1、氨 基 酸（amino acid）,2014年9月,（一）氨基酸与蛋白质的关系,氨基酸是蛋白质的构件分子，参与构成蛋白质的氨基酸有20种.蛋白质水解生成氨基酸,酸水解碱水解(发生消旋)酶水解,（二）20种蛋白质氨基酸的结构,1. 氨基酸结构通式,20种蛋白质氨基酸的结构,甘氨酸,丝氨酸,半胱氨酸,丙氨酸,苏氨酸,脂肪族氨基酸,20种蛋白质氨基酸的结构,缬氨酸,亮氨酸,甲硫氨酸,异亮氨酸,20种蛋白质氨基酸的结构,苯丙氨酸,酪氨酸,色氨酸,组氨酸,脯氨酸,20种蛋白质氨基酸的结构,芳香族氨基酸,杂环氨基酸,2. 结构特点 （1）除甘氨酸外都具有旋光性，都是L-型。 手性的表征 D,L +,- R
2、,S （2）脯氨酸是亚氨基酸 （3）氨基酸是酸碱统一体,3.氨基酸的分类（1）根据侧链R基团的化学结构 脂肪族氨基酸：主链是脂肪烃（15种） 芳香族氨基酸：苯丙氨酸 酪氨酸 色氨酸 杂 环 氨基酸: 组氨酸 脯氨酸,（2）脂肪族氨基酸根据R基团的极性分为 非极性氨基酸和极性氨基酸,极性氨基酸,不带电,带 电,（3）从营养学角度根据人体是否能够合成分为必须氨基酸和非必需氨基酸,必需氨基酸 指的是人体自身不能合成或合成速度不能满足人体需要，必须从食物中摄取的氨基酸。 必需氨基酸共有八种：赖氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、缬氨酸。儿童生长必需的还有精氨酸和组氨酸。 记忆口诀
3、：一家写两三本书来（8种）,（4）根据是否参与构成蛋白质分为蛋白质氨基酸和非蛋白质氨基酸 非蛋白质氨基酸 鸟氨酸、瓜氨酸、茶氨酸、 S-腺苷甲硫氨酸、-氨基丁酸、 -氨基丁酸、 D-型氨基酸,4 氨基酸的光学性质,（1）旋 光 性 碳原子；碳原子之外的手性碳原子,（2）紫外吸收 芳香族氨基酸(含有苯环)，在紫外区显示特征的吸收光谱，蛋白质最大光吸收峰在280nm。 因此可以用紫外法测定蛋白质含量。,5. 氨基酸的两性和等电点性质,氨基酸解离的三种情况（1）在酸性条件下，甘氨酸的解离步骤 A+ A0 A-,（2）在酸性条件下，谷氨酸的解离步骤（酸性氨基酸） A+ A0 A- A2-,（3）在酸性
4、条件下，赖氨酸的解离步骤（碱性氨基酸）,A2+ A+ A0 A-,H,等电点 用pI表示，两性电解质所带正负电荷相等时溶液的pH值。,5 氨基酸的光学性质,旋 光 性 碳原子；碳原子之外的手性碳原子,紫外吸收芳香族氨基酸（Trp、Phe、Tyr）有共轭双键系统(含有苯环) ，在紫外区显示特征的吸收光谱，Protein最大光吸收峰在280nm。因此可以用紫外法测定蛋白质含量。,分光光度法定量分析的理论依据Lanbert-Beer定律,6 氨基酸的化学反应,（1）茚三酮反应 茚三酮在弱酸性溶液中与-氨基酸共热，生成蓝紫色物质，最大吸收峰在570nm处。,某aa纸层析茚三酮显色图片,（2）Sange
5、r反应 2,4-二硝基氟苯(DNFB)在弱减溶液中与AA反应生成2,4-二硝基苯基氨基酸，英国的Sanger用这个反应鉴定多肽N-未端的氨基酸,用以测定多肽或蛋白质的AA排序。据此原理设计多肽氨基酸测序仪器。,（3）Edman反应 与苯异硫氰酸酯(PITC)在弱碱条件下形成相应的苯氨基硫甲酰(PTC)衍生物，与酸发生环化生成PTH-aa，这是著名的Edman降解，进行多肽链N-未端氨基酸测定。,（4）与丹磺酰氯(DNS)的反应用以测验多肽链的N-末端。DNS + R-CH-NH2 DNS-AA + HCl,（5） 成肽反应,作 业,1、p49 7、8、9 书面2、名词p49 11,氨 基 酸
6、分 析,分光光度法定量分析的理论依据Lanbert-Beer定律,分光光度计结构,工作曲线（标准线）,吸光值,浓度,核 磁 共 振 波 谱,核磁共振 已取向的原子核被合适频率的电磁辐射照射，则会发生能量吸收，从低能态“自旋反转”成高能态。 化学位移 同一种原子核，由于所处的环境不同（电子云的屏蔽），引起共振频率偏离标准。 化学位移用表示，以四甲基硅（TMS）参考物。 单位ppm,化学位移 同一种原子核，由于所处的环境不同（电子云的屏蔽），引起共振频率偏离标准。 化学位移用表示，以四甲基硅（TMS）参考物。 单位ppm 裂峰，由于原子核之间自旋耦合，使吸收峰分裂。吸收峰的分裂符合 n+1 规律。
7、,做核磁共振波谱适用范围,必须是纯物质或高纯度用于解析部分有机物分子结构,层析法 氨基酸混合物的分析分离,层析法，也叫色谱法 常见类型： 纸层析、薄层层析、柱层析、离子交换层析、气相色谱、液相色谱 层析法一般原理： 不同物质在互不相容的两相，具有不同的分配系数。,Kd=CA/CB CA-固定性中的浓度 CB-流动相中的浓度,分 配 系 数 的 含 义,固定性 流动相,某分子,分配系数 决定于溶质分子的极性、分子形状（构型和构象）和分子量，一般而言不同分子的分配系数是不同的。,纸层析、薄层层析,柱层析,上样液洗脱剂洗出液,离子交换层析,离子交换树脂强酸型阳离子交换树脂 上样 （交换吸附） 洗脱 收集 复性,氨基酸分析仪,气液层析,高效液相色谱法（HPLC）,
