1、微生物学实验 细菌数量的测定,细菌数量的测定,实验目的： 1学习微生物数量测定中常用的基本原理2掌握几种测定细菌数量的方法3学会使用血细胞计数板进行计数。,细菌数量的测定,测定方法1 显微镜直接计数（计数板计数、载玻片计数）2 平板菌落计数3 比浊法 材料用具菌种： 酵母菌仪器： 显微镜、血细胞计数板、计数器、无菌 吸管、滤纸、盖玻片,计数室,计数室（中间大方格）的长和宽各为1mm，深度为0.1mm，其体积为_mm3 ，合_mL。,1mm,0.1,110-4,血细胞计数板 （希里格式2516、，麦式 1625）,载玻片,盖玻片,计数室,正面图,B 侧面图,计数室,计数室分为25中格（双线边）,
2、每一中格又分为16小格,计数室是由_个小格组成,2516=400,细菌数量的测定,操作步骤 1 菌液稀释 2 加样将计数板水平放置试验台上，盖上盖玻片于计数室上方，用吸管将菌液吹吸均匀，然后吸取少量菌液，从计数板一侧中间平台与盖玻片接触的边缘处加样，让菌液自行渗入并充满计数室，多余的菌液用滤纸吸去加样一气呵成，不可有气泡产生，不可使盖玻片悬浮,细菌数量的测定,3 定位计数室现在低倍镜下找到计数板大方格的位置，转换高倍镜后，适当调暗光线至计数室线条清晰为止,4 计数,A1,A2,A5,A3,A4,选取如图5个中方格，进行计数。当遇上细胞位于分界线上时，按如下规则计数：记上不记下，记左不计右,记上不记下，记左不计右,计数室细胞数量太多，则菌液需要稀释再计数，每个中方格细胞数量不超过50个为宜。,细菌数量的测定,计算菌液浓度1 ml培养液中酵母菌数量（个/ml）=,平均每个中格酵母细胞数25104,80小格内酵母细胞个数80400104稀释倍数,稀释倍数,细菌数量的测定,6 血细胞计数板的清洁血细胞计数板使用后，用自来水冲洗，切勿用硬物洗刷，洗后自行晾干或用吹风机吹干，或用95的乙醇、无水乙醇、丙酮等有机溶剂脱水使其干燥。干燥后放回计数板盒，注意安全，玻璃易碎！,
