1、聘,茫茫人海中，为什么选中了你？,能力？,颜值？,素质修养？,发酵工业菌种的要求：,1，所需材料廉价。,2，培养条件易于控制。,3，生长快，发酵周期短。,4，满足代谢控制的要求。,耐燥，不事事,听话，人实在,体壮，好养活,热爱祖国热爱党，热爱老板。,1，从微生物菌种保藏机构购买菌种； 2，从自然界或现有菌种中分离筛选菌种； 3，对筛选出的菌种进行改良从而获得新种。,工业微生物菌种的获取途径：,第二章 工业微生物菌种的选育、保藏与培养,第二节，工业微生物菌种的选育,了解常用的微生物菌种保藏机构 掌握从自然界中分离筛选菌种的方法 熟悉自然选育的作用和意义 熟悉人工诱变育种的方法,一、常用的微生物菌
2、种保藏机构,国内：,CICC（中国工业微生物菌种保藏管理中心）,CGMCC（中国普通微生物菌种保藏管理中心）,CICC目前保藏国内外各类工业微生物菌种10153株，30余万备份，其中细菌4445株，酵母菌3222株，霉菌2220株，大型真菌266株。共计212个属，839个种，基本覆盖了食品与发酵行业各类生产和科研用微生物。,CGMCC目前保存各类微生物资源超过5000种，46,000余株，用于专利程序的生物材料7100余株，微生物元基因文库约75万个克隆。,国外：,国际菌种保藏联合会（WFCC） 美国典型微生物菌种保藏中心（ATCC） 美国农业研究菌种保藏中心（NRRL） 日本技术评价研究所
3、生物资源中心（NBRC） 荷兰微生物菌种保藏中心（CBS） 德国微生物菌种保藏中心（DSMZ） 英国国家典型微生物菌种保藏中心（NCTC）,二、从自然界或现有菌种中分离筛选菌种,从自然界分离微生物菌种是最初获得工业微生物菌种的主要方式。 从土壤中分离微生物菌种是典型分离方式之一。 从土壤中分离微生物菌种将要花费大量时间和资金。,应当永远铭记，药物是为人类而生产，不是为追求利润而制造的。只要坚守这一信念，利润必将随之而来。,乔治.默克,从自然界中直接分离筛选菌种,增殖培养,采样,生产性能测定,纯种分离及培养,进行增殖培养时可根据预定的技术措施和菌种特性，人为地加入一定的限制因素，以使所需的微生物
4、在增殖后在数量上占绝对优势。,1，控制培养基中碳源的种类 2，添加某些抑制因子或促进因子 3，控制培养条件,通过增殖培养，样品中的微生物还是处于混杂生长状态，如何把它们逐个分离出来？,稀释分离法：,划线分离法：,组织分离法：,三、微生物菌种的自然选育,选育：经过分离筛选获得的菌种，一般不能立即适应实际生产需要，还要通过选育，才能提高代谢产物的产量、改进产品质量、简化工艺、提高产品附加值。,自然选育、诱变育种、杂交育种、原生质体融合、基因工程等,自然选育：在生产过程中，不经过人工处理，利用菌种的自发突变，从而选育出优良菌种的过程叫作自然选育。,四、微生物菌种的诱变育种,诱变育种是指用人工的方法处
5、理微生物，使它们发生突变，再从中筛选出符合要求的突变菌株，供生产和科学实验用。,欲知详细，请听下回分解,小结：,1，本节内容中，你了解到了菌种保藏机构有哪些？如何获取联系或购买菌种？,2，从自然界中分离筛选微生物的过程你是否已经熟悉？每一步需要注意些什么？,3，分离获得的菌株需要怎样的过程才能用于工业生产？你是怎样理解自然选育的？,作业：,设法从土壤中分离筛选出一株黑曲霉，并将其邮寄给CICC进行菌种的鉴定。作业内容包括完整的从自然界中分离纯化黑曲霉的过程和邮寄所附信件信息。,诱变育种,熟悉诱变育种的一般步骤 熟悉营养缺陷型等一般概念 掌握突变菌株尤其是营养缺陷型的筛选策略,一、突变育种的一般
6、步骤,选择出发菌种,同步培养,制备单细胞或单孢子菌悬液,诱变处理,筛选变异菌株,1，选择出发菌种,选出的菌种该有何担当？,选出的菌种该具备怎样的素质？,从哪里选？,2，同步培养,通过什么样的方式可以实现同步生长？,一、培养条件,二、物理筛分,3，制备单细胞或单孢子菌悬液,菌悬液一般用无菌生理盐水或缓冲溶液配制。 菌悬液的细胞或孢子浓度一般可以控制在106108个/mL。,生理盐水就是0.9%的氯化钠水溶液，因为它的渗透压值和正常人的血浆、组织液都是大致一样的，所以可以用作补液（不会降低和增加正常人体内钠离子浓度）以及其他医疗用途，也常用作体外培养活组织、细胞。是人体细胞所处的液体环境浓度。,4
7、，诱变处理,诱变剂,物理诱变剂,化学诱变剂,诱变剂量：一般是指作用强度与作用时间的乘积。,正向突变较多地出现在偏低的剂量中，负向突变则较多地出现于偏高的剂量中。,5，筛选变异菌株,菌种经过诱变后，绝大多数是负突变菌株，正突变占极少数。 选择合适的筛选方法可以大大减少工作量。,初筛,复筛,平皿快速检测法,变色圈,抑菌圈,生长圈,透明圈,二、营养缺陷菌株及其筛选,营养缺陷型：是指某一野生型菌株由于发生基因突变而丧失合成一种或几种生长因子的能力，因而无法在基本培养基上正常生长繁殖的变异类型。,野生型,基本培养基,补充培养基,完全培养基,C,B,A,A:,B：,C：,基本培养基,补充培养基,完全培养基,营养缺陷型的筛选过程：,淘汰野生型,检出营养缺陷型,营养缺陷型的鉴定,抗生素法,过滤法,逐个检出法,夹层检出法,营养限量法,影印检出法,缺陷营养类别,缺陷营养因子,影印检出法,小结：,1，微生物诱变选育的主要过程如何？诱变的方法你了解的哪些？,2，什么是营养缺陷型？如何实现营养缺陷型的筛选？,作业：,将变色圈法、透明圈法、生长圈法、抑菌圈法筛选变异菌株的一般原理整理到作业本上。,
