1、实验十 大分子物质的水解实验,实验目的,证明微生物对各种大分子具有分解能力,且其分解能力与微生物和有机物的种类不同而不同。 掌握微生物大分子水解实验的原理与方法。,微生物对大分子物质不能直接吸收,必须靠产生的胞外酶(胞外酶主要为水解酶)将大分子物质分解后才能吸收利用。这些过程均可通过观察细菌菌落周围的物质变化来证实:淀粉遇碘会产兰色,但细菌水解淀粉的区域,用碘测定不再产生兰色,表明细菌产生了淀粉酶。明胶是由胶原蛋白经水解产生的蛋白质,有些微生物可产生一种称作明胶酶的胞外酶,水解蛋白质,使明胶液化。,实验原理,淀粉,单糖,(蓝色),(无色),加碘液,1、淀粉水解实验,2、明胶水解实验,明胶,氨基
2、酸,(固态),(液态),25以下,水解,水解,实验内容,实验菌种,枯草芽孢杆菌,大肠杆菌,金黄色葡萄球菌,淀粉水解实验步骤,倒平板,用记号笔在平板底部划成三部分,将三菌种分别在不同的部分划线接种, 在平板的反面分别对应写上菌名,37 培养24小时,用碘液测定结果,菌苔周围出现无色透明圈,说明淀粉已被水解,为阳性。 透明圈的大小可初步判断该菌水解淀粉能力的强弱,即产 生胞外淀粉酶的高低,淀粉水解实验,明胶水解实验步骤,取三支明胶培养基试管,用记号笔标明菌种名 用接种针分别穿刺接种 将接种后的试管置20 中培养2-5天 观察明胶液化情况,明胶水解实验,实验报告,结果(或),思考题 1)你怎样解释淀粉酶是胞外酶而非胞内酶? 2)不利用碘液,你怎样证明淀粉水解的存在? 3)接种后的明胶试管可以在35 培养,在培养后你必须做什么才能证明水解的存在?,