1、ABI 7500 FAST荧光定量PCR仪简明操作规程1. 双击桌面图标 ,或从 Start All Programs Applied Biosystems 7500 Software 7500 V2.0 开启软件。进入主界面后选择Advanced Setup 。2. 默认进入 Setup 下的Experiment Properties 界面2.1 输入实验名称 (Experiment Name)2.2 确认仪器型号2.3 在实验类型中,选择 Quantitation-Comparative CT (CT) 2.4 选择试剂种类 2.5 确认运行模式 3. 进入 Setup 下的Plate S
2、etup 界面,编辑基因(Target)及样本(Sample);3.1 在“define targets and samples”界面中设置基因3.2 在“assign targets and samples”中进行样品板的排布。4. 在“Select relative quantitation setting”中设置内参基因及对照样本。 5. 进入 Run Method 界面,设定反应条件及反应体积。 6. 点击“save”按钮,文件储存成 Experiment Document Single Files (*.eds)格式,然后在 Run 界面按下按钮,反应即开始进行。 7. 实验结束后,
3、点击界面右上角的 Analyze 按钮,软件将会显示实验结果: 7.1 在扩增图中(见上图),可通过更改Plot Settings 来改变扩增图的显示方式。如果想查看阈值线或基线,请将Threshold 及Baseline 打勾。7.2 查看相对表达量结果时,利用Plot Settings 选项,可以以不同方式显示相对表达量的结果。 7.3 对于 SYBR Green 法实验,可以在Melt Curve 界面中查看熔解曲线。7.4 检测 QC Summary 结果,可以快速查看实验中是否有反应孔存在异常情况。黄色三角形中的数字1 代表有一种异常情况,2 代表有两种异常情况,以次类推。详细信息及解决方案可以在Flag Details 中看到。8. 分析之后的结果,可以利用菜单中的FileExport 功能,导出Excel 格式的结果。若想存储图片结果,可直接在图片上单击鼠标右键,选择Save as,存成JPEG格式的图片。使用注意事项1. 本设备必须使用规格为100 uL的八连管或者96孔反应板;2. 加样操作时请戴手套,保持八连管或者96孔反应板盖部清洁,以免影响荧光读取;3. 实验数据请使用实验中心专用优盘拷贝,请勿私自使用个人优盘拷贝。