1、食品微生物实验室的基本要求与管理严纪文GB4789.1-2010总则： 3.1环境n 3.1.1实验室环境应不影响检测结果的准确性。n 3.1.2实验室的工作区域应与办公室区域明显分开。n 3.1.3实验室工作区域面积和总体布局应能满足从事检测工作需求，实验室布局应采用单方向工作流程，避免交叉污染。n 3.1.4实验室内温度、湿度、照度、噪声和洁净度等应符合工作要求。n 3.1.5一般样品检测应在洁净区域 (包括超净工作台或洁净实验 室 )进行，洁净区域的应有明显标示。n 3.1.6病原微生物分离鉴定工作应在二级生物安全实验室 (Biosafety level 2 BSL-2) 进行。洁净实验
2、室与 BSL-2实验室的区别n 百级洁净实验室只针对实验环境提出洁净要求，不提供对人员或环境的 生物安全 保护。 (超净工作台不能替代生物安全柜 )。n 普通的食品微生物实验 (不进行病原微生物分离与鉴定 )只要求在洁净实验室进行。n 进行病原微生物分离与鉴定必须在 BLS-2实验室中进行。什么是生物安全实验室？n 是通过规范的实验室设计建造、实验设备的配置、个人防护装备的使用（硬件）、严格遵从标准化的操作程序和管理规程等（软件）： 确保 操作 生物危险因子 的工作人员 不受实验对象的伤害； 确保 周围 环境不受其污染； 确保实验因子保持原有本性 所采取综合措施的实验室。生物安全防护的基本原则
3、 (三要素 )n 安全设备、个体防护装置和措施 。n 实验室的特殊设计和建设要求 。n 严格的管理制度和标准化的操作程序和规程目标确保实验室工作人员不受实验对象侵染， 确保周围环境不受其污染的目的。 生物安全实验室设施的基本要求n 必须为实验室安全运行、清洁和维护提供足够的空间。n 实验室的墙壁、天花板和地面应光整、易清洁、防渗漏并耐化学品和消毒剂的腐蚀。地板应防滑。n 实验台面应防水，并可耐消毒剂、酸、碱、有机溶剂和中等热度的作用。 n 应保证实验室内所有活动的照明，避免不必要的反光和闪光。n 实验室器具应坚实耐用，在实验台、生物 安全柜和其它设备之间及其下面要保证有足够的空间以便进行清洁。
4、n 应当有足够的储存空间。n 应 当 有 足 够 的 储 存 空 间 摆放随时使用的物品 (试剂、气体等 )。n 在实验室工作区外应当有存放外衣和私人物品的设施。 还应当有供长期使用的存储空间。 n 每个实验室都应有洗手池，并最好安装在出口处，尽可能用自来水 (要有防止嚼齿动物和节肢动物侵扰的装置 )。n 实验室的门应有可视窗，并达到适当的防火等级，最好能自动关闭。n 二级生物安全水平时，应在靠近实验室的位置配备高压灭菌器或其它清除污染的工具。n 安全系统应当包括消防、应急供电、应急淋浴及洗眼设施。n 应当考虑设置机械通风系统，以使空气向内单向流动。如果没有机械通风系统，实验室窗户应当能够打开
5、，同时安装 防虫纱窗。 n 在实验室内应有基本生物安全设备： 生物安全柜 (一级或二级）、移液助器、乳胶手套等百级洁净实验室与 BSL-2实验室的区别n 百级洁净实验室的洁净度要求：空气洁净等级 含尘浓度 含菌浓度 尘粒粒径(m ) 尘粒数（个 m3 ） 沉降菌(cm 碟0.5h） 浮游菌(个 m3) 100级 0.5 3,500 1 5 5 0 10000级 0.5 350,000 3 100 5 2,000 100000级 0.5 3,500,000 10 500 5 20,000 大于 100000(相当于300000级 ) 0.5 10000000 5 61800 BSL-2实验室的主
6、要技术指标级别 洁净度级别最小换气次数 (次 /h)与室外方向上相邻相通房间的最小负压差(Pa)温度 相对湿度 %噪声dB(A)最低照度 lx一级 _ 可开窗 _ 1828 70 60 200二级 _ 可开窗 _ 1827 3070 60 300三级 7或 8 15或 12 -10 1525 3060 60 350四级 7或 8 15或 12 -10 1824 3060 60 350注： BSL-3主要实验室相对于大气的最小负压不应小于 -30Pa， BSL-4主要实验室相对于大气的最小负压不应小于 -40Pa。本表中的噪声不包括生物安全柜、动物隔离器的噪声，如包括上述设备的噪声，则最大不应超
7、过68dB(A)。二级生物安全防护水平 (BSL 2） n 二级生物安全防护水平是指实验室的操作、安全设备、和设施适用于操作我国的 第三类（少量二类）危害的致病微生物。n 二级生物安全防护水平适合于从未知病原的人身上取血、体液和组织的检测和研究（可能含有高致病微生物）。 BSL 2：实验室设施 (二级屏障 ) BSL-2实验室生物安全标识生物安全柜注意乳胶手套的使用千级无菌实验室风淋室食品微生物无菌室的基本要求及管理 n 无菌室的基本建设要求 根据本实验室所涉及的生物安全等级，无菌室的设计应符合 GB 50364(生物安全实验室建筑技术 )和 GB 19489(生物安全通用要求)的相关要求。
8、无菌室大小应满足检验工作的需要。内墙为浅色，墙面和地面应光滑，墙面与地面、天花板连接处应呈凹弧形，无缝隙，无死角，易于清洁与消毒。 无菌入口处应开设缓冲间，缓冲间内应安装非手动式形关的洗手盆，并可有毛巾。缓冲间应有足够的面积以保证操作人员更换工作服和鞋帽。 无菌室内 工作台的高度约 80cm，工作台应保持水平。工作台面应无渗漏，耐腐蚀，易于清洁、消毒。 无菌室内光照应分布均匀， 工作台面的光照度应不低于 540lx。 无菌室内应具备适当的通风和温度调节条件。 无菌室的推荐温度为 20 ，相对湿度为 40%60%。 缓冲间及操作室内均应设置达到空气消毒效果的紫外灯或其它适宜的消毒装置。n 无菌室
9、的管理 无菌室在使用前和使用后应进行有效的消毒，消毒方法参见附录 D。 无菌室的消毒效果应至少每两周验证一次。 应制定清洁、消毒、灭菌、使用和应急处理程序。 应建立环境监测结果，并归档保存。 不符合规定时应立即停止使用。微生物实验室消毒处理方法n 无菌室紫外线消毒 在室温 2025 时， 220V30W紫外灯垂直 1.0m处的 253.7nm紫外线辐射强度应 70W/cm2 ， 低于此值时应更换。适当数量的紫外灯， 确保平均每立方米应不少于 1.5W。 紫外线消毒时，无菌室内应保持清洁干燥。 在无人条件下，可采取紫外线消毒， 作用时间应 30min， 室内湿度 20 或 40 、相对湿度 60
10、%时，应适当 延长 照射时间。 用紫外线消毒物品表面时，应使照射表面受到紫外线的直接照射，且应达到足够的照射剂量。 人员在关闭紫外灯后至少 30min方可入内操作。 按照 ISO18953的规定，评价紫外线的消毒与杀菌效果。n 无菌室臭氧消毒 封闭无菌室内，无人条件下， 采用20mg/m3浓度的臭氧，作用时间应 30min。 消毒后臭氧浓度 0.2mg/m3时方可入内操作。 按照 GB/T18202的规定，检测室内臭氧浓度。n 无菌室空气灭菌效果验证方法 (沉降法 ) 在消毒处理后与开展检验活动之前期间采样。 取样位点的选择应基于人员流量情况和做试验的频率。一般情况下，无菌室面积 30m2时 ，从所设定的一条对角线上选取 3点，即中心 1点，两端各距墙 1m处各取 1点；无菌室面积 30m2时，选取东、西、南、北、中 5点，其中东点、西点、南点、北点均距墙 1m。无菌室(30m2)无菌室(30m2)无菌室 ( 30m2)
