1、杨爱华,第二章 食品微生物检验常用的仪器,一、常用仪器及其使用,显微镜 冰箱 超净工作台、杀菌锅 离心机 水浴锅、培养箱 烘箱或干燥箱 匀质器 各种玻璃器材,（一）显微镜,普通显微镜的保养,1、观察完后，移去观察的载玻片标本。 2、用过油浸镜的，应先用擦镜纸将镜头上的油擦去，再用擦镜纸蘸着擦镜液擦拭23次，最后再用擦镜纸将二擦镜液苯擦去。 3、转动物镜转换器，放在低倍镜的位置。 4、将镜身下降到最低位置，调节好镜台上标本移动器的位置，罩上防尘套。,数字显微镜,（二）、培养箱,智能隔水恒温培养箱 隔水培养箱 电热培养箱 生化培养箱,卧式恒温振荡培养箱,电热恒温培养箱,1、普通恒温培养箱,智能培养
2、箱,微电脑智能化双目控温系统具有控温保护、准确、可靠。工作温度任意调节并具有偏差报警功能，镜面不锈钢内胆，外门内层用一层门，观察箱内情况时不影响箱内温度。9000系列隔水式加热方式，具有温度均匀且断电后仍能保持较长时间恒温。,隔水式培养箱,隔水式培养箱数字控温，不锈钢内胆，俗称水夹套培养箱。温度均匀，断电后仍能保持较长时间恒温。,电热恒温培养箱,2、生化培养箱,3、二氧化碳培养箱,培养箱的配置和使用,配置：22（）、30（）、37（）培养箱各一个 使用注意事项： (1)箱内不能放入过热或过冷的物品，取放物品时应快速进行并做到随手关闭箱门。 (2)内放一杯水，以保持湿度。 (3)培养物不能放在最
3、底层，也不得放置过于拥挤。 (4)每月消毒一次，先用3%的来苏尔液涂布消毒，再用清水擦净。 (5)不得当烘箱使用。,4、水浴锅,（1）37 和42 水浴锅24小时工作； （2）其余水涡锅用后关掉电源； （3）水浴锅内应注加蒸馏水而非自来水，使用时请注意水位。配置： 37 、42 、56 各一个,匀浆机,（三）匀质器,高速匀浆机,无菌均质器,无菌均质器,该均质器广泛用于动物组织、生物样品、食品、化妆品的均质处理，特别适合于微生物检测样本的制备，具有均质柔和、样品无污染、无损伤、不升温、不需灭菌处理、不需洗刷器皿的特点，样本装在特制的一次性无菌均质袋中，不与仪器接触，预防交叉污染。,（四）、超净工
4、作台,三大类 型： 侧流式、直流式和外流式,垂直流超净工作台,水平单向流洁净工作台,超净台的使用和注意事项,1、使用前先打开紫外灯照射，紫外线照射时间4060分钟； 2、使用中，有机玻璃罩受到污染，严禁用酒精棉球擦拭，请用含水棉布檫拭； 3、请保持超净台整洁，不要堆积杂物； 4、使用完毕，勿忘关闭煤气开关或酒精灯； 5、请做好使用记录。 6、如遇故障，除记录在册外，还应及时与有关人员联系，尽早排除故障。 7、学期开始做无菌试验一次，以保证净化台正常使用。平时可根据情况，定期做无菌试验，以测定净化台是否符合无菌要求。,（五）、离心机,离心机的类型： 普通离心机 高速离心机 超速离心机,台式高速冷
5、冻离心机,差速沉降（沉淀）法：,密度梯度离心法：,转子,许多离心机可以配用不同大小的离心管，只需要改变转子或使用一个与不同的吊桶/适配器相配的转子。 1水平转子：盛样品的离心管放在吊桶内，以转子的加速度运转。水平转子用于低速离心机，其主要缺陷是延长了沉淀的路径。同时，减速过程中产生的对流会引起沉淀物的重新悬浮。 2角式转子：许多高速离心机及微量离心机安装。由于沉降路径短，沉淀颗粒时角式转子比水平转子的效率更高。 3垂直管转子：用于高速及超高速离心机进行等密度梯度离心时。这种转子在沉淀没有形成之前不能用来收集悬浮液中的颗粒。,转子：（a）水平转子；（b）固定转角转子；（c）垂直离心管转子,（六）
6、、灭菌器,干热灭菌器 湿热灭菌器,1、电烘箱（干燥箱）,用途：用于玻璃器皿等耐热物品的烤干和灭菌。玻璃器皿等物的灭菌，温度160165，灭菌 2小时。,玻璃器材的干热灭菌方法,(1)将培养皿、吸管等玻璃器皿洗净干燥后，用报纸包好，或装入特制的铁筒中。 (2)将包装好的玻璃仪器摆入电热烘箱中，彼此间留有一定的空隙以便流通空气。 (3)关紧箱门，打开排气孔接上电源。 (4)待箱内空气排出到一定程度时，关闭上排气孔，继续加热至一定温度后，调节温度控制旋钮固定温度，在160165保持2小时即可。(5)待自然降温冷却后(60以下)才能开门取出玻璃器皿。,2、高压灭菌锅,用途：培养基、生理盐水、废弃物、采
7、样器、纱布、衣物的灭菌。 种类：手提式、立式、卧式杀菌锅,不锈钢手提式压力蒸汽灭菌器（电热）,全自动高压灭菌器,大型高压蒸汽杀菌锅的基本操作方法,放干消毒锅内的剩余水，加入纯净水至最高水位； 放入物品，关上消毒锅门；冷凝阀开1圈；消毒钮顺时针拨至“关”； 选择所需的杀菌压力0.07、0.11或0.14Mpa后；开启电源； 当温度达到100左右时就可将消毒钮顺时针拨至“消毒”及冷凝阀关至刚好有冷凝水和蒸气冒出为止； 当消毒室温度达到所需温度时开始计时，到时间后关闸。,使用高压蒸汽杀菌锅的注意事项,A：为避免烫伤，只有当温度降低到70以下时放可小心的打开消毒锅门。 B：为避免消毒锅冷却后消毒室内产
8、生负压而打不开消毒锅门，所以当消毒室温度低于70时就可慢慢把门打开。 C：根据消毒物品选择排气方式： （1）.如有液体（营养液等）请选择慢排。 （2）.如只有废品等可选择快排。,手提式高压蒸汽灭菌锅的使用方法,（1）、关好排水阀门放入清水至标度为止。 （2）、将要灭菌的物品用牛皮纸盖好后放入灭菌锅中，关上器盖。 （3）、通电加温，同时打开排气活门，排尽锅内的空气，再关闭活门。 （4）、当达到所需温度时开始计时，并在此温度下保持所需的时间。,（5）、稍微打开一点排气活门，使锅内蒸气缓慢排除。 （6）、当压力表指针降到零、锅内蒸气完全排尽时，立即打开锅盖取出物品。 （7）、最后将高压灭菌器内的剩余
9、水排出。,思考题,干热灭菌和高压蒸汽法适用范围如何? 电热烘箱和高压锅如何操作? 各有哪些使用注意事项?,3、滤菌器,MF75快速抽滤器,方便过滤1000ml容量的培养液、缓冲液等，可直接保存和分装。可高温灭菌。,Nalgene 可反复用抽滤装置,（七）、普通冰箱冰柜,1、 取用冰箱冰柜内物品尽可能快，取完后及时将有用物品放回原处； 2、 关冰柜门时应轻轻合上，同时将门轻轻往外拉一下检查是否关好; 3、冰柜内的不要样品应及时清理。,菌落计数器,自动细菌菌落测定分析仪,1、可直接测读菌体本身在培养液中造成的导电度变化，或利用菌体在代谢过程中的产物所造成的导电度变化，快速测定样品中细菌含量数目。
10、2、适用于各种食品，制药，石化工厂的微生物品质管理，取代传统方法将侦测时间由3-5天减到几个小时。亦可用于做样品的抗菌性试验。,快速自动菌数导电测定仪,细胞的总数、细胞的直径、平均直径、细胞浓度等。仪器全自动操作，避免人工操作的误差，数据精确，省时省力。是您作细胞研究的好助手，是研究细胞的更高层次的选择,细胞/颗粒分析计数仪,空气微生物检测仪,适合CGMP药厂, 食品加工厂, 医院手术防, 无尘无菌室室Class100100000 之等级,微粒子落塵计数器,二、常用玻璃仪器及用具,1、移液管,1ml，2ml，5ml，10ml，25ml,（一）量器类,2、容量瓶,50ml，100ml，250ml
11、，500ml，1000ml,3、量筒,容量（ml）10、25、50、10、25、500、1000、2000,固定体积移液器,数字型可调移液器P型,4、微量取样器,（二）、其他常用玻璃器皿,3.5cm,7cm，9cm，15cm,1、培养皿,2、试管,各种试管的使用,13mmX100mm ：生化反应及凝集反应 15mmX150mm ：斜面培养 18mmX180mm：检样稀释,3、三角瓶,烧杯,容量（ml）：30、50、100、150、250、400、600、1000、2000、3000,三、玻璃器皿的清洗和灭菌,(一)、新购的玻璃器皿 1、先用热肥皂水刷洗，流水冲净。 2、再浸泡于的盐酸中数小时，
12、最后用流水冲净。,(二)、用过的玻璃器皿,1、含油脂器材的清洗,（1）、单独高压灭菌； （2）、趁热倒去污物； （3）、倒放在铺有吸水纸的篮子上，置100 烘箱中烤0.5h; （4）、再用5%的碳酸氢钠水煮两次，再用肥皂水刷洗干净。,2、含菌试管的清洗,高压灭菌后，肥皂水刷洗干净，烘干或晾干备用。,3、含菌平皿的灭菌,（1）、底盖分开放，放入桶中，高压灭菌； （2）、趁热倒去污物； （3）、肥皂水刷洗干净，烘干或晾干备用。,一、常用仪器及其使用,显微镜 冰箱 超净工作台、杀菌锅 离心机 水浴锅、培养箱 烘箱或干燥箱 匀质器 各种玻璃器材,（一）显微镜,普通显微镜的保养,1、观察完后，移去观察的
13、载玻片标本。 2、用过油浸镜的，应先用擦镜纸将镜头上的油擦去，再用擦镜纸蘸着擦镜液擦拭23次，最后再用擦镜纸将二擦镜液苯擦去。 3、转动物镜转换器，放在低倍镜的位置。 4、将镜身下降到最低位置，调节好镜台上标本移动器的位置，罩上防尘套。,数字显微镜,（二）、培养箱,智能隔水恒温培养箱 隔水培养箱 电热培养箱 生化培养箱,卧式恒温振荡培养箱,电热恒温培养箱,1、普通恒温培养箱,智能培养箱,微电脑智能化双目控温系统具有控温保护、准确、可靠。工作温度任意调节并具有偏差报警功能，镜面不锈钢内胆，外门内层用一层门，观察箱内情况时不影响箱内温度。9000系列隔水式加热方式，具有温度均匀且断电后仍能保持较长
14、时间恒温。,隔水式培养箱,隔水式培养箱数字控温，不锈钢内胆，俗称水夹套培养箱。温度均匀，断电后仍能保持较长时间恒温。,电热恒温培养箱,2、生化培养箱,3、二氧化碳培养箱,培养箱的配置和使用,配置：22（）、30（）、37（）培养箱各一个 使用注意事项： (1)箱内不能放入过热或过冷的物品，取放物品时应快速进行并做到随手关闭箱门。 (2)内放一杯水，以保持湿度。 (3)培养物不能放在最底层，也不得放置过于拥挤。 (4)每月消毒一次，先用3%的来苏尔液涂布消毒，再用清水擦净。 (5)不得当烘箱使用。,4、水浴锅,（1）37 和42 水浴锅24小时工作； （2）其余水涡锅用后关掉电源； （3）水浴锅
15、内应注加蒸馏水而非自来水，使用时请注意水位。配置： 37 、42 、56 各一个,匀浆机,（三）匀质器,高速匀浆机,无菌均质器,无菌均质器,该均质器广泛用于动物组织、生物样品、食品、化妆品的均质处理，特别适合于微生物检测样本的制备，具有均质柔和、样品无污染、无损伤、不升温、不需灭菌处理、不需洗刷器皿的特点，样本装在特制的一次性无菌均质袋中，不与仪器接触，预防交叉污染。,（四）、超净工作台,三大类 型： 侧流式、直流式和外流式,垂直流超净工作台,水平单向流洁净工作台,超净台的使用和注意事项,1、使用前先打开紫外灯照射，紫外线照射时间4060分钟； 2、使用中，有机玻璃罩受到污染，严禁用酒精棉球擦
16、拭，请用含水棉布檫拭； 3、请保持超净台整洁，不要堆积杂物； 4、使用完毕，勿忘关闭煤气开关或酒精灯； 5、请做好使用记录。 6、如遇故障，除记录在册外，还应及时与有关人员联系，尽早排除故障。 7、学期开始做无菌试验一次，以保证净化台正常使用。平时可根据情况，定期做无菌试验，以测定净化台是否符合无菌要求。,（五）、离心机,离心机的类型： 普通离心机 高速离心机 超速离心机,台式高速冷冻离心机,差速沉降（沉淀）法：,密度梯度离心法：,转子,许多离心机可以配用不同大小的离心管，只需要改变转子或使用一个与不同的吊桶/适配器相配的转子。 1水平转子：盛样品的离心管放在吊桶内，以转子的加速度运转。水平转
17、子用于低速离心机，其主要缺陷是延长了沉淀的路径。同时，减速过程中产生的对流会引起沉淀物的重新悬浮。 2角式转子：许多高速离心机及微量离心机安装。由于沉降路径短，沉淀颗粒时角式转子比水平转子的效率更高。 3垂直管转子：用于高速及超高速离心机进行等密度梯度离心时。这种转子在沉淀没有形成之前不能用来收集悬浮液中的颗粒。,转子：（a）水平转子；（b）固定转角转子；（c）垂直离心管转子,（六）、灭菌器,干热灭菌器 湿热灭菌器,1、电烘箱（干燥箱）,用途：用于玻璃器皿等耐热物品的烤干和灭菌。玻璃器皿等物的灭菌，温度160165，灭菌 2小时。,玻璃器材的干热灭菌方法,(1)将培养皿、吸管等玻璃器皿洗净干燥
18、后，用报纸包好，或装入特制的铁筒中。 (2)将包装好的玻璃仪器摆入电热烘箱中，彼此间留有一定的空隙以便流通空气。 (3)关紧箱门，打开排气孔接上电源。 (4)待箱内空气排出到一定程度时，关闭上排气孔，继续加热至一定温度后，调节温度控制旋钮固定温度，在160165保持2小时即可。(5)待自然降温冷却后(60以下)才能开门取出玻璃器皿。,2、高压灭菌锅,用途：培养基、生理盐水、废弃物、采样器、纱布、衣物的灭菌。 种类：手提式、立式、卧式杀菌锅,不锈钢手提式压力蒸汽灭菌器（电热）,全自动高压灭菌器,大型高压蒸汽杀菌锅的基本操作方法,放干消毒锅内的剩余水，加入纯净水至最高水位； 放入物品，关上消毒锅门
19、；冷凝阀开1圈；消毒钮顺时针拨至“关”； 选择所需的杀菌压力0.07、0.11或0.14Mpa后；开启电源； 当温度达到100左右时就可将消毒钮顺时针拨至“消毒”及冷凝阀关至刚好有冷凝水和蒸气冒出为止； 当消毒室温度达到所需温度时开始计时，到时间后关闸。,使用高压蒸汽杀菌锅的注意事项,A：为避免烫伤，只有当温度降低到70以下时放可小心的打开消毒锅门。 B：为避免消毒锅冷却后消毒室内产生负压而打不开消毒锅门，所以当消毒室温度低于70时就可慢慢把门打开。 C：根据消毒物品选择排气方式： （1）.如有液体（营养液等）请选择慢排。 （2）.如只有废品等可选择快排。,手提式高压蒸汽灭菌锅的使用方法,（1
20、）、关好排水阀门放入清水至标度为止。 （2）、将要灭菌的物品用牛皮纸盖好后放入灭菌锅中，关上器盖。 （3）、通电加温，同时打开排气活门，排尽锅内的空气，再关闭活门。 （4）、当达到所需温度时开始计时，并在此温度下保持所需的时间。,（5）、稍微打开一点排气活门，使锅内蒸气缓慢排除。 （6）、当压力表指针降到零、锅内蒸气完全排尽时，立即打开锅盖取出物品。 （7）、最后将高压灭菌器内的剩余水排出。,思考题,干热灭菌和高压蒸汽法适用范围如何? 电热烘箱和高压锅如何操作? 各有哪些使用注意事项?,3、滤菌器,MF75快速抽滤器,方便过滤1000ml容量的培养液、缓冲液等，可直接保存和分装。可高温灭菌。,
21、Nalgene 可反复用抽滤装置,（七）、普通冰箱冰柜,1、 取用冰箱冰柜内物品尽可能快，取完后及时将有用物品放回原处； 2、 关冰柜门时应轻轻合上，同时将门轻轻往外拉一下检查是否关好; 3、冰柜内的不要样品应及时清理。,菌落计数器,自动细菌菌落测定分析仪,1、可直接测读菌体本身在培养液中造成的导电度变化，或利用菌体在代谢过程中的产物所造成的导电度变化，快速测定样品中细菌含量数目。 2、适用于各种食品，制药，石化工厂的微生物品质管理，取代传统方法将侦测时间由3-5天减到几个小时。亦可用于做样品的抗菌性试验。,快速自动菌数导电测定仪,细胞的总数、细胞的直径、平均直径、细胞浓度等。仪器全自动操作，
22、避免人工操作的误差，数据精确，省时省力。是您作细胞研究的好助手，是研究细胞的更高层次的选择,细胞/颗粒分析计数仪,空气微生物检测仪,适合CGMP药厂, 食品加工厂, 医院手术防, 无尘无菌室室Class100100000 之等级,微粒子落塵计数器,二、常用玻璃仪器及用具,1、移液管,1ml，2ml，5ml，10ml，25ml,（一）量器类,2、容量瓶,50ml，100ml，250ml，500ml，1000ml,3、量筒,容量（ml）10、25、50、10、25、500、1000、2000,固定体积移液器,数字型可调移液器P型,4、微量取样器,（二）、其他常用玻璃器皿,3.5cm,7cm，9cm
23、，15cm,1、培养皿,2、试管,各种试管的使用,13mmX100mm ：生化反应及凝集反应 15mmX150mm ：斜面培养 18mmX180mm：检样稀释,3、三角瓶,烧杯,容量（ml）：30、50、100、150、250、400、600、1000、2000、3000,三、玻璃器皿的清洗和灭菌,(一)、新购的玻璃器皿 1、先用热肥皂水刷洗，流水冲净。 2、再浸泡于的盐酸中数小时，最后用流水冲净。,(二)、用过的玻璃器皿,1、含油脂器材的清洗,（1）、单独高压灭菌； （2）、趁热倒去污物； （3）、倒放在铺有吸水纸的篮子上，置100 烘箱中烤0.5h; （4）、再用5%的碳酸氢钠水煮两次，再
24、用肥皂水刷洗干净。,2、含菌试管的清洗,高压灭菌后，肥皂水刷洗干净，烘干或晾干备用。,3、含菌平皿的灭菌,（1）、底盖分开放，放入桶中，高压灭菌； （2）、趁热倒去污物； （3）、肥皂水刷洗干净，烘干或晾干备用。,4、含菌吸管的清洗,（1）、把含菌吸管投入3%的来苏尔液内浸泡30min以上杀菌； （2）、用肥皂水洗涤一次； （3）、最后用清水冲洗干净即可。,5、载玻片及盖玻片的清洗,（1）将载玻片及盖玻片分别浸入5 %的来苏尔液内浸泡过夜，取出水洗干净； （2）盖片用软布擦干即可； （3）染色用的载玻片要放入肥皂水中煮沸10min，再用肥皂水刷洗干净，最后用95%的酒精浸泡片刻，晾干备用。,（三）、玻璃器材的灭菌,（1）清洗后烘干； （2）加塞包扎； （3）灭菌:干热灭菌:160 165烘箱中烤2h湿热灭菌:121 20min,思考题,1、在微生物实验室中如何配置培养箱,使用中要注意哪些问题? 2、在微生物实验室中如何配置水浴锅,使用中要注意哪些问题? 3、如何正确使用超净台? 4、如何正确使用干热灭菌方法对玻璃器材进行灭菌? 5、简述手提式高压蒸汽灭菌锅的使用方法 6、如何进行玻璃器皿的清洗和灭菌?,感谢您的关注,
