1、实验一 :观察 DNA 和 RNA 在细胞中的分布 DNA 主要分布于细胞核中， RNA 主要分布于细胞质中。 【 实验原理 】 1.染色： 一般用 吡罗红甲基绿混合染色剂 将细胞染色以显示 DNA和 RNA在细胞中的分布。甲基绿和吡罗红两种染色剂对 DNA 和 RNA 的亲和力不同， 甲基绿使 DNA 呈现绿色，吡罗红使RNA 呈现红色 ，以此达到区分的目的。 2.水解： 盐酸能改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，同时使染色质中的 DNA 与蛋白质分离，有利于 DNA 与染色剂结合。 【 工 具 /原料 】 大烧杯、小烧杯、温度计、滴管、消毒牙签、载玻片、盖玻片、铁架台、石棉网、火柴、吸
2、水纸、显微镜。 人的口腔上皮细胞、蒸馏水、质量分数为 0.9%的 NaCl 溶液、质量分数为 8%的盐酸。 吡罗红甲基绿混合染色剂（ 取 A 液 20mL、 B 液 80mL 配成染色剂，使用时现配。 A 液：取吡罗红甲基绿粉 1g,加入 100mL 蒸馏水中溶解，放入棕色瓶中备用。 B 液：取乙酸钠 16.4g,用蒸馏水溶解至 1000mL。取乙酸 12mL,用蒸馏水稀释至 1000mL。取稀释的乙酸钠溶液 30mL 和乙酸 20mL，加蒸馏水 50mL， pH 为 4.8 的溶液）。 【 方 法步骤 】 一、制片： 制作人口腔上皮细胞临时装片 1.在洁净的载玻片上用滴管滴一滴 质量分数为
3、0.9%的 NaCl 溶液 。 2.用消毒牙签在自己的 口腔内侧壁上轻刮几下 ，再把牙签上附有碎屑的一端放在液滴中涂抹几下。 3.用火柴点燃酒精灯，将涂有口轻上皮细胞的载玻片 烘干 。 如图： 二、水解 1 .在小烧杯中 加入 30mL 质量分数为 8%的盐酸 ，将烘干的载玻片放入小烧杯中。 2.在大烧杯中加入 30 温水 。 3.将盛有盐酸和载玻片的小烧杯放在大烧杯中 保温 5min。 如图： 批注 马旭昌 1: 常用的观察材料由人的口腔上皮细胞、洋葱鳞片叶表皮细胞 (为 防止深颜色遮蔽反应产生的颜色 ， 用植物细胞做时，应选择 浅颜色 的细胞， 不可使用紫色表皮细胞 ) 取口腔上皮细胞之前
4、，应先漱口，以避免装片中出现太多的杂质； 取洋葱表皮细胞时，尽量避免材料上带有叶肉组织细胞。 批注 马旭昌 2: 维持细胞的形态 批注 马旭昌 3: 取人口腔上皮细胞时必须漱口，原因是洗去食物残渣 批注 马旭昌 4: 目的：烘干可迅速杀死并固定细胞，否则细胞内的溶酶体会对核酸造成破坏。 用酒精灯烘烤载玻片时，不要只集中于材料处，而应将载玻片在火焰上来回移动， 使载玻片均匀受热，以免破裂 。 烘烤后的载玻片不要马上放入盛有稀盐酸的烧杯中，最好先自然冷却 1 分钟 。 批注 马旭昌 5: 盐酸能改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，同时使染色质中的 DNA 与蛋白质分离，有利于 DNA 与染色剂
5、结合。 批注 马旭昌 6: 水浴加热的目的是 受热均匀 ；保温时间过短则 水解不彻底，染色不充分 ，过长则 水解过度，不易制片观察 三、 冲洗 用蒸馏水的 缓水流 冲洗载玻片 10s。 如图： 四、染色 1.用吸水纸吸去载玻片上的水分。 2.将 吡罗红甲基绿混合染色剂 滴 2 滴在载玻片上，染色 5min。 3.吸去多余染色剂，盖上盖玻片。 如图： 五、观察 1.低倍镜观察：选择 染色均匀、色泽浅 的区域，移至视野中央，将物像调节清晰。 2.高倍镜观察：调节细准焦螺旋，观察细胞核和细胞质的染色情况。可以清楚地看到 被染成绿色的 DNA 主要集中于细胞核中，而被染成红色的 RNA 主要集中于细胞
6、质中 。如图所示： END 批注 马旭昌 7: 冲洗不彻底，残留的盐酸会影响染色 批注 马旭昌 8: 防止 口腔上皮细胞被水流冲跑 批注 马旭昌 9: 为了更好地染色 ， 水会降低染色剂的浓度 批注 马旭昌 10: 现用现配，防止染色较浅不易观察 归纳 ：染色较浅不易观察的原因 水解不充分，染液不易进入细胞 冲洗不彻底，残留的盐酸会影响染色 染液配制不好，应现用现配 注意事项 DNA 主要分布于细胞核中，但细胞质中线粒体与叶绿体内也有少量分布。 RNA 主要分布于细胞质中，但大部分 RNA 是在细胞核中合成后被运往细胞质的。 【 实验结果及结论 】 现象 结论 绿色明显集中且接近细胞中央 DNA 主要 分布在细胞核中 绿色周围的红色范围 较广 RNA 主要 分布在细胞质中 批注 马旭昌 11: DNA 和 RNA 在细胞核和细胞质中均有分布，只是量不同，故结构中强调“主要”而不能说“只”存在于细胞核或细胞质中。
