1、过氧化氢酶(CAT) 试剂盒说明书1、测定原理：过氧化氢酶(CAT)分解 H2O2 的反应可通过加入钼酸铵而迅速中止，剩余的 H2O2 与钼酸铵作用产生一种淡黄色的络合物，在 405nm 处测定其变化量，可计算出 CAT 的活力。试剂一(ml)2、试剂组成与配制：试剂一：液体 100 ml1 瓶，4保存 6 个月。试剂二：底物液体 10 ml1 瓶，4保存 6 个月。试剂三：显色粉剂1 瓶，4保存 6 个月。加双蒸水至 100 ml 溶解，4保存 1 个月。 （如果底部有不溶粉末沉淀，直接取上清使用，不影响测定结果）试剂四：液体 10 ml1 瓶，4保存 6 个月。天冷时会凝固，临用前 37水
2、浴至透明方可使用。3、组织样本的检测1、组织匀浆液的制备：准确称取组织重量，按重量(g)：体积 (ml)=1：9 的比例加入 9 倍体积的生理盐水，冰水浴条件下，制备成 10%的组织匀浆，2500 转/分离心 10 分钟，取上清，再用生理盐水稀释成最佳取样浓度，待测(最佳取样浓度摸索减附录) 。2、操作表：对照管 测定管组织匀浆(ml) 0.05试剂一(37预温)(ml) 1.0 1.0试剂二(37预温)(ml) 0.1 0.1混匀，37准确反映 1 分钟（60 秒）试剂三(ml) 1.0 1.0试剂四(ml) 0.1 0.1组织匀浆(ml) 0.05混匀，波长 405nm，光径 0.5cm，
3、双蒸水调零，测定各管吸光度值。注：一般样本没有高脂等导致显著差异情况，对照管的样本更换成双蒸水，做 1-2 管对照即可。如需做样本自身对照，则试剂盒所测定样本数量减至 48 样。3.组织中 CAT 活力的计算：（1）定义：每毫克组织蛋白每秒种分解 1umol 的 H2O2 的量为一个活力单位。（2）计算公式： )ml/gprot(60127)OD-()mgprot/U(CAT*中中中中中 注：*271 为斜率的倒数（3）计算举例：取 10%水稻叶片匀浆 0.05ml 做 CAT 检测，测得对照管吸光度为 0.605，测定管吸光度为0.332，同时测得 10%水稻叶片匀浆蛋白浓度为 3.1303 mgprot/ml。则计算结果为： /mgprotU7351.01.30562713.074.)mgprot/U(CAT 中中注：1.测定血清和血浆时，如果样本不溶血，每批样本只需要随机挑 2 个样本做对照或者用双蒸水代替额样本做对照；如果样本溶血的话，必须每个样本都要做对照。2.测定组织匀浆时，如果样本不是高脂，每批样本只需要随机挑 2 个样本做对照或者用双蒸水代替额样本做对照；如果样本高脂，必须每个样本都要做对照。3.测定全血时，必需每个样本都要做对照。
