1、不可征服不可征服透过覆盖我周身的深夜,透过覆盖我周身的深夜,我看见层层无底的黑暗;我看见层层无底的黑暗;感谢上帝曾赐我,感谢上帝曾赐我,不可征服的灵魂;不可征服的灵魂;就算被地狱紧紧的拽住,就算被地狱紧紧的拽住,我不会畏缩,也不会惊叫;我不会畏缩,也不会惊叫;经受过一浪又一浪的打击,经受过一浪又一浪的打击,我满头鲜血也不低头;我满头鲜血也不低头;在这充满愤怒和眼泪的世界之外,在这充满愤怒和眼泪的世界之外,恐怖的阴影在游荡;恐怖的阴影在游荡;还有,来自未来的威胁;还有,来自未来的威胁;可我,毫不畏惧;可我,毫不畏惧;无论我将穿过的那道门有多窄,无论我将穿过的那道门有多窄,无论我将承受怎样的责罚,
2、无论我将承受怎样的责罚,我是我命运的主宰者!我是我命运的主宰者!我是我灵魂的掌舵人!我是我灵魂的掌舵人!XS-800i全自动血液分析仪全自动血液分析仪介绍介绍徐鹏 敬献2011年 5月 23日血液分析仪的发展n二分群 ( 70年代)n三分群(阻抗法) ( 80年代)n五分类( DNA/RNA染色流式细胞、 VCS、 MAPSS)n五分类网织红其它(有核红细胞、造血干细胞、幼稚粒细胞、光学血小板等)仪器自动分析已经逐步代替人工检测;高端机型取代低端机型也成了发展的趋势。X系列的血液分析仪器有系列的血液分析仪器有 :XSXT XT-1800iXT-2000iXT-4000iXE XE-2100XE
3、-5000XS-500iXS-800iXS-1000i试剂分析模式检测原理XS-800i是一款自动血液分析仪,具有五分类血细胞分析功能。该仪器利用鞘流电阻检测法、一个半导体激光器、流式细胞计数法和 SLS血红蛋白检测法来进行检测。320 503 413mm试剂, XS-800i使用四种试剂 CELLPACK-EPK( 20L/桶, 36.0mL/标本) STROMATOLYSER-4DL ( 5L/桶, 2.0mL/标本) STROMATOLYSER-4DS ( 423mL/盒, 0.03mL/标本) SULFOLYSER-SLS ( 5003mL/盒, 0.5mL/标本)uCELLPACK
4、储存l 将 CELLPACK在 +5至 +30 的温度下储存。l 软塑桶未开封时, CELLPACK可以在其有效期内使用。l 开封后(连接到仪器),试剂稳定性可维持 60天。作用l CELLPACK是一种现成即可使用的稀释剂,用于在电阻抗分析法和光电分析法中的分析。uSTROMATOLYSER-4DL储存l 将 STROMATOLYSER-4DL在 +2至 +35 的温度下储存。l 软塑桶未开封时, STROMATOLYSER-4DL可以在其有效期内使用。l 开封后(连接到仪器),试剂稳定性可维持 60天。作用l STROMATOLYSER-4DL是一种现成即可使用的稀释剂,用于在电阻检测和光
5、度检测中对血液进行分析。uSTROMATOLYSER-4DS储存l 将 STROMATOLYSER-4DS在 +2至 +35 的温度下储存。l 未开封时, STROMATOLYSER-4DS可以在其有效期内使用。l 开封后(连接到仪器),试剂稳定性可维持 60天。作用l 在抽吸样本之后,一部分的全血样本被细胞溶解试剂 STROMATOLYSER-4DL稀释到 1:50的比例,然后再被添加 STROMATOLYSER-4DS着色uSTROMATOLYSER-4DS剂。在一段预定的相应时间后,已着色的样本被送至检测器,进行前向散射光和侧向荧光强度的检测。完成五种白细胞的计数和百分比的计算。uSUL
6、FOLYSER储存l 将 SULFOLYSER在 +2至 +35 的温度下储存。l 软塑桶未开封时, SULFOLYSER可以在其有效期内使用。l 开封后(连接到仪器),试剂稳定性可维持 60天。作用l SULFOLYSER是一种现成即可使用的、在比色法中分析血样的稀释剂。XS-800i分析模式在手动模式下,样本试管的管盖由操作人员手动去除,每个样本通过探针进行抽吸。在毛细血管模式下,样本被人工地稀释到1:7的稀释度后才开始进行分析。该模式用于分析从耳垂或指尖处采取的微量血液。样本通过探针进行抽吸,所获得的结果被自动乘以 7后生成分析报告。u手动模式u毛细血管模式XS-800i的相关参数的相关
7、参数n 检测项目:检测项目: 24项项n 检测速度:检测速度: 60份份 /小时(小时( 13)n 随机分析模式:随机分析模式: CBC模式和模式和 CBC+DIFF模式模式n 样本量:样本量: 20Ln 尺寸尺寸 mm(宽(宽 高高 厚):约厚):约 320 503 413n 重量(重量( Kg):): 24类别类别 参数参数 首字母缩写首字母缩写 检测方法检测方法RBC红细胞红细胞 RBC 鞘流鞘流 DC检测方法检测方法 红细胞比积红细胞比积 HCT RBC累积脉冲高度检测法累积脉冲高度检测法 平均红细胞平均红细胞体积体积 MCV MCV(fl)=( HCT1015) /( RBC/L)
8、红细胞分布红细胞分布宽度标准宽度标准差差 RDW-SD 根据红细胞直方图算出根据红细胞直方图算出 红细胞分布红细胞分布宽度变异宽度变异系数系数 RDW-CV 根据红细胞直方图算出根据红细胞直方图算出 HGB血红蛋白血红蛋白 HGB SLS血红蛋白检测法血红蛋白检测法平均红细胞平均红细胞血红蛋白量血红蛋白量 MCH MCHC(g/L)=HGB(g/L)/HCT 类别类别 参数参数 首字母缩首字母缩写写检测方法检测方法HGB 平均红细胞血红蛋平均红细胞血红蛋白浓度白浓度 MCHC MCHC(g/L)=HGB(g/L)/HCT PLT血小板血小板 PLT 鞘流鞘流 DC检测方法检测方法 血小板分布宽
9、度血小板分布宽度 PDW 根据血小板直方图根据血小板直方图算出算出 平均血小板体积平均血小板体积 MPV MPV(fL)=PCT(%)/PLT(103/L)1000 大血小板比率大血小板比率 P-LCR 根据血小板直方图根据血小板直方图算出算出 血小板压积血小板压积 PCT 根据血小板直方图根据血小板直方图算出算出 类别类别 参数参数 首字母缩写首字母缩写 检测方法检测方法WBC白细胞白细胞 WBC-C FSC白细胞白细胞 WBC-D DIFF中性粒细胞百分比中性粒细胞百分比 NEUT% 流式细胞流式细胞计数计数 淋巴细胞百分比淋巴细胞百分比 LYMPH% 单核细胞百分比单核细胞百分比 MON
10、O% 嗜酸性粒细胞百分比嗜酸性粒细胞百分比 EO% 嗜碱性粒细胞百分比嗜碱性粒细胞百分比 BASO% 中性粒细胞数中性粒细胞数 NEUT# 淋巴细胞数淋巴细胞数 LYMPH# 单核细胞数单核细胞数 MONO# 嗜酸性粒细胞数嗜酸性粒细胞数 EO# 嗜碱性粒细胞数嗜碱性粒细胞数 BASO# XS-800i检测原理l 鞘流阻抗法l SLS血红蛋白检测l 半导体激光 +流式细胞计数 +核酸荧光染色( WBC、 WBC DIFF、 IG)( RBC、 PLT)( HGB)RBC和和 PLT的检测的检测鞘流电阻抗法检测鞘流电阻抗法检测 RBC和和 PLTn 全血标本稀释后分配到全血标本稀释后分配到 RB
11、C/PLT检测器内。样品喷检测器内。样品喷嘴定位在孔的前面且与中心对齐。将稀释后的样嘴定位在孔的前面且与中心对齐。将稀释后的样品由样品喷嘴推入锥形室以后,由前鞘流内的试品由样品喷嘴推入锥形室以后,由前鞘流内的试剂产生的层流包裹通过小孔的中心。细胞通过检剂产生的层流包裹通过小孔的中心。细胞通过检测小孔时,产生一个电阻信号,仪器将这个电阻测小孔时,产生一个电阻信号,仪器将这个电阻信号转化为脉冲信号记录下来,信号转化为脉冲信号记录下来,脉冲的高度反映了细胞的大小,脉冲的高度反映了细胞的大小,每个脉冲信号代表一个细胞,通每个脉冲信号代表一个细胞,通过收集整理大量细胞的脉冲信号,过收集整理大量细胞的脉冲
12、信号,得到得到 RBC和和 PLT的直方图。的直方图。通过小孔以后,经过稀释的样品由后鞘流中的试通过小孔以后,经过稀释的样品由后鞘流中的试剂包裹送入捕集管中。这样就可以防止该区域的剂包裹送入捕集管中。这样就可以防止该区域的血细胞回流,并防止产生假性血小板脉冲。鞘流血细胞回流,并防止产生假性血小板脉冲。鞘流方法改善了血液计数的准确性和重现性。同时由方法改善了血液计数的准确性和重现性。同时由于血细胞通过在一条直线上的小孔,所以也可防于血细胞通过在一条直线上的小孔,所以也可防止产生异常血细胞脉冲。止产生异常血细胞脉冲。血液: 4.0L 毛细血管模式: 9.0LEPK2mL EPK稀释过的样本10.3
13、LRBC/PLT的检测HGB的检测的检测SLS血红蛋白检测法血红蛋白检测法SLS血红蛋白检测方法用的主要成分是十二烷基磺血红蛋白检测方法用的主要成分是十二烷基磺酸钠。酸钠。 血红蛋白检测的化学反应步骤如下:血红蛋白检测的化学反应步骤如下:l 表面活性剂先将红细胞溶解,释放出血红蛋白分表面活性剂先将红细胞溶解,释放出血红蛋白分子。子。l 血红蛋白分子中的血红蛋白分子中的 Fe2+被氧化为被氧化为 Fe3+,同时,同时 SLS的亲水端与的亲水端与 Fe3+离子结合形成稳定的离子结合形成稳定的 SLS-Hb有色有色基团,基团, SLS-Hb在在 535nm有最大吸收峰。这种方法有最大吸收峰。这种方法
14、不含氰化物,因此无毒不含氰化物,因此无毒具有环保性,而且具有环保性,而且 SLS是是一种脂溶性试剂,可以一种脂溶性试剂,可以大大减弱脂血和高白细胞大大减弱脂血和高白细胞总数造成的浊度对血红总数造成的浊度对血红蛋白检测的影响。蛋白检测的影响。SLS0.5mL样本1:751的稀释度(毛细血管 1:2340)HGB的分析CBC模式下的白细胞的分析模式下的白细胞的分析为了检测白细胞的数量,红细胞首先被溶血素为了检测白细胞的数量,红细胞首先被溶血素( 4DL)完全溶解,然后使用前向散射光检测)完全溶解,然后使用前向散射光检测剩余的血小板和白细胞,前向散射光信号反应剩余的血小板和白细胞,前向散射光信号反应
15、细胞的大小,在产生的白细胞直方图上,浮动细胞的大小,在产生的白细胞直方图上,浮动界标把体积小的血小板去除,将体积较大的细界标把体积小的血小板去除,将体积较大的细胞计数为白细胞。胞计数为白细胞。CBC模式下,白细胞计数模式下,白细胞计数 WBC有两种分析模式:CBC模式CBC+DIFF模式白细胞的分析白细胞的分析CBC+DIFF模式下的白细胞分析模式下的白细胞分析uCBC+DIFF的优势?的优势?u什么是前向散射光和侧向散射光?什么是前向散射光和侧向散射光?u什么是侧向荧光?什么是侧向荧光?使用流式细胞计数法检测细胞的物理和化学性质只需很少的样品就可对它进行检测。一个血液样品经过抽吸和测量并被稀
16、释至指定的稀释比后,再进行染色,然后该样品被送入贯流分析池中。这种液压聚焦装置改进了细胞计数的准确性和重现性。同时,由于血细胞颗粒成行通过该流动池的中心,故而防止产生异常血液脉冲并可减少贯流分析池的污染。半导体激光束将照射到通过该贯流分析池的血细胞上。前向散射光和侧向散射光将被光电二极管接收,侧向荧光则由光电倍增管接收。光信号被转化为电脉冲,从而可以得到有关血液细胞的信息。前向散射光和侧向散射光当障碍物经过光通路时,光束就在每个障碍物的不同方向上产生出散射光。这种现象称为光散射。通过检测散射光,可以得到有关细胞体积大小和材质的信息。当一束激光照射到血细胞颗粒上时,就产生散射。散射光的强度取决于
17、诸如颗粒直径和观察角度等因素。 XS检测的是前向散射光和侧向散射光;对前向散射光进行检测,提供有关血液细胞体积大小的信息;同时对侧向散射光进行检测,提供有关细胞内部(如细胞核的体积大小)的信息。侧向荧光当光照射到经过荧光染色的血液细胞上时,就产生比入射光波长更长的光。随着染色浓度的增加,荧光强度也随之增加。通过测量荧光强度,可以得到有关血细胞染色的信息。荧光向所有方向散射, XS检测的是从侧面射出的荧光。CBC+DIFF原理俯视图CBC+DIFF模式下的白细胞分析模式下的白细胞分析n 前向散射光强度信号前向散射光强度信号n 侧向散射光强度信号侧向散射光强度信号n 侧向荧光强度信号侧向荧光强度信
18、号CBC+DIFF通道中使用了三个信号:通道中使用了三个信号:CBC+DIFF通道中使用了三种试剂:通道中使用了三种试剂:n 溶血素溶血素 -4DLn 荧光染料荧光染料 -4DSn 稀释液稀释液 -EPK原理概述:原理概述:注: XS在 CBC+DIFF模式中对白细胞分析时,采用了核酸荧光染色和前向散射光两种方法进行白细胞计数,但最终以核算荧光染色法的结果为报告结果,前向散射光法的结果为参考结果。首先溶血素( 4DL)将样本稀释至所需浓度,并将红细胞完全溶解,同时在白细胞膜上打孔;然后荧光染料( 4DS)通过小孔进入白细胞内,对胞浆和胞核中的核酸物质进行核酸荧光染色,经过核酸荧光染色后的细胞被
19、送入光学检测器,在 633nm激光的照射下,产生前向散射光信号、侧向散射光信号和侧向荧光信号。其中前向散射光反应细胞的大小;侧向散射光强度反应了细胞内容物的复杂程度(包括核的分叶、胞浆颗粒的大小、数量、分布均匀程度);侧向荧光强度与白细胞的核酸( DNA/RNA)含量成正比例。比值 2系统报错半导体激光 +核酸荧光染色 +流式细胞技术半导体激光照射标本,并依据每个细胞产生的三种信号来相互区分,即前向散射光 (FSC) ,侧向射散光 ( SSC) 和侧向荧光 (SFL) 。n 寿命长寿命长n 启动快启动快n 对电压要求低对电压要求低n 对环境温度要求低对环境温度要求低n 体积小体积小n 成本低成本低半导体激光流式细胞技术保证被检细胞单个、顺流、正面通过检测器,从而消除了普通血液分析仪常见了返流、重叠、侧向等的干扰。WBC分析的两个重要技术优势u半导体激光u流式细胞技术