期： 年 月 日丙氨酸氨基转移酶原理和方法1 原理：
2、L-丙氨酸+a-酮戊二酸 ALT丙酮酸+L-谷氨酸丙酮酸+P+O2 POH2O2+乙酰磷酸H2O2+色原剂 POD红色复合物2 检测步骤a) 工作液配制：根据自己实验室工作量可任意选择下列一种方法配制工作液（1） 用前取 R2 试剂倒入 R1 瓶内混匀，然后小心地将少量 R1 再倒入 R2 瓶内，最后再倒入 R1 瓶内，混匀待用（2） 用前分别取 R1 试剂 2.0 份与 R2 试剂 0.1 份（20：1）比例混匀待用。b) 于 96 孔酶标板上，A1 孔为试剂空白，B1 和 C1 孔为标准，D1 孔为质控，E1-H12 孔为测定。于 A1 孔内家蒸馏水 20ul,B1 和 C1 孔内加校准血
3、清 20ul，D1 孔内加质控血清20ul；E1-H12 孔内分别加受检血清或血浆 20ul，然后各孔加预热至 37C 工作液100ul，混匀，置 37C 恒温箱内反应 15 分钟，再加终止剂 100ul，然后比色测定。主波长用 492nm，次波长用 620 或 630nm，输入试剂空白孔、标准孔、质控孔及测定孔位置；输入校准血清 ALT 浓度，试剂空白孔调零，进行检测吸光度，按计算公式计算或直接打印结果。计算 ALT 活性单位= 测定孔吸光读/标准孔吸光度*校准血清 ALT 浓度文件编号：XSCDC/象山县疾病预防控制中心 第 2 页 共 2 页第 1 版 第 0 次修订丙氨酸氨基转移酶（A
4、LT/GPT）检测细则（北京瑞尔达） 颁布日期： 年 月 日3 结果判断：1、 质量控制：阴性对照介于 0.0-0.15，阳性对照值介于 0.3-1.8，证明实验成立;否则试验结果无效，需要新试验。2、 如阴性对照 A 值平均值=0.07，则按实际值计算。计算 S/N 值，S/N 值=2.1，则为阳性。S/N2.1，为阴性。S/N 值=样品 A值/阴性对照 A 值平均值4 注意事项a) 本品仅用于体外诊断，一次使用。b) 用于本试剂盒的成分均无生物传染性。由于不能保证检测各组份所有的传染性因素，因此本试剂盒应作为具有潜在的传染材料对待，严格按照实验室规范要求进行操作c) 任何临床样品都应作为具有传染性样品对待d) 待检样品及其他潜在感染材料试验后应予以消毒e) 注意避免皮肤或黏膜直接接触试剂或样品
