1、JM109，DH5a ，BL21 感受态的区别 .1：DH5a 菌株DH5a 是一种常用于质粒克隆的菌株。E.coli DH5a 在使用 pUC 系列质粒载体转化时，可与载体编码的 半乳糖苷酶氨基端实现 互补。可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。基因型：F-， 80dlacZM15，(lacZYA-argF)U169，deoR ，recA1 ，endA1 ，hsdR17(rk-，mk+)，phoA，supE44，-，thi-1，gyrA96 ，relA12：BL21(DE3) 菌株该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体 T7 启动子的表达载体（如 pET 系列）的基因。T7 噬菌体 RNA 聚合酶位于
2、噬菌体 DE3 区，该区整合于 BL21 的染色体上。该菌适合表达非毒性蛋白。基因型：F-， ompT， hsdS（rBB-mB），gal， dcm（DE3）3：BL21(DE3) pLysS 菌株该菌株含有质粒 pLysS，因此具有氯霉素抗性。PLysS 含有表达 T7 溶菌酶的基因，能够降低目的基因的背景表达水平，但不干扰目的蛋白的表达。该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。基因型：F-， ompT hsdS（rBB-mB），gal， dcm（DE3，pLysS ，Camr4：JM109 菌株该菌株在使用 pUC 系列质粒载体进行 DNA 转化或用 M13 phage 载体进行转染时，由于载体
3、 DNA 产生的 LacZa 多肽和 JM09 编码的 LacZM15 进行 互补，从而显示 半乳糖苷酶活性，由此很容易鉴别重组体菌株基因型：recA1 ，endA1 ，gyrA96，thi1，hsdR17，supE44，relA1，（lacproAB）/FtraD36，proAB+，lacIq，lacZM15 5：TOP10 菌株该菌株适用于高效的 DNA 克隆和质粒扩增，能保证高拷贝质粒的稳定遗传。基因型：F- ，mcrA(mrr-hsd RMS-mcrBC)， 80 ，lacZM15 ，lac74， recA1 ，ara139(ara-leu)7697， galU ，galK ，rps，
4、 (Strr) endA1， nupG6：HB101 菌株该菌株遗传性能稳定，使用方便，适用于各种基因重组实验基因型：supE44，hsdS20（rB-mB），recA13，ara14，proA2 ，lacY1，galK2，rpsL20，xyl-5，mtl-1，leuB6，thi-1M110 或 SCS110大多数大肠杆菌菌株中含有 Dam 甲基化酶和 Dcm 甲基化酶，前者可以在 GATC 序列中腺嘌呤 N-6 位上引入甲基，后者在 CCA/TGC 序列的第一个胞嘧啶 C-5 位置上引入甲基。 常用的菌株都会产生 dam,dcm，从而受到甲基化的影响 .部分限制性内切酶对甲基化的 DNA 不
5、能切割，如 FbaI 和 MboI 等，一般生物公司提供的内切酶说明中均有说明。大多数酶切位点的甲基化不影响切割，而有些会影响，如 XbaI, BclI 等。而且甲基化只发生在特定序列，以 XbaI 为例，只有在位点序列旁出现 GA 或 TC，该 XbaI 位才会被甲基化。而要解除这种限制修饰作用通常有两种方法：（1 ）选用上述酶的同功酶，如 Sau3AI，DNA 识别切割位点与 MboI 相同；但不受甲基化影响；（2 ）利用甲基化酶缺失的受体细胞进行 DNA 的制备，如 E.coli JM110 和链霉菌等，前者 Dam 和 Dcm 甲基化酶已敲出，而后者细胞内本就没有甲基化酶，从这些细胞中抽提的 DNA 就能被上述酶切割。E.coli JM110要排除 dam,dcm 甲基化的影响，需要用特定的 dam-,dcm-的菌株，如 JM110如果由 JM110 或 SCS110 等甲基化缺失的菌株产生的质粒，则不会被甲基化.
