1、,中国药典2015年版无菌检查法的增修订内容,1、无菌 是指某一物体或某一环境中不含有活的微生物。 2、无菌检查法 用于检查药典要求无菌的药品、生物制品、医疗器具、原 料、辅料及其他品种是否无菌的一种方法。 3、无菌操作 是指在无菌环境条件下，在对无菌制品或无菌器械等进行检验的过程中，能防止微生物污染与干扰的一种常规操作方法。 4、无菌技术 是指在微生物试验工作中，控制或防止各类微生物的污染及其干扰的一系列操作方法和有关措施，其中包括无菌环境设施、无菌试验器材及 无菌操作。 5、无菌检查法的局限性 若供试品符合无菌检查法的规定,仅表明了供试品在该检验条件下未发现微生物污染。也就是无菌试验并不能
2、用于保证整批产品 的无菌性，但是它可用于确定批产品不符合无菌要求。,灭菌产品的无菌保证不能依赖于最终产品的无菌检验，它是作 为确定批无菌产品是否无菌的一个检验项目，而产品的无菌保 证要取决于生产过程中采用合格的灭菌工艺、良好的无菌保证 体系和严格的GMP管理。1.理论上的局限性2.统计概率的局限性3.检验条件的局限性,主要内容,我国药典无菌检查法的历史发展 我国药典无菌检查法与欧美药典的差异 中国药典2015年版通则（1101）无菌检查法的增修订内容 2015版中国药典无菌检查法 医院制剂进行微生物控制的必要性,我国药典无菌检查法的历史发展,我国药典无菌检查法的历史发展,我国药典无菌检查法与欧
3、美药典的差异,2015版药典无菌检查法的增、修订内容,1、方法应用范围增加“生物制品”。2、实验环境的修订。3、培养基体系的修订。4、检查方法的整合修订。5、参照USP 对表2、表3的整合修订。,实验环境的重大修订,动态,无菌检查环境修订,培养基增修订内容,适用范围,培养基灵敏度检查实验菌株的修订,菌液制备用培养基,方法适用性试验的修订,ICH Q6B， USP、EP、BP、JP无菌检查法中生物技术产品/及生物制品检定规程、标准没有对生物制品作出特殊的规定。 整合中的焦点： 培养温度三部无菌检查法规定样品接种硫乙醇酸盐流体培养基必须分成双份，分别置3035、 2025两个温度下培养。以致在取样
4、量、检验量、接种方式、培养温度、阳性对照试验等方面存在与二部不一致的规定。,修订原则：以国际发展趋势为主导，遵照2015年版药典编制大纲的要求进行，以二部为基础，整合稿保留了生物制品无菌检查法的特点，在检验数量、检验量、阳性对照、培养温度方面互相兼顾，作原则性要求而不作具体细则规定。致力于逐步修订完善。,检验数量的整合,检验量的整合,检验量的整合,参照USP 对表1、表2、表3整合修订内容,2010版 表1. 批出厂产品最少检验数量 。 表2. 液体制剂最少检验量及上市抽验样品的最少检验数量。 表3. 固体制剂最少检验及上市抽验样品的最少检验数量。 2015版 表1.批出厂产品及生物制品的原液
5、和半成品最少检验数量。 注 若供试品每个容器内的装量不够接种两种培养基，那么表中的最少检验数量加倍。表2. 上市抽验样品的最少检验数量 （包括液体和固体制剂）。 注 若供试品每个容器内的装量不够接种两种培养基，那么表中的最少检验数量加倍。抗生素粉针剂（5g) 及抗生素原料药的最少检验数量为6瓶（或支）。筒装固体原料的最少检验数量为4个包装。根据具体情况定表3. 供试品的最少检验量（包括液体和固体制剂）。 注 如果医疗器械体积过大，培养基用量可在2000 ml以上，将其完全浸没。,阳性对照试验按原二部的规定：供试品用量同供试品无菌检查每份培养基接种的样品量。阳性对照试验的菌液制备同方法适用性试验
6、，加菌量小于100CFU。阳性对照管培养4872小时应生长良好。,阴性对照试验阴性对照试验按原二部的规定：取相应溶剂和稀释液、冲洗液同法操作，作为阴性对照。阴性对照不得有菌生长。,薄膜过滤法,直接接种法,培养及观察整合,结果判断整合按原二部的规定,2015版无菌检查法增、修订内容说明,1.无菌检查法收载于中国药典三部通则中，一部和二部内容一致 2.以2010年版二部的“无菌检查法”为基础进行整合和修订 3. 保留了生物制品的特点。如检查数量、硫乙醇酸盐流体培养基接种份数和培养温度等。 4.在无菌条件下进行试验，环境必须达到无菌检查的要求。 5.改良马丁培养基修订为胰酪大豆胨液体培养基。 6.方
7、法验证试验修订为方法适用性试验。 7.由于培养基的改变，培养基的灵敏度和方法适用性试验也做了修订。 8.修订了表一、表二、表三的内容。,方法适用性试验的菌株,医院制剂当前面临的形势医院制剂微生物检查重点个例,医院制剂进行微生物控制的必要性,医院制剂当前面临的形势 贯彻国家药品安全“十二五”规划，加强对医疗机构制剂监督管理。 统一标准、提高标准，完成质量标准修订工作，保证制剂质量。 高风险制剂制定科学、合理的质量标准和技术规范，确保安全、有效和质量可控。 淘汰市场巳有供应或疗效不确等不符合国家注册要求的品种。 医院制剂微生物检查的现状,医院制剂微生物检查的现状 领导班子有待重视。 微生物检验人员
8、缺乏，技术力量薄弱。 基本的仪器设备空缺。 操作不规范，标准掌握不透。 部分单位没有正常开展微生物检验工作。,医院制剂微生物检查重点 妇科、儿科及风险高、质量可控不强的冲洗剂、眼用制剂及用于烧伤、创伤等需要进行无菌检查严格的制定质量标准。 微生物检查应对其方法可行性，可靠性进行验证（适用性检查），以保证检验方法的科学性，检验结果的准确性。,国家规定 滴眼液应进行无菌检查 2010版中国药典制剂通则规定眼用制剂照无菌检查法检查,应符合规定。 国家局（2010）43号文“关于实施中国药典2010年版有关事宜的公告” 五、中国药典关于眼用制剂无菌要求的具体执行时间将根据药品生产质量管理规范实施的要求
9、另行规定。 国家局（2012）106号文，眼内注射液，眼内插入剂，供手术、伤口、角膜穿透伤用的眼用制剂以及眼用液体制剂应在2013年12月31日前达到新修订药品GMP要求，其它眼用制剂应在2015年12月31号前达到新修订药品GMP要求。,滴眼液无菌检查薄膜过滤法 进行方法适用性试验保证采用正确的检验方法 对每株试验菌逐一进行验证。 检验方法 现行中国药典。 培养基与试验菌株同微生物计数方法,检验方法,滴眼液无菌检查薄膜过滤法,方法适用性试验 取样量 批产量200支，每种培养基最少检验数量10支，装量 5ml8 ml, 够接种两种培养基，加上阳性用量共15支（瓶）全量过膜，每膜5瓶，每菌5瓶 过膜，冲洗，每膜100ml /次，总量不超过1000 ml 。 最后一次的冲洗液加100cfu 试验菌，接种相应培养基。 另取同体积培养基罐，加100cfu试验菌作阳性。 各试验菌同法操作。 分别置规定温度培养 35天,分别加 100cfu 各菌,5支,5支,5支,5支,5支,5支,黑,白,生,枯,金,大,硫盐,TSB,大,金,生,枯,白,黑,硫盐,TSB,分别加 100cfu 各菌,对照管比较,置规定温度 培养 35天,方法适用性试验滴眼液薄膜过滤法,0冲洗（无抑菌）,试验组,对照组,
