1、成都大学毕业设计（论文）毕业设计（论文）题 目 苹果中原花青素的提取及其抗氧 活性研究苹果中原花青素的提取及其抗氧化活性研究【摘要】：对从苹果中提取原花青素的工艺进行了研究,考察了提取温度、时间、pH 值、料液比以及提取溶剂等因素的影响,在单因素试验的基础上,通过正交试验筛选出最佳的提取工艺条件,即以 80%的乙醇为溶剂、料液比为 110、pH 值为 6.0、提取温度 80、浸提 3次、每次浸提 120min,在此条件下,原花青素的得率为 0.116%。在抗氧化试验中,以 Vc 做对照,结果表明,原花青素具有很强的抗氧化活性。以富士苹果为试验材料,邻苯二酚为底物,对多酚氧化酶(polyphen
2、ol oxidase,PPO)的提取条件及特性进行了研究。结果表明,富士苹果PPO 的最佳提取条件为 pH 值 5.4 的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液 (含 20g.L-1 的 PVPP 和 2.5 g.L-1Triton X-100)、液料比 1.5 mL.g-1;PPO 的最适温度为 30,最适 pH 值为 4.0。单独使用对 PPO 活性抑制能力最强的是 L-半胱氨酸,其次是抗坏血酸,草酸和柠檬酸抑制能力较弱。复合抑制剂的最优组合为 0.900 g.L-1 抗坏血酸、5.000 g.L-1 柠檬酸、3.750 g.L-1 草酸、1.000 g.L-1L-半胱氨酸,对 PPO 的抑制率达 97
3、.83%。【关键词】： 苹果；原花青素；提取；抗氧化活性Extraction of apple procyanidins and their antioxidativeactivityAbstract: The extraction of procyanidins from apple process has been studied, examined the extraction temperature, time, pH, solid-liquid ratio as well as the 成都大学毕业设计（论文）extraction solvent and other factors,
4、 in the single-factor test, based on the screening by orthogonal the optimal extraction conditions, that is 80% ethanol as solvent, solid-liquid ratio of 1:10, pH value of 6.0, extraction temperature 80 , extracted three times, each time extracting 120min, in this condition the original anthocyanins
5、 yield of 0.116%. In anti-oxidation tests, in order to Vc as controls, results showed that the proanthocyanidins have a strong antioxidant activity. With Fuji apple as experimental material, catechol as the substrate for polyphenol oxidase (polyphenol oxidase, PPO) extraction conditions and properti
6、es were studied. The results showed that Fuji apple PPO extract the best conditions for pH value of 5.4, disodium hydrogen phosphate - citric acid buffer (including 20g.L-1 of PVPP and 2.5 gL-1Triton X-100), liquid feed ratio 1.5 mL . g-1; PPO optimum temperature is 30 , optimum pH value of 4.0. Use
7、d alone inhibited the ability of PPO activity is the strongest L-cysteine, followed by ascorbic acid, oxalic acid and citric acid suppression capability is weak. The optimal combination of compound inhibitor 0.900 gL-1 ascorbic acid, 5.000 gL-1 citric acid, 3.750 gL-1 oxalic acid, 1.000 gL-1L-cystei
8、ne, the inhibition of PPO rate of 97.83%. Key words: apple extract the antioxidant activity of procyanidin目 录前言 11 苹果中原花青素的检测方法 21.1 原理 21.2 仪器与试剂 21.3 分析方法 32 苹果中原花青素提取工艺的研究4成都大学毕业设计（论文）2.1 仪器与材料 42.2 实验方法 4 2.3 实验结果与分析 43 原花青素的抗氧化性研究53.1 原花青素抗氧化性与结构的关系 53.2 原花青素在体内的吸收代谢 53.3 原花青素抗氧化性的药理作用 6结论 7致谢
9、7参考文献 8前 言原花青素（英文：Proanthocyanidins）是一类黄烷醇单体及其聚合体的多酚化合物。其共同的特点是在酸性介质中加热均可产生花青素（Anthocyanidins），故被称为原花青素。原花青素是植物中一种色素成分，广泛存在于各种植物中。结构在结构上，原花青素是由不同数量的儿茶素（catechin）或表儿茶素（epicatechin）结合而成。最简单的原花青素是儿茶素、或表儿茶素、或儿茶素与表儿茶素形成的二聚体，此外还有三聚体、四聚体等直至十聚体。按聚合度的大小，通常将二五聚体称为低聚体（简称 OPC），将五聚体以上的称为高聚体（简称 PPC）。应用成都大学毕业设计（论文
10、）在各类原花青素中，低聚体分布最广，更具抗氧化和自由基清除能力的生理活性，是最重要的一类原花青素。国内外以葡萄籽中原花青素作为主要活性成分的药品及保健食品开发较多。目前对原花青素中低聚体与高聚体的分类及测定方法仍没有统一的标准。1 苹果中原花青素的检测方法1.1 原理 苹果原花青素是由不同数目的儿茶素或表儿茶素结合而成。最简单的结构是儿茶素、表儿茶素或儿茶素与表儿茶素形成的二聚体，此外还有三聚体、四聚体等直至十聚体。按聚合度的大小，通常将二至四聚体的称为低聚体（oligomeric proantho cyanidins，简称OPCs），将五聚体以上的称为高聚体（procyanidolic po
11、lymers，简称 PPC）。二聚体中，因两个单体的构象或键合位置不同，可有多种异构体，已分离鉴别的 8 种结构形式分别命名为 B1B8，其中 B1B4 是由 C4C8 键合，B5B8 由 C4C6 键合。在各类葡萄原花青素中，二聚体分布最广，研究最多，是最重要的一类苹果原花青素。而且苹果原花青素在热酸条件下可醇解产生花色素。李春阳等2利用 LCMS 对苹果花色素进行分析测定，确定为矢车菊素，从而证明苹果原花青素主要结构单元为原花青定，即其 B 环上含有两个羟基。1.2 仪器与试剂紫外分光光度法 BateSmith 法3 此法是利用原花青素在酸性条件下加热转化为红色的原理，测定的只是苹果籽提取
12、物中原花青素的相对值，其含量用原花青素指数(procyanidolic index)来表示，指数一般在 80100 之间,有时也可能大于 100。这种方法测定的结果重现性很差,并且原花青素在此条件下反应不是很彻底。Porter 法 基于 BateSmith 法的缺点，Porter 等人对其进行了改进。Porter 法改进之处主要是在试剂中添加了 Fe3+，以提高反应的程度和颜色的稳定性，此方法测定的也是原花青素的相对含量，结果用 PVU(porter value unit)表示。这两种方法，因为没有对照品，测得的只是相对值，不能直接反映原花青素的含量。美国葡萄籽方法评定委员会认为这两种方法不能
13、作为葡萄籽提取物中总多酚或原花青素的定量分析方法。钼酸铵分光光度法 钼酸铵分光光度法是基于原花青素中邻苯二酚与钼酸铵在弱酸性介质中反应生成黄色钼酸酯，此方法也用于茶多酚的含量测定6。反应产物在 333 nm 波长处具有最大吸收。该方法的线性范围为 5110 g/mL，RSD 为 1.1 %1.3 %，回收率为97.8 %102.5 %，相关系数 r=0.9995，检出限为 2.7 g/mL。研究发现钼酸酯在酸性条件成都大学毕业设计（论文）下(pH 值 25)最易生成且能稳定存在，溶液的吸光度大。随着 pH 值的升高，溶液颜色逐渐变浅，吸光度逐渐减小，这是由于随着 pH 值的增大，溶液中 OH-
14、离子浓度增加，加速了钼酸酯的水解。硫酸高铈铵分光光度法 原理是原花青素与 Ce4+在强酸性介质中反应生成无色的Ce3+，通过测定黄色高铈盐的吸光度，间接测定原花青素，Ce4+ 在 319 nm 波长处具有最大吸收，原花青素在 0.1210 g/mL 范围内符合比尔定律，已用于实际样品的测定。高铁盐铁氰化钾分光光度法8以原花青素为标准品，待原花青素将 Fe3+ 还原成 Fe2+后，Fe2+与铁氰化钾生成可溶性蓝色配合物 KFeFe(CN)6，在 710 nm 处有最大吸收，原花青素浓度在 0.1 10 g/mL 范围内与吸光度值呈线性相关（r=0.9998），回收率为 95.4 %102.5 %
15、，RSD 值为 1.1 %1.3 %。实验考察了酸度、温度、试剂用量、反应时间对反应的影响，表明随着 pH 值的增大，吸光值逐渐增大，当 pH 值在 24 之间，吸光度值大而稳定。在室温条件下反应 1 h 就可以，当反应温度高于 35 时，出现滕氏蓝沉淀。本方法具有简单、快速、灵敏等优点，可方便用于苹果提取物中原花青素含量测定。1.3 分析方法电化学方法16利用原花青素的抗氧化力测定原花青素含量的电化学新方法，其原理是在pH=8.33 的 TrisHCI-邻苯三酚体系中，加入原花青素后，邻苯三酚于0.96 V(vs.SCE)处的还原峰电流减小，且峰电流的减小量与原花青素加入量在 10100 g
16、/mL 范围内呈线性相关，检出限为 4 g/mL。之后，韩志萍等 17采用线性扫描极谱法和循环伏安法测定原花青素。其原理是在碱性硼砂底液中，原花青素与 Zn()在( 1.020.02V)(vs.SCE)电位处产生灵敏络合吸附波，其峰电流 IP 与原花青素在 40200 mg/L 范围内呈良好的线性关系，该方法的检出限为 25 mg/L。卢翠英 18首次建立了流动注射抑制化学发光测定葡萄籽提取物中原花青素的含量。此方法是基于在碱性条件下，原花青素对 H2O2Luminol 体系有显著的抑制作用，结合反相流动注射技术，原花青素质量浓度在 0.220.0 mg/L 范围与相对发光强度呈线性关系，检出
17、限为 0.1 mg/L，采样频率为 140 次/h，对 10.0 mg/L 的原花青素平行测定 11 次，其 RSD 为 1.2 %，回收率为 97 %103 %。该类方法具有操作简单、快速、灵敏度高和线性范围宽等优点，用于保健品的测定，结果令人满意。2.5 高效液相法（HPLC）19-20HPLC 测定结果准确，而且能够测定出各个聚合物及不同异构体的含量。但测定所需的各个单体不易得到，只能自行纯化制备，各异构体之间分离不完全，且分析时间长，一般超过 60 min，所以限制了 HPLC 的普及。有人用HPLC 和 FolinCiocalteau 法21 相结合的方法分析了葡萄籽提取物中原花青素
18、的百分含量。由于葡萄籽提取物是由原花青素和几种单体组成的，因此葡萄籽提取物中原花青素的含量可由葡萄籽提取物中总多酚的含量减出其中单体的含量求得。总多酚的含量可以采用FolinCiocalteau 法测定,单体的含量采用高效液相(HPLC) 测定。此方法能够弥补BateSmith 法和 Porter 法只能测定原花青素相对含量的缺陷。成都大学毕业设计（论文）2.6 毛细管电泳法22毛细管电泳法（CE），又称高效毛细管电泳法（HPCE），它是以高电压电场为驱动动力，以毛细管为分离通道，依据样品中各组分之间运动速度和分配系数的不同而实现分离的一类液相分离技术。毛细管电泳分离、分析葡萄原花青素，是用硼
19、酸盐缓冲液使大量同分异构体和不同聚合度的原花青素分离，各带电粒子以柱塞状向前推移，通过检测器检测，得到电泳图谱。当硼砂磷酸盐缓冲液 pH= 9，浓度为 80 mmol/L 时，原花青素混合物的分离度和分离效果最好。通过解聚反应，将高聚体原花青素降解，原花青素的电泳分离效果得到明显改善，在 20 mmol/L 的硼砂磷酸盐缓冲液中也能得到良好的电泳图谱。与 HPLC 相比，毛细管电泳具有分析时间短、分离度好、成本低的优点，值得采用。2 苹果中原花青素提取工艺的研究2.1 仪器与材料 原花青索能与醋酸铜发生络合反应，生成难溶于水的棕黄色沉淀，经离心分离后，用原子吸收法测定上清液中过量的铜离子，可间
20、接测定原花青素的含量。方法线性范围为30 300 mgL；RSD 为 1112 ；回收率为 989102 O。 2.2 实验方法 按液料比为 3： 1 加入 80乙醇（ pH5)，并在 90下提取 3 次，每次提取 90min 时对原花青素的提取效果最佳，苹果原花青素的提取率达 956 。移取一定量的原花青素标准使用液于 10 mL 离心试管中，加 1 mL 1 gL 的醋酸铜溶液，用水稀释至刻度，充分混匀，在 8O 水浴中反应 25 rain，冷至室温后离心分离，小心吸取上清液 2 mL 于 10 mL比色管中，用水稀释至刻度，以水为空白，喷人空气-乙炔火焰，测定其吸光度(324.7nm )
21、。2.3 实验结果与分析 1 反应温度的影响：取 lmL 原花青素标准使用液，按实验方法在 2O 一 100T：范围内进行实验，测定其吸光度。结果表明，在 2O 一 85范围内，随着温度的升高，沉淀增多，吸光度值逐渐减小；当温度在 7585 范围内。A 值小而稳定，说明此时沉淀最多，反应比较完全；当温度超过 85时，随着温度的升高，沉淀逐渐减少，吸光度值逐渐增大。成都大学毕业设计（论文）因此，实验选择反应温度为 80。2 反应时间的影响：取 l mL 原花青素标准使用液，按实验方法操作，在 8O水浴中反应不同的时间，测定其吸光度。结果表明，反应时间 20 min 以后，吸光度值趋于稳定。实验选
22、用反应时间为 25 min。3 溶液 pH 值的影响：取 l mL 原花青素标准使用液，在不同 pH 值条件下，按实验方法进行实验。结果如图 1 所示。溶液 pH 在 57 范围内，A 值小而稳定，说明此时沉淀最多，反应比较完全。当 pH7 以后，溶液成碱性，铜盐水解生成氢氧化铜沉淀，使测定结果偏高。实验还考察了水和 01 molmL柠檬酸钠-NaOH 、硼酸硼砂、邻苯二甲酸氢钾-NaOH 及醋酸醋酸钠 4 种缓冲体系，以在水为反应介质条件下的吸光度值小而稳定，这是因为后 4 种缓冲溶液中的有机酸部分对铜离子有络合作用，对沉淀的形成有影响。因此本实验选择水为反应介质。4 试剂用量的影响：醋酸铜
23、溶液的用量对测定结果有一定的影响。本实验选用不同量的铜试剂进行实验。结果表明：沉淀剂用量太少，沉淀不易生成；用量太多，造成标准曲线弯曲，且本实验图 I 溶液 pH 值对反应的影响是测定上清液中 Cu 的剩余量，Cu 用量过多，将增加稀释步骤。综合考虑，本实验选用 1 L 的醋酸铜溶液 l mL。5 千扰物质的影响：经原花青素内含物纯品验证：在原花青素标准使用液中分别加入同倍于原花青素的淀粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁、滑石粉溶液，2 倍的羟甲基纤维素、糊精，对测定无影响；而同倍的氨基酸对测定有干扰，但在一般情况下，原花青素中氨基酸含量比较少。3 原花青素的抗氧化性研究3.1 原花青素抗氧化性与结构的关
24、系 原花青素之所以表现很强的抗氧化作用，由于 B 环上具有相邻二酚羟基广泛的电子非定域化，使得相应的氧化形式另外获得稳定状态。另外，在其高分子结构中，几个与 O 原子邻位的二羟酚基使得原花青素充分与金属离子(Fe(III)， Cu(II)，Al(III)及蛋白结合，络合作用的贡献在于阻止了催化自由基反应的金属离子的活性，这是原花青素具有营养和生物学价值的主要特征1。黄烷间的连接类型(C4 与 C6 结合，C4 与 C8 结合)对原花青素捕获自由基抗氧化有很大影响，提示原花青素在水溶液中所采取的构象不同影响了它们的亲水特性，因而影响成都大学毕业设计（论文）了它们与水相和脂质相中过氧化氢的相互作用
25、2。二聚体中，因两个单体的构象或键结合位置的不同，可有多种异构体，已分离鉴定的 8 种结构形式分别命名为 B1B8 ，其中，B1B4 是由 C4C8 键合，B5B8 由 C4C6 键合。Faria 等3 通过监测耗氧量和测量共轭双烯的形成评价原花青素 5 种不同结构成分(单体，直到五聚体) 的抗氧化能力，被实验的成分都能通过增加氧化作用的诱导时间来保护细胞膜对抗过氧化氢自由基的损害。这种作用效果呈增加趋势，直到二聚体作用最强，之后可能由于空间位阻现象的存在，随着结构复杂性的增加抗氧化作用降低。而 Silva 等2通过研究低聚原花青素抗氧化性能3.2 原花青素在体内的吸收代谢原花青素在营养学中备
26、受关注，尤其在西方饮食中，因为它占人们摄入酮类中的一大部分，对人体健康很有帮助。然而人们仍不是很清楚在体内发挥有益作用的究竟是原花青素的单体、低聚体，还是肠道微生物的芳香族酸的衍生物。围绕这个争论，Garcia 等4用一种合成的低聚原花青素(包含由乙基桥联的表儿茶素单位) 喂养雄性 Wistar 大鼠(200 mg/kg体重)，这种合成的原花青素(synthetic PC ，SPC)还包括二聚体、三聚体、四聚体。食入1h 后，在血浆中检测出四甲基化二聚体原花青素(TDPC)，食用 2h 后，血浆中达最高浓度(14 mg/L)，同时肝脏中每克组织中也含有 15 mug 的 TDPC。研究表明，口
27、服二聚体原花青素能很快吸收，并在体内甲基化。该实验是首次在血浆和肝脏中检测出甲基化的二聚体原花青素。Garcia 等认为，血浆和肝脏中的 TDPC 发挥了激素样效应，且在原花青素和富含原花青素的食物中，原花青素二聚体是最佳的生物活性物质。在 Shoji 等5 分析苹果原花青素的吸收情况时也证实了原花青素低聚体能很快被大鼠吸收，直接参与体内的生理功能，且多聚体原花青素影响低聚体的吸收。Tsang 等6将葡萄籽提取物包括儿茶素、表儿茶素，原花青素的二聚体、三聚体、四聚体和多聚体喂养大鼠，24h 后检测肝、肾、脑和胃肠道以及收集血浆、尿和排泄物，高效液相色谱法分析它们的黄烷-3-醇含量。食入 1h
28、后，少量的黄烷 -3-醇从胃排空到十二指肠，很大程度地到达回肠，2h 后进入盲肠，3h 后有相对较少量的被检测到进入结肠。胃肠道，以及胃肠外的葡萄籽提取物黄烷-3-醇和仅能示踪的原花青素，还不能证明原花青素是在胃肠道解聚释放出黄烷-3-醇。特别是在血浆中含有较多的儿茶素葡糖苷酸和甲基化葡糖苷酸代谢产物，在肝、肾中也检测到这些物资，尿液中也表现有这些物资以及硫酸盐代谢物，和少量原花青素二聚体 B1， B2， B3 和 B4，以及三聚体 C2 和未知的原花青素三聚体。24h 后在尿液中检测出的儿茶素和表儿茶素代谢物的量分别是摄入单体量的 27% 和 36 %，此水平与其他研究者报告的结果也相一致，
29、该结果显示，葡萄籽提取物中的原花青素低聚物食入后在任何程度上没有解聚成单体形式。还没有充分的分析数据能证明在脑中有黄烷-3-醇代谢物存在。3.3 原花青素抗氧化性的药理作用 成都大学毕业设计（论文）原花青素可提供猝灭多种活性氧自由基所需要的氢(H)，对能引起生物组织膜因发生过氧化作用而导致结构和功能损伤的羟(OH)自由基等有明显的清除作用，从而起到对生物器官的保护作用。3.1 抗脂质过氧化和清除自由基作用 许多研究证明，原花青素具有很强的抗氧化活性，是一种很好的氧自由基清除剂和脂质过氧化抑制剂。Bagchi 等7用小鼠进行体内实验，用葡萄籽提取物原花青素、VC、VE 琥珀酸盐(VES),- 胡
30、萝卜素对 TPA(12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate ，12-O-十四烷酰佛波醇-13-醋酸盐)诱导的肝、脑组织中脂质过氧化的保护作用进行了比较，发现在 100 mg/kg BW 剂量下原花青素、VC 、VES、-胡萝卜素均可降低 TPA 诱导产生的活性氧簇，使用腹腔巨噬细胞发光法降低率分别为70 、18 、47和 16 ，使用细胞色素还原法降低率分别为 65 、15 、37 和 19 ，同时还发现原花青素对于抑制 TPA 诱导的脂质过氧化反应以及腹腔巨噬细胞活性氧的产生，具有剂量反应关系。结果表明，葡萄籽提取物原花青素可对氧化损伤起到保护作用，且保护作用
31、优于其它抗氧化剂。此外，Bagchi 等8的体外试验也获得了相似的结果。我们分别使用化学发光法和细胞色素 C 还原法测定了葡萄籽提取物原花青素、VC、VE 清除超氧阴离子自由基和羟基自由基的能力。结果表明，原花青素对自由基的抑制具有浓度反应关系，在 100mg/L 的浓度时，原花青素对超氧化阴离子和羟基自由基的抑制能力分别为 78和 81 ；同等条件下，VC 抑制上述两种自由基的能力分别为 12和19 ，VE 为 50 和 75 ，说明原花青素是一种比 VC、VE 更强的自由基清除剂。Simonetti 等9 评价体外补充葡萄籽提取物原花青素对有氧化应激者的影响，10 名健康自愿者每日口服 1
32、10mg 原花青素 30d，服用前后抽取静脉血，比较发现，总抗氧化能力以及血浆中 -生育酚浓度没有改变，而红细胞膜中 -生育酚浓度从 1.80.1 增加到 2.80.2 mg/g，DNA 被氧化的淋巴细胞从 7.232.47 减少到 2.340.51，并且红细胞膜中脂肪酸的构成变为高水平的不饱和脂肪酸。结果表明，服用原花青素可发挥在体内的抗氧化保护作用，可节约体内脂溶性维生素 E，减少淋巴细胞 DNA 的氧化损伤。Nuttall 等10 通过临床研究葡萄籽提取物原花青素对血浆总抗氧化能力(TAC)、 VC、VE 水平的影响，对 20 位自愿者采取随机单盲、安慰剂对照研究，让受试者服用含 300
33、mg 原花青素的胶囊 2 颗或安慰剂连续 5d，5d 后采集血样，间隔至少 2wk 后重复研究。结果显示，血浆中 VC、VE 的含量没有变化，而 TAC 水平提高，第 5d 时，TAC 从 408.122.9 提高到 453.3453.3。研究表明，葡萄籽提取物原花青素能提高血浆 TAC，但其临床应用还需进一步随机实验研究。3.2 保护细胞作用 许多原发性、进展性退行性疾病被认为与过度的过氧化反应有关，Zhu 等11 研究了从可可提取物儿茶素、表儿茶素、原花青素低聚物对自由基引起的小鼠红细胞溶血的影响，体外研究发现，儿茶素、表儿茶素、原花青素低聚物在 2.540mol/L 时存在剂量依赖性保护
34、作用，其中二聚体、三聚体、四聚体表现出最强的抑制作用：10mol/L 时，对溶血抑制率分别是 59.4%， 66.2%， 70.9%；20 mol/L 时，84.1%， 87.6%， 81.0%； 40mol/L 时，90.2%， 88.9%， 78.6%。之后进一步研究，A 组：用100mg 原花青素给小鼠灌胃； B 组：对照组，灌生理盐水。测血浆总抗氧化能力，发现 A组灌胃后 30240min 时血浆抗氧化能力明显提高 (P 0.05)，红细胞抗溶血能力增强(P 0.05)。同时将 A 组小鼠的红细胞与 B 组小鼠的血浆混和，发现 A 组小鼠红细胞的抗溶血成都大学毕业设计（论文）能力增强；
35、将 A 组小鼠的血浆与 B 组小鼠的红细胞混合，发现 B 组小鼠的红细胞抗溶血能力也增强。结果表明，可提取物儿茶素、表儿茶素、原花青素低聚物具有很强的细胞膜保护作用。结 论原花青素抗氧化的生物学作用，与人类的生活和健康密切相关，在营养、医药、保健等领域具有重要的应用价值。因此，我们应充分利用我国的植物资源，如葡萄、甘薯、山楂、银杏、大黄、莲房等，结合我国传统中医药技术，开发出适宜又有功效的原花青素产品，为临床治疗氧化损伤性疾病提供新的思路。致 谢感谢老师耐心、细致的给予本文多次的修改指正！感谢对本文的成文、修改提出过宝贵意见，有过帮助的所有同学！ 参考文献：1 苹果中原花青素的提取及其抗氧化活
36、性研究 - 食品科技 - 吴琼英 周卫靖 2 苹果中原花青素的提取分离研究 - 中国食品学报 - 戚向阳 陈维军 等 3 高粱种子外种皮中原花青素提取、纯化及其抗氧化活性的研究 - 中国粮油学报 - 刘睿 谢笔钧 潘思轶 刘卫兵 4 葡萄籽原花青素的分离纯化及其抗氧化活性研究 - 中国食物与营养 - 朱靖蓉,王忠民,李瑾瑜,马兴旺, 5 原花青素的抗氧化活性研究 - 哈尔滨商业大学学报：自然科学版 - 吴春 陆海燕 代丽君 刘涛 6 山楂原花青素的抗氧化活性研究 - 食品与发酵工业 - 金宁 刘通讯 7 洋葱多糖的提取及其抗氧化活性研究 - 食品与发酵工业 - 张强 牟雪姣 周正义 王松华王明亮. 关于中国学术期刊标准化数据库系统工程的进展 EB/. http:/ 海产品中抗氧化物的提取及其抗氧化活性研究 - 青岛大学学报：工程技术版 - 张希琴
