1、,狂犬病毒及疫苗,狂犬病毒于1962年首次在电镜下被发现。,A. Negri body. 尼氏小体 B. Notice the abundant RNP in the inclusion.包涵体内大量核糖核蛋白 C. Budding rabies virus.排出狂犬病病毒,狂犬病毒属棒状病毒科(Rhabdoviridae)拉沙病毒属（Lyssa virus）。呈子弹状或试管状，直径7580nm，长180nm，病毒中心为单股负链RNA病毒，有核衣壳和包膜， 狂犬病毒对外界因素抵抗力不强，1002min被灭活；易为紫外线、新洁尔灭、碘酒、高锰酸钾、乙醇、甲醛等灭话。病毒在冰冻状态下可长期存活。,
2、狂犬病毒含5种主要蛋白：糖蛋白（G）、核蛋白（N）、转录酶大蛋白（L）、磷蛋白（P）和质蛋白（M）。,神经细胞中的狂犬病毒（绿色荧光）,传染源 带狂犬病毒的动物是本病的传染原，家畜中以犬为主，其次为猫、猪和牛、马等；我国狂犬病的主要传染源是病犬，一些貌似健康的犬的唾液中可带病毒，带毒率可达22.4%，也能传播狂犬病。一般来讲,病人不是传染源，不形成人与人之间的传播.因其唾液中含的病毒量较少。,狂 犬 病 的 传 染 源,传播途径 病毒主要通过咬伤传播。 也可由带病毒犬的唾液，经各种伤口侵入 少数可在宰杀病犬、剥皮、切割等过程中被感染。 蝙蝠群居洞穴中的含病毒气溶胶也可经呼吸道传播。,流行病学,
3、易感人群人群普遍易感，兽医、动物饲养者与猎手尤易遭感染； 接触家犬或野兽机会多的农村青壮年和儿童居多，男性多于女性。流行特征 温血动物传染病，分布广泛，以家犬密度大的地方多见； 全年发生，冬季发病率略低。,狂犬病致病机理,通过神经进入分泌腺体： 在唾液中排出病毒,进入大脑细胞引起全脑炎,在神经系统中向心性移动,通过肌肉周围神经末梢进入神经系统,病毒在伤口周围肌肉细胞中复制,被动物咬伤而感染病毒,发病机制,狂犬病毒致病过程可分为三个阶段： 神经外小量增殖期： 病毒先在局部伤口附近的横纹肌细胞内小量增殖，通过和神经肌肉接头的乙酰胆碱受体结合，侵入附近的末梢神经。从局部伤口至侵入周围神经不短于72小
4、时，最长可达12周。,发病机制,侵入中枢神经期：病毒沿神经的轴索浆向中枢神经作向心性扩散，以每小时3mm速度(5cm/d)，复制缓慢，至脊髓的背根神经节后，再大量繁殖，然后入侵脊髓并很快到达脑部，波及整个CNS。主要侵犯脑干和小脑等处的神经细胞，一般不侵入血流。,发病机制,向各器官扩散期： 随后病毒从中枢神经向周围神经离心性扩散，侵入各器官组织。 由于迷走、舌咽及舌下脑神经核受损，致吞咽肌及呼吸肌痉挛，可出现恐水，吞咽和呼吸困难等症状 交感神经受累时可出现唾液分泌和出汗增多。 迷走神经节、交感神经节和心脏神经节受损时，可引起病人心血管功能紊乱，可导致心脏骤停，突然死亡。,病理变化,主要为急性弥
5、漫性脑脊髓炎，以大脑基地面海马回和脑干部位（中脑、脑桥和延髓）及小脑损害最为明显。 Negri小体，为狂犬病毒的集落，最常见于海马的大锥体细胞和小脑的浦肯野（Purkinje）细胞中。该小体位于细胞浆内，呈圆形或椭圆形，直径310m，染色后呈樱桃红色，具有诊断意义。,Negri小体,脑细胞中狂犬病病毒电镜照片，放大64000倍。 环绕在光滑灰色圆圈周围的子弹样颗粒就是狂犬病病毒 圆圈是尼氏小体,临床表现,潜伏期人被狂犬咬伤，发病率为30%60%。咬伤后能否发病，与受伤部位、伤势程度及病畜唾液中的病毒量有关.短的5日，长的达10余年，多数13个月； 儿童、头面部咬伤、伤口深、扩创不彻底者潜伏期短
6、；,典型临床表现：前驱期 发热、头痛、乏力、周身不适等症状，对痛、声、光等刺激较敏感，并有咽喉紧缩感。约5080%病人伤口部位及其附近有麻木或蚊走感； 兴奋期或痉挛期 处于兴奋状态，如极度恐惧、烦燥，对水声、风等刺激非常敏感，易于引起发作性咽肌痉挛、呼吸困难等。部分患者出现特殊的恐水症状，在饮水、见水、流水声或谈及饮水时，可引起严重咽喉肌痉挛，称为“恐水症”（hydrophobia）。随后，部分病人出现精神失常、定向力障碍、幻觉、谵妄等。病程进展很快； 麻痹期 痉挛减少或停止，出现弛缓性瘫痪，神志不清，最终因呼吸麻痹和循环衰竭而死亡。,预后:,狂犬病是所有传染病中最凶险的病毒性疾病,其病死率达
7、100。,伤口处理,立即用肥皂水、消毒剂或单用清水反复清洗伤口，时间不低于15分钟，伤口深时要用注射器灌注反复冲洗； 然后用酒精反复消毒，最后涂上碘酒； 伤口不止血、不包扎、不缝合； 使用人抗狂犬病免疫球蛋白（HRIG）10 IU/kg或马抗狂犬病免疫血清20 IU/kg在伤口底部和周围行局部浸润注射；同时以相同剂量做臂部肌肉注射。 必要时使用抗菌药物；伤口深时还要使用破伤风抗毒素。,预防接种,接种狂犬疫苗是预防发病的重要措施。即所谓的预防性治疗。由于狂犬病的潜伏期长，从被咬伤到发病一般经过几十天或几个月，在此期间尽早接种疫苗可免于发病。 严重咬伤者，除应给予高效价免疫血清进行被动免疫外，仍需
8、要接种狂犬疫苗，可收到更佳效果。,疫苗注射,暴露前预防：适用于高危人群如兽医、山洞探险者、相关实验人员、动物管理员，0、7、21天各2ml肌肉注射；23年加强注射一次； 暴露后预防：咬伤后注射越早越好 一般患者接种5次，0、3、7、14、30各接种一次； 严重咬伤患者接种10次，前6天每日一针，10、14、30、90天各1针。 1年内再次咬伤者，0、3天各接种一次；13年内再次咬伤，0、3、7各接种一次；超过3年，重新接种。 注意疫苗储存在2。,狂犬疫苗的种类,WHO推荐的狂犬疫苗 HDCV人二倍体细胞培养疫苗PCEC 鸡胚细胞培养疫苗PDEV 纯化鸭胚疫苗PVRV 纯化Vero 细胞疫苗 我
9、国生产的狂犬疫苗PHKC地鼠肾细胞培养疫苗PVRV 纯化Vero 细胞疫苗,各类人用狂犬病疫苗,疫苗种类 毒种 纯化方法 生产国家 - 原代地鼠肾细胞 aG株 柱纯析 中国 原代狗肾细胞 AM 末精制 荷兰 原代鸡胚细胞 Fluly-LEP-C25 超速离心 德国 原代鸡胚细胞 Fluly-HEP 超速离心 日本 胚鸭细胞 PM株 梯度密度离心 瑞士 人胚肺二倍体细胞 PM株 超速离心 英国瑞士 （ WI-38 ） 德国法国美国 人胚肺二倍体细胞 SAD 超速离心 加拿大(MRC-5) Vero细胞 PM 梯度密度离心 法国aG株 CTN-1株 中国 -,我国生产狂犬疫苗的企业,北京生物制品研
10、究所 V 沈阳安迪生物高科技公司 H V 上海生物制品研究所 V 长春长生实业股份公司 H V 长春生物制品研究所 H V 辽宁生物工程公司 H V 兰州生物制品研究所 H V 大连高新生物技术公司 H 武汉生物制品研究所 V 吉林亚太 H 宁波荣安生药业公司 V 河北省医药技术公司 H 常州延申生物药业 V 河南普新生物工程有限公司 H 海南生物制品研究所 V,狂犬疫苗的质量标准,物理检查 乳白色疏松体 PH值 7.2 8.0 溶解时间 1 分钟 硫柳汞含量 (mg/ml) 0.10 蛋白含量（ug/剂） 120 残余水份含量 % (g/g ) 3.0 残余牛血清蛋白(ng / 剂) 50 灭活试验 小鼠应健在 残余DNA含量 (ng/剂) 10 无菌试验 应无细菌生长 异常毒性试验 小鼠试验 小鼠应键在, 体重增加 豚鼠试验 豚鼠应键在, 体重增加 效力试验 (IU/剂) 2.5 热稳定试验 (IU/剂) 2.5,我们不好意思说再见,
