1、1课时跟踪检测（四十一） DNA 的粗提取与鉴定一、选择题1鉴定 DNA的试剂是( )A斐林试剂 B苏丹染液C双缩脲试剂 D二苯胺试剂解析：选 D 鉴定 DNA用的试剂是二苯胺，苏丹染液用于鉴定脂肪，斐林试剂用于鉴定可溶性还原糖，双缩脲试剂用于鉴定蛋白质。2在提取 DNA的过程中，最好使用塑料试管和烧杯，目的是( )A不易破碎 B减少提取过程中 DNA的损失C增加 DNA的含量 D容易刷洗解析：选 B DNA 易被玻璃器皿吸附，使用塑料试管和烧杯，可以减少 DNA的损失。3(2018海安期中)在生物实验中，可以根据与某些化学试剂所产生的颜色反应，检测生物组织中的有关有机化合物的存在。下列实验内
2、容正确的是( )A检测成分：还原糖。检测试剂：斐林试剂。部分实验步骤：甲、乙液等量混匀后，注入待测组织样液中，颜色变化：砖红色B检测成分：脂肪。检测试剂：苏丹染液。部分实验步骤：将花生子叶切片染色后，制成临时装片，在显微镜下观察，颜色变化：橘黄色C检测成分：蛋白质。检测试剂：双缩脲试剂。部分实验步骤：A、B 液混匀后，注入待测组织样液中，并进行隔水加热，颜色变化：紫色D检测成分：DNA。检测试剂：二苯胺试剂。部分实验步骤：将提取的含杂质较少的DNA丝状物再溶解，加入二苯胺混匀后，进行沸水浴 5 min，颜色变化：蓝色解析：选 D 还原性糖的鉴定还需要水浴加热；将花生子叶切片用苏丹染液染色，用酒
3、精洗去浮色后制成临时装片，在显微镜下观察呈现橘黄色；双缩脲试剂鉴定蛋白质时，先加双缩脲试剂 A(0.1 g/mL NaOH浓度)，再加入双缩脲试剂 B(0.05 g/mL CuSO4)，摇匀后成紫色，不需要水浴加热；将提取的含杂质较少的 DNA丝状物再溶解于 2 mol/L的 NaCl溶液中，加入二苯胺混匀后，进行沸水浴加热 5 min，呈现蓝色。4下列有关 DNA的粗提取与鉴定实验的叙述，正确的是( )A取材：鸡血细胞。原因：有细胞核，其他动物的血细胞都没有细胞核B粗提取：不同浓度的 NaCl溶液。原因：DNA 在其中的溶解度不同C提纯：95%的冷酒精。原因：DNA 溶于酒精，蛋白质等杂质不
4、溶于酒精D鉴定：二苯胺试剂。原因：DNA 溶液加入二苯胺试剂即呈蓝色解析：选 B 除了哺乳动物成熟的红细胞，其他动物的血细胞都有细胞核。DNA 在不同浓度的 NaCl溶液中的溶解度不同，从而粗提取 DNA。DNA 不溶于酒精，蛋白质等杂质溶于2酒精，进而提纯 DNA。DNA 溶液加入二苯胺试剂后需沸水浴加热才会呈蓝色。5(2018常州一模)在 DNA粗提取与鉴定实验中，将获得的含有 DNA的黏稠物分别按下表处理 3次，则 DNA主要集中在标号( )操作 黏稠物 滤液2 molL1 的 NaCl溶液搅拌过滤 0.14 molL1 的 NaCl溶液搅拌过滤 95%的冷酒精搅拌过滤 A. BC D解
5、析：选 B DNA 在 2 molL1 的 NaCl溶液中溶解度大，过滤后 DNA存在于滤液中；DNA在 0.14 molL1 的 NaCl溶液中溶解度低，搅拌过滤后存在于黏稠物中；DNA 不溶于95%的冷酒精，搅拌过滤后存在于黏稠物中。6(2018南通一模)如图是“DNA 粗提取与鉴定”实验中的两个操作步骤示意图，下列相关叙述正确的是( )A图 1中溶液 a是 0.14 molL1 的 NaCl溶液B图 1所示操作的原理是 DNA能溶于酒精，而蛋白质等杂质不溶C图 2所示实验操作中有一处明显错误，可能导致试管 2中蓝色变化不明显D图 2试管 1的作用是证明 2 molL1 NaCl溶液遇二苯
6、胺出现蓝色解析：选 C 图 1中是将丝状物溶解，溶液 a是 2 molL1 的 NaCl溶液；加入冷却的酒精的目的是除杂，原理是 DNA不溶于冷酒精，而杂质蛋白能溶于酒精；图 2操作中的错误是试管 2中未将 DNA溶于 2 molL1 的 NaCl溶液中，可能导致试管 2蓝色变化不明显；图 2试管 1的作用是证明 2 molL1 NaCl溶液遇二苯胺不会出现蓝色。7(2018南京一模)下列有关用鸡血进行 DNA粗提取和鉴定实验的操作，错误的是( )A鸡血细胞中加入蒸馏水后，用玻璃棒搅拌B用蛋白酶纯化溶解于 2 molL1 NaCl溶液中的 DNAC在溶有 DNA的滤液中加入体积分数为 95%的
7、冷酒精可析出 DNAD将卷在玻璃棒上的丝状物加入 4 mL二苯胺试剂中，沸水浴加热，冷却后观察解析：选 D 卷在玻璃棒上的丝状物(DNA)首先溶于 2 molL1 NaCl溶液中，然后再3加 4 mL二苯胺试剂，沸水浴加热，冷却后观察颜色变化。8下列关于 DNA粗提取和鉴定实验的叙述，正确的是( )A加入预冷的体积分数为 95%的酒精后用玻璃棒要轻缓搅拌B调节 NaCl溶液物质的量浓度至 0.14 molL1 ，过滤后取滤液进行后续步骤的操作C在剪碎的植物中加入洗涤剂后用力进行快速、充分地研磨D向溶有 DNA的 NaCl溶液中加入适量二苯胺试剂后溶液即呈蓝色解析：选 A DNA 在 0.14
8、molL1 的 NaCl溶液中溶解度最低，过滤后取纱布上的黏稠物进行后续步骤的操作；用植物材料提取 DNA时要加入食盐和洗涤剂，前者是溶解DNA，后者是破坏细胞膜；向溶有 DNA的 NaCl溶液中加入适量二苯胺试剂，然后要沸水浴加热，最后才可观察到溶液呈蓝色。9(2018苏州期初)如图为“DNA 的粗提取与鉴定”实验中部分操作步骤示意图，下列有关叙述正确的是( )ADNA 在常温下遇到二苯胺会被染成蓝色B图中加入蒸馏水的目的是稀释盐溶液使 DNA析出CDNA 在 2 mol/L的盐溶液中溶解度比较小D加入酒精后需用玻璃棒快速来回搅拌解析：选 B DNA 溶液加入二苯胺试剂，在沸水浴加热的条件下
9、会变蓝；在 DNA浓盐溶液中加入蒸馏水的目的是稀释盐溶液，降低 DNA的溶解度，使 DNA析出；DNA 在 2 mol/L的盐溶液中溶解度比较大；加入酒精后需用玻璃棒搅拌，动作要轻缓，以免加剧 DNA分子断裂，导致 DNA分子不能形成絮状沉淀。10若从植物细胞中提取 DNA，发现实验效果不好，如看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定时不显示颜色反应等，其不可能的原因是( )A植物细胞中 DNA含量低 B研磨不充分C过滤不充分 D95%冷酒精的量过少解析：选 A 研磨不充分、过滤不充分均会使细胞核内的 DNA释放不完全，提取的 DNA量变少；若用于沉淀 DNA的酒精量过少，也会导致 DNA的沉淀量变少。
10、11 “DNA粗提取”实验中，应尽可能避免 DNA断裂和降解。下列相关操作正确的是( )A以菜花为材料进行研磨时，可以适当加热以促进 DNA溶解B向 DNA溶液中迅速加入蒸馏水，使 DNA快速析出4C将丝状物溶解到 2 molL1 NaCl溶液中后，加水析出D向 DNA溶液中加入冷却的酒精并沿同一方向缓慢搅拌解析：选 D 以菜花为材料进行研磨时要加洗涤剂和食盐，不能加热，否则 DNA水解酶活性会上升，会加速分解 DNA；向 DNA溶液中加蒸馏水要缓慢，使 DNA充分析出；将丝状物溶解到 2 molL1 NaCl溶液中的目的是为了进行鉴定，应该加入二苯胺试剂，不是加水；向 DNA溶液中加入冷酒精
11、并沿同一方向缓慢搅拌析出 DNA，防止 DNA断裂。12(2017苏北四市三模，多选)在利用鸡血进行“DNA 的粗提取与鉴定”的实验中，下列叙述错误的是( )A用蒸馏水将 NaCl溶液浓度调至 0.14 molL1 ，去除析出物B调节 NaCl溶液浓度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部分杂质C将丝状物溶解在 2 molL1 NaCl溶液中，加入二苯胺试剂即呈蓝色D由于 DNA对高温耐受性较差，故需向 DNA滤液中加入冷酒精解析：选 ACD 用蒸馏水将 NaCl溶液浓度调至 0.14 molL1 ，过滤去除溶液中的杂质，取出析出物。调节 NaCl溶液浓度可以去除与 DNA溶解度不同的杂质；加入木瓜蛋
12、白酶可以去除蛋白质类杂质。将丝状物溶解在 2 molL1 NaCl溶液中，加入二苯胺试剂沸水浴 5 min，冷却后呈蓝色。由于 DNA不溶于酒精，某些蛋白质溶于酒精，故需向 DNA滤液中加入冷酒精提纯 DNA。13(多选)下列有关“DNA 粗提取与鉴定”实验的叙述，正确的是( )A新鲜猪血、菜花等动植物材料均可用于 DNA的粗提取B植物材料需先用洗涤剂破坏细胞壁再吸水涨破CDNA 不溶于 95%的冷酒精而溶于 2 molL1 的 NaCl溶液D溶有 DNA的 NaCl溶液中加入二苯胺试剂，需沸水浴加热后冷却，再观察颜色解析：选 CD 新鲜菜花可用于 DNA的粗提取，但猪血中几乎不含 DNA；植
13、物材料需先用洗涤剂破坏细胞膜。14(2017苏锡常镇三模，多选)研究人员比较了不同贮藏条件对棉叶 DNA纯度及提取率(提取率越高，获得的 DNA越多)的影响，实验结果见下图。下列有关叙述正确是( )A提纯 DNA时可加入酒精去除不溶的蛋白质、酚类等物质B新鲜棉叶提取的 DNA纯度最高，提取 DNA的量也最多C木瓜蛋白酶和不同浓度的 NaCl溶液均可用于提纯 DNAD用二苯胺试剂鉴定，颜色最深的是冷冻 3 d处理后提取的 DNA5解析：选 CD 提纯 DNA时可加入酒精去除可溶的蛋白质、酚类等物质；新鲜棉叶提取的 DNA纯度最高，冷冻 3 d时提取 DNA的量最多，二苯胺试剂鉴定颜色最深；木瓜蛋
14、白酶可以去除蛋白质，不同浓度的 NaCl溶液可去除与 DNA溶解度不同的杂质。二、非选择题15(2017南通三模)为了获得较多、较纯、较完整的甜菜总 DNA，科研人员比较了A方法(通过 CTAB裂解细胞，并与蛋白质形成复合物)、B 方法(通过 SDS裂解细胞释放核DNA，使蛋白质变性)、C 方法(通过高盐沉淀蛋白质)从嫩叶、块根中提取总 DNA的效果，主要实验步骤和相关检测结果如下，其中氯仿异戊醇不溶于水且密度均大于水，DNA 不溶于氯仿异戊醇，蛋白质等溶于氯仿异戊醇。分析回答：主要提取过程：结果检测：组织 方法 组别 OD260/OD230 OD260/OD280 得率(gmg 1 )A方法
15、 A1 1.970 1.821 0.105B方法 B1 1.973 1.719 0.096嫩叶C方法 C1 1.647 1.568 0.082A方法 A2 1.888 1.888 0.029B方法 B2 1.811 1.682 0.030块根C方法 C2 1.376 1.320 0.020注：纯净的 DNA样品 OD260/OD230值约为 2.0，过低表明小分子物质残留较多。纯净的 DNA样品 OD260/OD280值约为 1.8，若比值大于 1.8表示存在 RNA残留；若小于 1.8表示存在蛋白质残留。得率是指每毫克组织所提取的 DNA量。(1)步骤将 DNA粗提液在 65 水浴保温 60
16、 min的目的是_。步骤“？”表示_。步骤中加 RNA酶的作用是_。6(2)影响 DNA纯度的物质主要有_。提取的 DNA中 RNA残留较多的方法是_。以嫩叶为材料提取 DNA的得率较高，原因是_。(3)电泳可以直观对比 DNA的完整性，分子大小不同的 DNA在凝胶上迁移速率不同，从而产生不同的条带。如图是上述实验中提取到的总 DNA凝胶电泳结果，其中 M是已知大小的不同 DNA的混合物。实验结果显示 A、B 方法提取的总 DNA电泳结果只有一条带，而 C方法有明显的“拖尾”现象。只出现一条带的原因是_。出现“拖尾”现象的原因是_。解析：(1)将 DNA粗提取液在 65 水浴保温，65 能够使
17、蛋白质变性，而 DNA耐高温。DNA 不溶于氯仿异戊醇，故离心后 DNA存在于上清液中。RNA 酶可降解 RNA，提高DNA纯度。(2)由实验过程及结果可知，DNA 中的杂质主要是蛋白质、RNA、小分子物质等。根据“OD 260/OD280比值大于 1.8表示存在 RNA残留”得出，A 方法提取的 DNA中 RNA残留较多。以嫩叶为材料提取 DNA的得率较高，原因是嫩叶细胞分裂旺盛，DNA 含量高。(3)生物总 DNA有多种 DNA分子，只形成一条带说明 DNA分子分子量大，不易分离。DNA 分子发生断裂或降解，生成较多不同大小的相对较小的 DNA分子，电泳时略有分离但又不充分，出现“拖尾”现象。答案：(1)使蛋白质变性 上清液 水解 RNA，去除 RNA杂质 (2)蛋白质、RNA、小分子物质 A 方法 细胞分裂旺盛 (3)甜菜细胞基因组 DNA分子都比较大，不容易分离 DNA 发生断裂或降解，形成许多大小不等的 DNA片段
